Name: Ocena lateralizacji półkuli z obustronnym zapisem potencjału pola lokalnego w wtórnej korze ruchowej myszy (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-07-31T12:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 3 s
Description: Poznaj metodę rejestracji potencjałów pola lokalnego w obustronnej wtórnej korze ruchowej myszy. Technika ta umożliwia badanie lateralizacji półkulowej i zmian synchronizacji w modelu choroby Alzheimera APP/PS1.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ta praca była wspierana przez granty z Narodowej Fundacji Nauk Przyrodniczych Chin (31771219, 31871170), Wydziału Nauki i Technologii Guangdong (2013KJCX0054) oraz Fundacji Nauk Przyrodniczych Prowincji Guangdong (2014A030313418, 2014A030313440).

Wszystkie zwierzęta były trzymane w parach w standardowych warunkach (12 godzin światła/ciemności, stała temperatura, swobodny dostęp do jedzenia i wody) zgodnie z wytycznymi chińskiego Ministerstwa Nauki i Technologii Zwierzęta laboratoryjne, a eksperymenty zostały zatwierdzone przez lokalną komisję etyczną Uniwersytetu w Kantonie. Jest to procedura niepolegająca na przeżyciu. 
UWAGA: Dla danych pokazanych w reprezentatywnych wynikach, do nagrań użyto podwójnie transgenicznych myszy APP/PS1 (B6C3-Tg (APPswe, PSEN1dE9) 85Dbo/J) i kontrolnych miotu typu dzikiego (WT) w wieku 3-5 miesięcy (n = 10, na grupę).
1. Znieczulenie i chirurgia zwierząt
<ol>
	<li>Zważ i znieczul mysz za pomocą zatwierdzonego schematu znieczulenia przez lokalną komisję ds. opieki nad zwierzętami. </li>
	<li>Wykonaj uszczypnięcie ogona lub palca u nogi za pomocą kleszczy, aby potwierdzić głębokie znieczulenie przed operacją.</li>
	<li>Umieść mysz w aparacie stereotaktycznym i zamocuj jej głowę.</li>
	<li>Nałóż maść na oczy na oba oczy, aby utrzymać wilgoć. Postępuj zgodnie z lokalnymi wytycznymi dotyczącymi opieki nad zwierzętami dotyczącymi analgezji przed- i pooperacyjnej. </li>
	<li>Ogol włosy za pomocą maszynki do strzyżenia chirurgicznego. Wykonaj małe nacięcie (12-15 mm) na środku odsłoniętego pola operacyjnego za pomocą nożyczek. Za pomocą kleszczy delikatnie odciągnij skórę głowy od linii środkowej.</li>
	<li>Delikatnie oddziel skórę i usuń resztki tkanki. Oczyść czaszkę za pomocą patyczków kosmetycznych pokrytych nadtlenkiem wodoru.</li>
	<li>Wywierć dwa małe otwory o promieniu 1,0-1,5 mm po lewej i prawej stronie czaszki, aby umożliwić wprowadzenie mikroelektrod rejestrujących do obszarów M2 pod mikroskopem stereoskopowym (<klasa silna = "xfig">Rysunek 1A). 
	UWAGA: Stereotaktyczne lokalizacje obustronnego M2: 1,94 mm przed bregmą, 1,0 mm bocznie do linii środkowej i 0,8-1,1 mm brzusznie do opony twardej.</li>
	<li>Ostrożnie usuń oponę twardą za pomocą wolframowej igły.</li>
	<li>Mikropipety szklane borokrzemianowe (średnica zewnętrzna: 1,0 mm) należy ciągnąć jako mikroelektrody rejestrujące o rezystancji 1-2 MΩ.</li>
	<li>Włóż dwie oddzielne mikroelektrody rejestrujące wypełnione 0,5 M NaCl do otworów za pomocą mikromanipulatorów mechanicznych (pod kątem 60°, <klasa silna = "xfig">Rysunek 1B).</li>
</ol>
2. Zapisy LFP w obustronnym M2 myszy
<ol>
	<li>Powoli opuść lewą i prawą szklaną elektrodę do odpowiednich współrzędnych obustronnego M2 (<silna klasa="xfig">Rysunek 1C).</li>
	<li>W celu kontroli jakości przetestuj rezystancję każdej elektrody za pomocą wzmacniacza różnicowego przed wychwyceniem LFP.</li>
	<li>Ustaw proces nagrywania na górnoprzepustowe 0,1 Hz i dolnoprzepustowe 1,000 Hz ze wzmocnieniem 1,000x.</li>
	<li>Zbierz zdigitalizowane surowe dane LFP dotyczące co najmniej 60 s spontanicznych aktywności w stabilnym stanie, z myszami oddychającymi równomiernie z częstością oddechów 2 oddechów na sekundę w znieczuleniu.</li>
	<li>Po nagraniu powoli podnieś elektrody z mózgu, a następnie poddaj myszy eutanazji przez szybkie zwichnięcie szyjki macicy.</li>
	<li>Zapisz dane i analizuj je w trybie offline.</li>
</ol>
3. Analiza korelacji krzyżowej
<ol>
	<li>Kliknij Analiza - Korelacja przebiegu w oprogramowaniu do analizy i zaimportuj dane.</li>
	<li>Ustawienia parametrów
	<ol>
		<li>Zdefiniuj sygnał jednego kanału falowego jako pierwszy kanał, a drugi jako odniesienie. Ustaw szerokość jako 2 i przesunięcie jako 1 (Rysunek 2A).</li>
		<li>Ustaw czas trwania obu LFP na 100 s, wybierając czas rozpoczęcia i czas zakończenia. Naciśnij przycisk Proces, aby przeprowadzić analizę korelacji krzyżowej (<silna klasa="xfig">Rysunek 2B). 
