Name: Metodologia testowania multipleksowego fluorometrycznego testu immunologicznego i rozwiązywanie problemów (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-12-12T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 5 s
Description: Poznaj metodologię MFIA do wykrywania przeciwciał przeciwko zakaźnym czynnikom u zwierząt laboratoryjnych. Technologia Luminex xMAP umożliwia jednoczesne badanie wielu próbek, zwiększając efektywność serosurveillance.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Badania przedstawione w niniejszej publikacji były wspierane przez firmę Charles River.

<ol><li>MFIA Rodent Methods Manual [Internet]. , Charles River. Available from:
		
	 <a target="_blank" href=" http://www.criver.com/SiteCollectionDocuments/rm_ld_r_MFIA Rodent_Methods_Manual.pdf"> http://www.criver.com/SiteCollectionDocuments/rm_ld_r_MFIA Rodent_Methods_Manual.pdf</a> (2011).</li>
<li>Rodent MFIA Validation Summary Report [Internet]. , Charles River. Available from:
		
	 <a target="_blank" href="http://www.criver.com/SiteCollectionDocuments/rm_ld_r_MFIA _summary_report.pdf">http://www.criver.com/SiteCollectionDocuments/rm_ld_r_MFIA _summary_report.pdf</a> (2007).</li>
<li>Jacobson, R. H., et al. Principles of validation of diagnostic assays for infectious diseases. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aJacobson%2C+RH+%22Manual+of+Standards+for+Diagnostic+Tests+and+Vaccines%22">Manual of Standards for Diagnostic Tests and Vaccines</a>. , Office International des Epizooties (OIE). France. 8-15 (1996).</li>
<li>Wright, P. F. International standards for test methods and reference sera for diagnostic tests for antibody detection. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWright%2C+PF+%22Rev.+sci.+tech.+Off.+int.+Epiz%22">Rev. sci. tech. Off. int. Epiz</a>. 17 (2), Office International des Epizooties (OIE). France. 527-533 (1998).</li>
<li>Pepe, M. S. The Statistical Evaluation of Medical Tests for Classification and Prediction. , Oxford University Press. Oxford, New York. (2003).</li>
<li>Barr, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+and+interpretation+of+diagnostic+tests+for+feline+immunodeficiency+virus+infection%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Vet.+Med.+Assoc%22%5BJournal%5D)">Comparison and interpretation of diagnostic tests for feline immunodeficiency virus infection.</a> J. Am. Vet. Med. Assoc. 199, 1377-1381 (1991).</li>
</ol>

Wszyscy autorzy pracują dla firmy Charles River RADS, wiodącego dostawcy usług i odczynników do testów serologicznych zwierząt.

