Wizualizacja i mapowanie ścieżek neuronalnych w wycinku mózgu ciała migdałowatego
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 4:18 min. • July 8th, 2025
W mózgu myszy ciało migdałowate zawiera neurony, które tworzą połączenia synaptyczne z przyśrodkową korą przedczołową lub neuronami mPFC.
Weźmy wycinek mózgu ciała migdałowatego, w którym neurony mPFC wyrażają światłoczuły kanał rodopsyny połączony z białkiem fluorescencyjnym.
Umieść wycinek w komorze rejestracyjnej i zwizualizuj go pod mikroskopem fluorescencyjnym, aby zlokalizować neurony mPFC.
Przełącz się na widok jasnego pola i wprowadź pipetę krosową zawierającą roztwór wewnętrzny.
Zastosuj nadciśnienie, aby przesunąć pipetę w kierunku neuronu ciała migdałowatego.
Po kontakcie neuronalnym tworzy się dołek.
Zastosuj ssanie, aby uzyskać szczelne uszczelnienie.
Kontynuuj ssanie, aby rozerwać membranę, nawiązując kontakt z wnętrzem komórki.
Oświetl plasterek, aby aktywować neuronalny kanał kanałowy mPFC, wyzwalając napływ jonów dodatnich, generowanie potencjału czynnościowego i uwalnianie neuroprzekaźników.
Neuroprzekaźniki wiążą się z postsynaptycznymi receptorami neuronów ciała migdałowatego, powodując napływ jonów i wytwarzanie prądu.
Zarejestruj postsynaptyczny prąd neuronalny, aby przeanalizować połączenie mPFC-ciało migdałowate.
Aby przygotować mikroskop płatowy do optogene
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych