Ocena funkcjonalnego połączenia nerwowo-mięśniowego za pomocą jednoczesnej stymulacji optycznej i nagrywania wideo

Zacznij od bioreaktora z komorą mięśniową zawierającą tkankę mięśniową zatopioną w kolagenie, wspartą na filarach komory.

Kanał neurosfery zawiera neurosferę w macierzy kolagenowej. Neurony ruchowe neurosfery wyrażają kanały wrażliwe na światło.

Dodaj pożywkę różnicującą zawierającą neuronalne czynniki wzrostu, które stymulują neurony do rozszerzania swoich projekcji.

Regularnie wymieniaj pożywkę, aby zapewnić ciągłe rozciąganie neuronów w kierunku tkanki mięśniowej, tworząc połączenia nerwowo-mięśniowe.

Obserwuj bioreaktor pod mikroskopem wyposażonym w kamerę i źródło niebieskiego światła.

Zastosuj impulsy niebieskiego światła, aby otworzyć wrażliwe na światło kanały w neuronach, umożliwiając przepływ jonów z pożywki i stymulując neurony do generowania sygnałów elektrycznych.

Sygnały te przemieszczają się przez projekcje neuronalne do połączeń nerwowo-mięśniowych, przekazując sygnał elektryczny do tkanki mięśniowej.

Nagrywaj wideo jednocześnie. Stopniowe kurczenie się włókna mięśniowego potwierdza rozwój funkcjonalnego połączenia nerwowo-mięśniowego.

Przygotuj mieszankę 4 do 1 3 miligramów na mililitr kolagenu I i rozpuszczonej macierzy błony podstawnej. Następnie ponownie zawieś