Proces testowania MFIA jest wysoce wydajny, wymagając mniej sprzętu oraz mniejszych objętości próbek i odczynników niż tradycyjne testy jednoparametrowe. Funkcjonalność systemu multipleksowego daje użytkownikowi elastyczność w jednoczesnym badaniu wielu szczepów lub serotypów powszechnych czynników u gryzoni laboratoryjnych (np. koronawirusów, parwowirusów itp.). Pozwala to również na projektowanie spersonalizowanych paneli kuleczek w zależności od obszaru zainteresowań (np. konkretnej rodziny wirusów) i jest możliwe do dostosowania do analizy innych rodzajów biomolekuł, w tym cytokin i innych biomarkerów. Dodatkowo umożliwia to włączenie kilku wewnętrznych testów kontrolnych w celu weryfikacji przydatności próbki i systemu, a tym samym zapewnienia dokładności wyników. Obejmują one zestawy kuleczek pokryte kontrolą tkankową oraz immunoglobulinami przeciwko immunoglobulinom (αIg) gatunku serum testowanego w celu oceny przydatności próbki. Kuleczka kontroli tkankowej wykrywa nieswoiste wiązanie immunoglobulin surowicy, a kontrola kuleczkami αIg potwierdza dodanie surowicy i obecność w niej wystarczającego stężenia immunoglobulin. Inna kuleczka kontrolna, pokryta immunoglobulinami gatunku surowicy, wykazuje, że znakowane odczynniki i czytnik testowy funkcjonują prawidłowo. Inne dostępne komercyjnie serologiczne testy w formacie multipleksowym (np. MicroArrays, ImmunoComb) mogą nie oferować tak wysokiego poziomu potwierdzenia wyników.
Zdolność do zawężenia potencjalnych źródeł niepowodzenia analizy przed powtórnym badaniem może pomóc badaczowi zaoszczędzić czas i materiały. Przed powtórzeniem analizy wadliwej próbki należy potwierdzić krytyczne aspekty MFIA. Ponieważ analizę przeprowadza się w temperaturze otoczenia, należy zweryfikować, czy temperatura w laboratorium wynosi około 27°C±2°C; wyższe temperatury mogą prowadzić do uzyskania niższych niż oczekiwano wyników dla kontroli i próbek. Płukanie jest prawdopodobnie najkrytyczniejszym etapem analizy. Upewnienie się, że płytka testowa została prawidłowo wypłukana, osuszona i resuspendowana, może wyeliminować zdecydowaną większość błędów próbkowania wynikających z niskiej liczby kulek (z powodu ich agregacji) lub niewystarczającego dodania odczynnika (utraconego w wyniku odsysania przez filtr na dnie płytki testowej). Rutynowo odliczamy 25 kulek na analizę (antygen) i nie stwierdziliśmy istotnych statystycznie różnic w wynikach przy odliczaniu większej liczby kulek, co prowadziłoby również do wydłużenia czasu odczytu płytki.
Przeprowadziliśmy kompleksowe badania walidacyjne metody MFIA na kilku gatunkach powszechnie stosowanych zwierząt laboratoryjnych (myszy, szczura, chomika, świnki morskiej i królika), aby wykazać dokładność diagnostyczną, powtarzalność i odporność metody poprzez przetestowanie dużej liczby znanych dodatnich i ujemnych próbek surowicy oraz porównanie wyników uzyskanych metodami ELISA, IFA i MFIA. Granice wykrywalności (tj. standardowe punkty końcowe miareczkowania surowicy immunologicznej) w MFIA były porównywalne, a w niektórych przypadkach przewyższały wyniki uzyskiwane za pomocą odpowiadających im testów ELISA. Swoistość diagnostyczna, mierzona przy użyciu surowic gryzoni SPF, przekroczyła 99%; ogólna zgodność między wynikami ELISA i MFIA uzyskanymi z znanych dodatnich i ujemnych surowic wyniosła ponad 95%. Podsumowując, wyniki te dowiodły, że multipleksowa metoda MFIA stanowi dobrą alternatywę dla pojedynczego testu ELISA i jest odpowiednia do zamierzonego zastosowania, tzn. w rutynowym nadzorze serologicznym kolonii zwierząt laboratoryjnych.

metodyka przeprowadzania i rozwiązywanie problemów w multipleksowym fluorometrycznym immunoprzebiegu

