Rozpuszczalność związków hydrofobowych w roztworze wodnym z wykorzystaniem kombinacji samoorganizującego się peptydu i aminokwasu

Ogólnym celem tej metody jest zwiększenie rozpuszczalności związków hydrofobowych w roztworze wodnym w celu potencjalnego dostarczania do warunków klinicznych. Metoda ta rozwiązuje kluczowe ograniczenie w medycynie, jakim jest brak stosowania związków hydrofobowych w warunkach klinicznych ze względu na ich słabą rozpuszczalność w układach wodnych, takich jak krew. Główną zaletą tej techniki jest to, że związki hydrofobowe można rozpuszczać w roztworach wodnych bez znaczącego użycia toksycznych współrozpuszczalników.

Najpierw oznacz dwie 50-litrowe stożkowe probówki wirówkowe dla każdego aminokwasu. Przygotuj dużą dwulitrową kolbę zawierającą oczyszczoną wodę. Po obliczeniu ilości każdego aminokwasu dla pożądanych stężeń, za pomocą szpatułki zważ odpowiednie ilości aminokwasów do odpowiednich probówek wirówkowych.

Za pomocą pipety seriologicznej dodaj 40 mililitrów oczyszczonej wody do każdej probówki wirówkowej. Po zamknięciu probówek należy wirować próbki, aż do rozpuszczenia. Za pomocą wysokowydajnej wagi analitycznej odważyć około jednego plus minus 0,2 miligrama peptydu na dnie 20-mililitrowej fiolki scyntylacyjnej.

Zanotować dokładną masę peptydu na wieczku i zakręcić nakrętkę na fiolce. Następnie należy odpipetować odpowiednią objętość roztworu aminokwasów do każdej fiolki, aby osiągnąć pożądane stężenie samoorganizującego się peptydu Sonicate próbki przez 10 minut w łaźni wodnej w temperaturze pokojowej, upewniając się, że roztwory w fiolce są całkowicie zanurzone w łaźni wodnej. Przygotuj dwa roztwory podstawowe leku, łącząc jeden miligram pożądanego leku z odpowiednią ilością DMSO i drugi miligram leku z etanolem.

Następnie wiruj oba roztwory przez 15 sekund, aby całkowicie rozpuścić lek. Następnie oznacz 1,5 mililitra mikroprobówek wirówkowych dla każdego preparatu samoorganizującym się peptydem, aminokwasem i współrozpuszczalnikiem. Dodać 10 mikrolitrów roztworu podstawowego leku DMSO lub 20 mikrolitrów roztworu podstawowego leku etanolu do odpowiednich probówek do mikrowirówek.

Następnie dodaj 990 mikrolitrów samoorganizujących się roztworów aminokwasów peptydowych do probówek mikrowirówek zawierających roztwór podstawowy leku DMSO. Dodać 980 mikrolitrów roztworów aminokwasów peptydowych do probówek mikrowirówek zawierających roztwór podstawowy leku etylowego. Energicznie wiruj wszystkie preparaty leków przez 30 sekund.

Następnie przykryj folią aluminiową i pozostaw preparaty na 30 minut przed testem rozpuszczalności. Po 30 minutach energicznie wiruj preparaty przez 30 sekund. Następnie odwirować preparaty w temperaturze 14 220 razy G przez jedną minutę.

Po odwirowaniu należy sprawdzić wzrokowo dno probówek do mikrowirówek pod kątem wytrącania się. Spośród 40 preparatów testowanych w tym badaniu, siedem z powodzeniem rozpuściło hydrofobowy lek, kurkuminę. Zidentyfikowano dwa główne trendy, grupując preparaty według składników.

Etanol wydaje się być lepszym współrozpuszczalnikiem do rozpuszczania kurkuminy, a dodatnio naładowane aminokwasy, lizyna i arginina wydają się być optymalnymi składnikami do rozpuszczania kurkuminy. Warto zwrócić uwagę na zmianę koloru preparatów zawierających argininę i lizynę, które ujawniają, że kurkumina jest rozpuszczona w stanie zasadowym. Po opanowaniu tej techniki można ją wykonać w ciągu dwóch do trzech godzin przy użyciu odpowiedniego sprzętu i jeśli roztwory aminokwasów są przygotowane wcześniej.

Zgodnie z tą procedurą, rozpuszczalne preparaty leków mogą być dalej testowane in vitro i in vivo w celu bezpośredniej oceny i porównania biologicznej skuteczności lub bezpieczeństwa rozpuszczonego leku. Po jej opracowaniu, ta metoda formulacji utorowała drogę do dostarczania in vivo hydrofobowego inhibitora o nazwie PP@for zapobiegania ostrym uszkodzeniom płuc. Po obejrzeniu tego filmu powinieneś dobrze zrozumieć, jak zastosować samoorganizującą się kombinację peptydów i aminokwasów, aby rozpuścić dowolny lek hydrofobowy.