Modele myszy do miażdżycy przeszczepów

Ogólnym celem poniższego eksperymentu jest przeszczepienie naczynia dawczego do aorty brzusznej biorcy. Pierwszym krokiem jest wypreparowanie aorty piersiowej od myszy dawcy. Kolejne miejsca zespolenia tworzone są w aorcie brzusznej myszy biorcy.

Naczynie dawcze jest następnie wszczepiane do aorty brzusznej biorcy. Ostatecznie, udany przeszczep może być dostępny dzięki nienaruszonej funkcji motorycznej kończyny tylnej myszy biorcy. Ten model pomoże nam zrozumieć patogenezę stwardnienia tętniczego przeszczepu.

I jest to wyzwanie techniczne, które wymaga dużo praktyki i pacjenta, aby był doskonały. Tak więc procedurę zademonstruje dr Chen i asystent Louanne. Na początek potwierdź odpowiednią głębokość znieczulenia u myszy dawcy.

Po znieczuleniu umieść mysz w pozycji leżącej na tacy pod mikroskopem operacyjnym. Oczyść klatkę piersiową wielokrotnym szorowaniem jodu i alkoholu po odsłonięciu serca i przepłukaniu go solą fizjologiczną, usuń serce i płuca, aby odsłonić całą długość aorty piersiowej. Po wizualizacji zacznij ostrożnie wycinać aortę piersiową z dala od otaczającej tkanki.

Po dotarciu do gałęzi lędźwiowych podwiąż je w pobliżu aorty jedwabnym szwem przed ich odcięciem. Po uwolnieniu od otaczającej tkanki wyciąć całą aortę piersiową. Po wyizolowaniu przepłucz aortę dawcy heparynizowaną solą fizjologiczną i przechowuj ją w tym roztworze na lodzie do czasu przeszczepu.

Po zapewnieniu odpowiedniego znieczulenia u myszy biorcy, należy zgolić sierść z przedniej części brzucha. Zakryj oczy maścią okulistyczną i oczyść obszar, jak pokazano wcześniej. Gdy będziesz gotowy, umieść mysz w pozycji leżącej na tacy pod mikroskopem operacyjnym.

Naciąć ścianę brzucha na linii środkowej od mieczyka mieczykowatego do łonowego, a następnie użyj retraktora, aby rozsunąć ścianę i odsłonić jamę brzuszną Po odsłonięciu owiń jelita w gazę zwilżoną solą fizjologiczną i wypchnij je do góry i odsuń od jamy brzusznej. Użyj gazy zwilżonej solą fizjologiczną, aby owinąć pozostałe obszary brzucha i użyj jej, aby cofnąć odbytnicę na prawą stronę brzucha. Następnie przesuń narządy rozrodcze niżej.

Pamiętaj, aby odsłonięte tkanki były wilgotne poprzez stosowanie roztworu soli fizjologicznej. Regularnie identyfikuj aortę podnerkową położoną proksymalnie do naczynia nerkowego i dystalnie do rozwidlenia aorty. Dokładnie go rozbior, aby oddzielić go od żyły dolnej cva.

Zidentyfikuj podwiązanie i odetnij wszystkie małe gałęzie pochodzące z tego odcinka aorty. Po odizolowaniu odcinka aorty umieść zacisk naczyniowy na każdym końcu w odległości około pięciu milimetrów od siebie. Następnie utwórz miejsca zespolenia, przecinając aortę brzuszną między zaciskami.

Za pomocą ostrych mikronożyczek wyetnij mały fragment aorty z jednego odciętego końca, aby pomieścić przeszczep aorty dawcy. Przepłukać segmenty aorty między zaciskami za pomocą heparynizowanej soli fizjologicznej, aby usunąć resztki krwi. Należy pamiętać o okresowym przepłukiwaniu obu próbek aorty heparynizowanym roztworem soli fizjologicznej przez cały czas trwania zabiegu.

Następnie należy przeciąć obie strony aorty dawcy, aby utworzyć segment przeszczepu o długości 2,5 milimetra do przeszczepu. Umieść przeszczep aorty dawcy w pozycji wyrównującej bliższy i dalszy koniec dla szwów ciągłych. Najpierw umieść szwy podporowe w pozycjach godziny trzeciej i dziewiątej na obu końcach.

Następnie połącz przycięte krawędzie za pomocą trzech do czterech szwów biegnących i przywiąż szwy biegnące do szwów podporowych podwójnym węzłem dla szwów przerywanych. Zbuduj cztery miejsca zespolenia w pozycjach godziny trzeciej i dziewiątej po obu stronach przeszczepu. Pierwszy. Następnie połącz przycięte krawędzie za pomocą trzech do czterech ściegów umieszczonych między każdym z tych miejsc.

Po założeniu szwów zwolnij dystalny zacisk, aby umożliwić wsteczny przepływ do przeszczepu. Zidentyfikuj wszelkie miejsca krwawienia i wykonaj dodatkowe szwy w ciągu trzech minut. Po osiągnięciu zadowalającej hemostazy zwolnij proksymalny clamp amp.

Drożność przeszczepów można potwierdzić obecnością silnej pulsacji. Jeśli pulsacja zmniejszy się, wstrzyknąć heparynę do naczynia, aby zapobiec zakrzepicy. Gdy będziesz gotowy, włóż jelita z powrotem do jamy brzusznej i zszyj warstwy mięśni i skóry.

Umieść mysz biorcy w ciepłej, czystej klatce i monitoruj przez jedną do dwóch godzin, aż powróci przytomność. Oceń funkcję motoryczną myszy po wyzdrowieniu i ponownie, drugiego dnia, operacja przeszczepu zakończy się sukcesem, jeśli nie zaobserwuje się dysfunkcji kończyn tylnych. Analiza histologiczna przeszczepów tętnic pobranych cztery tygodnie po operacji wykazała zwiększoną grubość ściany naczynia u kobiet, które otrzymały dawcę płci męskiej.

Nie zaobserwowano jednak miażdżycy przeszczepów w grupie mężczyzn do mężczyzn. W tym przykładzie tętnica piersiowa od dawcy płci męskiej została przeszczepiona do myszy z nokautem interferonu gamma z nokautem gamma, a następnie indukowana u myszy biorcy. Przed pobraniem próbek.

Kilka tygodni później analiza histologiczna przeszczepów tętnic wykazała, że w grupie leczonej nie zaobserwowano miażdżycy przeszczepów. Teraz już wiesz, jak wykonać tę operację. Próbuj dalej.