Multiplexed Fluorometric ImmunoAssay Testing Methodology and Troubleshooting

Aby zapewnić jakość modeli zwierzęcych stosowanych w badaniach biomedycznych, opracowaliśmy szereg strategii i metod diagnostycznych służących do określania, czy zwierzęta były narażone na przypadkowe czynniki zakaźne (wirusy, mycoplasma i inne wymagające mikroorganizmy). Infekcje u zwierząt immunokompetentnych mają zazwyczaj charakter przejściowy, jednak odpowiedzi przeciwciał w surowicy na zakażenie często można wykryć w ciągu kilku dni lub tygodni, a pozostają one obecne przez całe życie gospodarza. Serologia jest podstawową metodologią diagnostyczną stosowaną do monitorowania zwierząt laboratoryjnych. Historycznie główną metodą przesiewową w nadzorze serologicznym był pośredni test enzymatycznego referencyjnego testu immunosorpcyjnego (ELISA). Test ELISA jest wykonywany jako badanie jednoparametrowe (singleplex), w którym w jednej dołku mierzy się jedną reakcję antygen-przeciwciało drobnoustrojów. W porównaniu z nim MFIA jest wykonywany jako test multiplexowy. Ponieważ mikrosfery występują w 100 różnych zestawach kolorystycznych, w jednym dołku mikropłytki można jednocześnie przeprowadzić do 100 różnych analiz. Innowacja ta zmniejsza ilość surowicy, odczynników i materiałów jednorazowych wymaganych do rutynowych badań, zwiększając jednocześnie ilość informacji uzyskanych z jednego dołka testowego. Dodatkowo jesteśmy w stanie wprowadzić wiele wewnętrznych koralików kontrolnych w celu weryfikacji przydatności próbki i systemu, zapewniając tym samym dokładność wyników. Obejmują one zestawy koralików powlekanych kontrolą tkankową oraz immunoglobulinami anty-testowymi dla gatunku surowicy (αIg) w celu oceny przydatności próbki. Podobnie jak w testach ELISA i IFA, kontrola tkankowa wykrywa nieswoiste wiązanie immunoglobulin surowicy. Kontrola αIg (kontrola surowicy) potwierdza, że surowica została dodana i zawiera wystarczające stężenie immunoglobulin, natomiast koralik kontrolny IgG (kontrola przydatności systemu), powlekany immunoglobulinami gatunku surowicy, wykazuje, że znakowane odczynniki i czytnik Luminex funkcjonują prawidłowo.

Wykorzystując technologię mikrosfer xMAP firmy Luminex Corporation, opracowaliśmy wielowiązkowy fluorometryczny test immunoenzymatyczny (MFIA) do nadzoru serologicznego różnych gatunków zwierząt laboratoryjnych. MFIA to zawiesinowa macierz mikrosfer, w której antygen, kontrola tkankowa lub immunoglobuliny są kowalencyjnie powiązane z kolorowo kodowanymi mikrosferami polistyrenowymi. Omówiono metodę testową MFIA oraz różne zagadnienia związane z rozwiązywaniem problemów.

Metodyka przeprowadzania i rozwiązywanie problemów w multipleksowym fluorometrycznym immunoprzebiegu

Aby zapewnić jakość modeli zwierzęcych wykorzystywanych w badaniach biomedycznych, opracowaliśmy szereg strategii i metod testów diagnostycznych w celu ustalenia, czy ...

