JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:05 min. • July 8th, 2025
Weź mózg myszy w lodowatym buforze i usuń jego tylną część zawierającą móżdżek i przednią część z przyśrodkową korą przedczołową lub mPFC.
Środkowa część zawiera obszary ciała migdałowatego, które przetwarzają emocje, takie jak strach i niepokój.
Przesuń część mózgu na bibułę filtracyjną, aby usunąć nadmiar buforu.
Przyklej go do stolika i przymocuj blok agaru za sekcją, aby zapobiec jego ruchowi podczas krojenia.
Umieść ten etap w komorze cięcia wibratomu z lodowatym buforem.
Wytnij sekcję, aby uzyskać cienki koronalny wycinek mózgu.
Odsłania to obszary ciała migdałowatego, które zawierają połączenia synaptyczne między neuronami ciała migdałowatego i projekcjami neuronów mPFC, które regulują odpowiedzi ciała migdałowatego.
Pokrój plasterek na dwie połówki, z których każda zawiera obszar ciała migdałowatego.
Następnie przenieś je do komory interfejsu zawierającej natleniony sztuczny płyn mózgowo-rdzeniowy.
Odzyskaj plastry w temperaturze fizjologicznej, aby utrzymać żywotność neuronów.
Po uzyskaniu mózgu użyj skalpela, aby usunąć móżdżek i wewnętrzną część mózgu, a następnie schłodzić środkową część mózgu w lodowatym roztworze tnącym, tak jak poprzednio. Osusz mózg bibułą filtracyjną, a następnie przyklej go do etapu wibratomu.
Ponownie przymocuj dodatkowy blok agaru za mózgiem, aby zapewnić stabilność podczas krojenia. Po zamontowaniu stolika w komorze tnącej wypełnionej roztworem tnącym o temperaturze 4 stopni Celsjusza, przeciąć 320-mikronowe odcinki koronalne przez ciało migdałowate. Przetnij je na pół i zbierz sekcje w komorze interfejsu, tak jak poprzednio.