Ogólnym celem następującego eksperymentu jest wykrycie przeciwciał przeciwko przypadkowym czynnikom zakaźnym u zwierząt laboratoryjnych. Osiąga się to poprzez inkubację serum testowego z mikrosferami pokrytymi antygenem. Następnie serum inkubuje się z biotynilowanym, gatunkowo swoistym przeciwciałem przeciw immunoglobulinom, które wykrywa wszelkie kompleksy immunologiczne antygen-przeciwciało.Następnie dodaje się roztwór Fluor force FICO eryn znakowany streptawidyną w celu wykrycia biotynilowanych immunoglobulin; otrzymane wyniki wskazują na pozytywny lub negatywny status przeciwciał przeciwko powszechnym czynnikom u gryzoni laboratoryjnych na podstawie multipleksowej fluorescencji, wyniku netto immunoanalizy oraz wartości fluorescencji próbki. Główną zaletą stosowania tej techniki w porównaniu z istniejącymi metodami, takimi jak ELISA, jest to, że MFIA jest testem multipleksowym. Umożliwia to badaczowi przesiewowe wykonanie do stu różnych analiz w ramach jednego testu.Ta technika zmniejsza ilość zużytych regionów surowicy oraz materiałów jednorazowych stosowanych w istniejących metodach, jednocześnie zwiększając ilość informacji generowanych z jednego testu. Pomysł zastosowania tej metody pojawił się podczas testowania dużej liczby próbek surowicy w kierunku wielu czynników, gdy chcieliśmy ograniczyć nakład pracy oraz czas testowania. Procedurę zademonstruje Donna Cohen, starsza technolog z naszego laboratorium. Na początek należy przygotować dwa bufory wymagane do przeprowadzenia procedury multipleksowego fluorescencyjnego testu immunoenzymatycznego (MFIA).Pierwszym z nich jest rozcieńczalnik podstawowy, dostępny w ofercie firmy Charles River, który zawiera zastrzeżone środki blokujące w celu zmniejszenia nieswoistych oddziaływań dla buforu do płukania testu. Przygotować roztwór PBS z 1% BSA o pH 7.4 w celu usunięcia cząsteczek. Przefiltrować bufor przez jednostkę filtracyjną na korek butelki o rozmiarze 0.2 mikrona do sterylnych, oznakowanych pojemników, używając buforu do płukania testu.Przygotować dwukrotne stężenia biotynilowanych przeciwciał antygatunkowych, IgG lub BAG oraz streptawidyny i fikerytyny lub SPE, które zostaną użyte do znakowania kompleksów antygen-przeciwciało utworzonych podczas etapu inkubacji surowicy testowej; w celu przygotowania próbek zgromadzić następujące materiały i materiały jednorazowe: wielokanałowe i jednokanałowe mikropipety wraz z końcówkami oraz płytki mikrotitracyjne 96-dołkowe o niskim wiązaniu białek do rozcieńczania białek. Po pobraniu próbek krwi i wyizolowaniu surowicy, krótko wymieszać surowicę w wirówce przed rozcieńczeniem próbek w rozcieńczalniku pierwotnym na płytce mikrotitracyjnej 96-dołkowej, aby zapewnić prawidłowe i jednorodne napełnienie dołków; każdy dołek płytki testowej 96-dołkowej należy uprzednio zwilżyć buforem płuczącym do analizy i powoli aspirować roztwór w trakcie całego badania.Aspiracja powinna trwać od 5 do 10 sekund, aby zapobiec agregacji kulek oraz ich zbitym osadom na membranie filtra, co w obu przypadkach może wydłużyć czas odczytu na koniec analizy. Należy sprawdzić, czy drenaż cieczy ustał, osuszając spód płytki testowej ręcznikami papierowymi. Ważne jest, aby osuszać płytkę testową po każdym etapie płukania, aby zapobiec podsiąkaniu cieczy z dołków podczas inkubacji.Aby przygotować koraliki, należy rozpocząć od wymieszania zawiesiny koralików sprzężonych za pomocą wibratora vortex. Następnie należy je krótko poddać sonikacji w kąpieli ultradźwiękowej. Prawidłowe resuspensowanie koralików jest kluczowe, aby zapobiec powstawaniu agregatów, które mogą prowadzić do wydłużenia czasu odczytu.Następnie przenieś zawiesinę stokową 20x do dwukrotnie stężonego (2x) roztworu roboczego kuleczek w rozcieńczalniku podstawowym. Potem odmień 50 µL dwukrotnie stężonej (2x) zawiesiny kuleczek do każdego dołka płyty testowej, która została uprzednio zwilżona. Pipetuj 50 µL każdego dwukrotnie stężonego (2x) surowicy testowej i kontrolnej na płytę testową zgodnie z wcześniej przygotowanym schematem rozmieszczenia próbek na płycie.Zabezpiecz pokrywę płytki. Przykryj ją folią aluminiową i inkubuj płytkę testową przez 60 minut na wytrząsarce orbitalnej w temperaturze pokojowej, aby uniknąć odparowania roztworów, co mogłoby utrudnić przeprowadzenie analizy. Przez cały czas trwania etapów inkubacji płytka testowa powinna pozostać przykryta pokrywą.Dodatkowo, prędkość wytrząsania powinna wynosić od 400 do 700 RPM, aby kuleczki pozostały w zawiesinie, co umożliwi przeciwciałom z surowicy dostęp do wszystkich powierzchni sprzężonych antygenów. Po przemyciu płytki w kolejnych inkubacjach kuleczek z BAG i SPE, ponownie przemyj próbki. Następnie resuspenduj kuleczki, dodając 125 µL buforu do mycia w teście i wytrząsając przez dwie minuty przed odczytem płytki.Umieść próbkę w czytniku analizatora w ciągu 10 minut od resuspensji kulek; kulki przechodzą pojedynczo przez detektor, gdzie są poddawane działaniu dwóch laserów. Jeden laser wzbudza barwniki wewnętrzne identyfikujące zestaw kolorów kulek, a drugi wzbudza barwnik raportujący FICO erything. Intensywność fluorescencji FICO erything dla określonej liczby kulek jest raportowana jako wartość FM FI; odczytaj pierwszą studzienkę, aby zweryfikować, czy wybrany panel kulek odpowiada profilowi kulek w studzienkach testowych.Jeśli na wyświetlaczu protokołu kuleczki wypadają poza wyznaczony dla nich obszar, oznacza to wybór nieprawidłowego profilu. Kuleczki, które zostały prawidłowo resuspendowane, wypełnią określone obszary zgodnie ze wskazaniami oprogramowania czytnika do analiz. W przypadku agregacji kuleczek, będą one wypełniać swoje obszary w wolnym tempie.Płytkę testową można wyjąć z czytnika i ręcznie resuspendować zawartość dołków, aby rozdzielić kulki. Wyjmij płytkę testową z czytnika i za pomocą pipety wielokanałowej wymieszaj każdy dołek od trzech do czterech razy. Następnie umieść płytkę testową z powrotem w czytniku i kontynuuj analizę wyników.Zgłaszaj błędy, takie jak niewystarczająca liczba kulek lub spadające wyniki dla kulek IgG anty-IgG, i powtórz analizę dla tych próbek. Po wyeksportowaniu danych do programu Excel i obliczeniu wartości netto MFI ustal, czy którykolwiek z testów kontrolnych analizy nie zawiódł, z wyłączeniem surowicy immunologicznej o wysokim zakresie. Wszelkie nieprawidłowe kontrole są nieakceptowalne i analiza musi zostać powtórzona.Tabela ta przedstawia dane dla surowicy testowej i kontroli testu z typowej płytki analitycznej. Wszystkie kontrole IgG zostały zaliczone. Wyniki testów dla tej płytki wskazują, że liczne próbki reaktywne tkankowo oraz kontrole IgG nie przeszły weryfikacji, co zaznaczono pomarańczowymi studzienkami.A1C 1 oraz F1 wskazują na błąd reaktywności tkanki TC, gdzie wynik TC podano w nawiasach; Wells B 1 oraz E 1 ilustrują dwa rodzaje błędów wewnętrznej kontroli IgG: niewystarczającą ilość przeciwciał testowych lub odczynników testowych, odpowiednio BAG lub SPE. Wyniki płytki testowej są interpretowane tylko wtedy, gdy kontrola przydatności systemu oraz kontrola surowicy spełniają przedstawione tutaj kryteria akceptacji. Mikrosfery pokryte gatunkowo swoistymi przeciwciałami przeciwko immunoglobulinom surowicy testowej mogą wykazywać wyniki negatywne z powodu dodania niewystarczającej ilości próbki, zbyt dużego rozcieńczenia próbki, zastosowania niewłaściwego gatunku lub badania surowicy pochodzącej od gospodarza z niedoborem odporności.Jeśli wyniki kontrolne testu są satysfakcjonujące, indywidualne wyniki testów są klasyfikowane zgodnie z poniższymi wytycznymi. Po zastosowaniu tej procedury należy użyć dodatkowych metod, takich jak ELISA, IFA i/lub Western blot, aby potwierdzić początkowe nieoczekiwane lub pozytywne wyniki. Kluczowe jest zweryfikowanie tych wyników przed podjęciem jakiejkolwiek decyzji dotyczącej zarządzania zwierzętami.Można to osiągnąć, stosując różne metodologie na tej samej próbce lub na dodatkowych próbkach pochodzących z tej samej kolonii. Po obejrzeniu tego filmu powinni Państwo posiadać gruntowną wiedzę na temat przeprowadzania multipleksowego fluorescencyjnego testu immunoenzymatycznego oraz interpretacji wyników uzyskanych w Państwa placówce. Pozwoli to na zmniejszenie nakładu pracy przy jednoczesnym pozyskiwaniu większej ilości informacji z każdego dołka z próbką testową.

multiplexed-fluorometric-immunoassay-testing-methodology

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Metodologia testowania i rozwiązywania problemów ImmunoAssay Fluorometrycznego wieloplexowego

Ten film opisuje technikę testu immunologicznego wykorzystującą fluorescencyjne kulki magnetyczne lub mikrosfery w połączeniu z różnymi antygenami do jednoczesnego wykrywania różnych izotypów przeciwciał w próbce surowicy. Test jest pomocny w zrozumieniu serokonwersji podczas infekcji lub po szczepieniu.

Multianalitowy test immunobealikowy: Technika testu immunologicznego oparta na przepływie do jednoczesnego wykrywania wielu podtypów przeciwciał w próbce ludzkiej surowicy

Ten film demonstruje multipleksowane ilościowe wykrywanie bakterii za pomocą karboksylowanych magnetycznych mikrosfer polistyrenowych barwionych w różne zestawy. Procedura obejmuje tworzenie kompleksów perełkowo-bakteryjnych, separację magnetyczną i analizę opartą na przepływie, umożliwiając precyzyjne i jednoczesne oznaczanie ilościowe wielu bakterii w tym samym dołku reakcyjnym.

Multipleksowa ilościowa detekcja bakterii przy użyciu mikrosfer magnetycznych znakowanych barwnikiem

W obecnym klimacie ograniczonych zasobów, pojawiają się nowe technologie, które pozwalają badaczom prowadzić badania taniej, szybciej i z większą precyzją. W tym miejscu opisujemy rozwój multipleksowego testu immunologicznego na bazie przeciwciał ślinowych na bazie kulek do pomiaru narażenia ludzi na wiele patogenów środowiskowych jednocześnie.

Opracowanie testu immunologicznego Multiplex opartego na przeciwciałach ślinowych do pomiaru narażenia ludzi na patogeny środowiskowe

Obecna diagnostyka multipleksowa do wykrywania wirusów Zika, chikungunya i denga wymaga skomplikowanego przygotowania próbek i kosztownego oprzyrządowania, a także jest trudna do użycia w środowiskach o niskich zasobach. Pokazujemy diagnostykę, która wykorzystuje amplifikację izotermiczną z sondami z przemieszczonymi niciami specyficznymi dla celu, aby wykryć i zróżnicować te wirusy z wysoką czułością i swoistością.

Multipleksowana platforma diagnostyczna oparta na amplifikacji izotermicznej do wykrywania wirusów Zika, Chikungunya i Denga 1

Szczegółowy protokół dla sześciomarkerowego multipleksowego panelu immunofluorescencyjnego jest zoptymalizowany i wykonany, przy użyciu automatycznego barwnika dla bardziej spójnych wyników i krótszego czasu zabiegu. Podejście to może być bezpośrednio zaadaptowane przez dowolne laboratorium do badań immunoonkologicznych.

Zautomatyzowany multipleksowy panel immunofluorescencyjny do badań immunoonkologicznych na próbkach tkanek raka utrwalonego formaliną

Multiplex fluorescencyjna immunohistochemia to nowa technologia, która umożliwia wizualizację wielu typów komórek w nienaruszonej, utrwalonej formaliną, zatopionej parafinie tkance (FFPE). Przedstawiono wytyczne dotyczące zapewnienia udanego 7-kolorowego multipleksu wraz z instrukcjami dotyczącymi optymalizacji przeciwciał i odczynników, przygotowaniem preparatów, projektem i wskazówkami dotyczącymi unikania typowych problemów.

Optymalizacja, projektowanie i unikanie pułapek w manualnej multipleksowej immunohistochemii fluorescencyjnej

Pomimo postępów w immunohistochemii multipleksowej i obrazowaniu wielospektralnym, scharakteryzowanie gęstości i grupowania głównych komórek odpornościowych jednocześnie w endometrium pozostaje wyzwaniem. W artykule opisano szczegółowy protokół barwienia multipleksowego i obrazowania dla jednoczesnej lokalizacji czterech typów komórek odpornościowych w endometrium.

Multipleksowane fluorescencyjne barwienie immunohistochemiczne czterech typów komórek odpornościowych endometrium w nawracających poronieniach

Trzykanałowy system analizy przepływu fluorescencji z podwójnym reporterem został wykorzystany do opracowania multipleksowego testu immunologicznego opartego na koralikach, który jednocześnie ocenia próbki surowicy pod kątem IgG i IgM wywołanych przez wiele antygenów różnych gatunków Borrelia, które powodują boreliozę z Lyme w Europie i Ameryce Północnej.

Jednoczesne wykrywanie różnych klas przeciwciał w multipleksowanym teście serologicznym

Multipleksowa cykliczna immunohistochemia pozwala na wykrywanie in situ wielu markerów jednocześnie przy użyciu wielokrotnej inkubacji przeciwciał antygenowych, skanowania obrazu oraz dopasowywania i integracji obrazu. W tym miejscu przedstawiamy protokół operacyjny identyfikacji substratów komórek odpornościowych za pomocą tej technologii w próbkach raka płuc i sparowanych próbkach przerzutów do mózgu.

Multipleksowa cykliczna immunohistochemia fluorescencyjna

Ten raport opisuje zautomatyzowany protokół do multipleksowych testów immunofluorescencyjnych (mIF) na automatycznym barwniku do szkiełek. Wykazano wysoką odtwarzalność proteomiki przestrzennej na standardowych autostainerach tkankowych o wysokiej przepustowości i obrazach fluorescencyjnych na całych szkiełkach, co jest idealne do niestandardowych testów mIF na dużej liczbie szkiełek tkankowych w badaniach translacyjnych.

Wysokowydajne zautomatyzowane multipleksowe testy immunofluorescencyjne do badań translacyjnych

Multipleksowe fluorescencyjne testy immunologiczne stają się źródłem informacji do badań serologicznych. Ich zastosowanie jest jednak ograniczone ze względu na złożoność i czasochłonne procesy sprzężenia kulki z analizą koralików. Raport ten przedstawia półautomatyczny, powtarzalny protokół multipleksowego mikrokulkowego sprzężenia kulek, który jest porównywalny ze standardową metodą, a jednocześnie znacznie skraca czas oczekiwania na uzyskanie rezultatów.

Multipleksowy test serologiczny do wykrywania odpowiedzi przeciwciał na arbowirusy

Poznaj metodologię MFIA do wykrywania przeciwciał przeciwko zakaźnym czynnikom u zwierząt laboratoryjnych. Technologia Luminex xMAP umożliwia jednoczesne badanie wielu próbek, zwiększając efektywność serosurveillance.

Metodyka przeprowadzania i rozwiązywanie problemów w multipleksowym fluorometrycznym immunoprzebiegu

Przeglądaj więcej filmów