		UWAGA: Równoczesne sygnały obustronne o takim czasie trwania byłyby wystarczająco długie, aby wykazać spontaniczną aktywność neuronów, ujawniając w ten sposób podstawowe właściwości synchronizacji.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Kliknij Plik - Eksportuj jako, a następnie zapisz wyniki korelacji krzyżowej odpowiadające wynikowemu wykresowi wyskakującemu w .txt formacie.</li>
	<li>Otwórz plik .txt (Rysunek 2C), usuń wartości korelacji w opóźnieniach czasowych w zakresie 0 ± 0,01 s (ponieważ dwie ciągłe fale gamma mają interwał co najmniej 0,01 s), a następnie uśrednij resztę danych korelacji krzyżowej w części ujemnego opóźnienia czasowego lub uśrednij resztę danych korelacji krzyżowej w części dodatniego opóźnienia czasowego.</li>
</ol>
4. Analiza koherencji
<ol>
	<li>Zaimportuj i uruchom dane w oprogramowaniu analitycznym.</li>
	<li>Przypisz dwa sygnały LFP jako oddzielnie pierwszy i drugi kanał falowy. Następnie ustaw wartość rozmiaru bloku (Rysunek 3A). 
	UWAGA: Rozmiar bloku oznacza liczbę punktów danych używanych w FFT. Im większy rozmiar bloku, tym lepsza rozdzielczość częstotliwości. W tym miejscu zalecamy ustawienie go jako 4096.</li>
	<li>Przesuń przerywane linie ręcznie, aby upewnić się, że dokładność czasu dla sygnałów w obu kanałach jest ustawiona na ten sam okres (Rysunek 3B). Naciśnij przycisk Dodaj obszar, aby załadować obszar i przeprowadzić analizę spójności.</li>
	<li>Kliknij Plik - Zapisz jako, aby zapisać wyniki koherencji odpowiadające wynikowemu wykresowi wyskakującemu w formacie .txt (Rysunek 3B).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Przedstawiamy tutaj procedurę obustronnego zapisu zewnątrzkomórkowego in vivo, wraz z analizą synchronizacji dwuregionalnych sygnałów LFP, która jest zarówno elastyczna, jak i łatwa do przeprowadzenia w celu oszacowania lateralizacji półkuli mózgu, a także łączności, kierunkowości lub sprzężenia między aktywnościami neuronalnymi dwóch obszarów mózgu. Może to być szeroko stosowane do ujawnienia nie tylko grupowej aktywności neuronalnej, ale także niektórych podstawowych właściwości międzyregionalnej elektrofizjol...

Choroba Alzheimera (AD) jest najczęstszą formą demencji1,2. Zewnątrzkomórkowe odkładanie białka beta-amyloidowego (białko β-amyloidowe, Aβ) i wewnątrzkomórkowe splątki neurofibrylarne (NFT) są głównymi cechami patologicznymi AD3,4,5, ale mechanizmy leżące u podstaw patogenezy AD pozostają w dużej mierze niejasne. Kora mózgowa, kluczowa struktura w funkcjach poznawczych i pamięci, jest upośledzona w AD6, a deficyty motoryczne, takie jak powolny chód, trudności w poruszaniu się po otoczeniu i zaburzenia chodu, występują wraz z wiekiem7. Odkładanie się Aβ i splątki neurofibrylarne zaobserwowano również w korze przedruchowej (PMC) i dodatkowym obszarze motorycznym (SMA) u pacjentów z AD8 i poznawczo dotkniętych osobami starszymi9, co wskazuje na udział upośledzonego układu motorycznego w patogenezie AD.
Mózg składa się z dwóch odrębnych półkul mózgowych, które są przedzielone podłużną szczeliną. Zdrowy mózg wykazuje zarówno asymetrie strukturalne, jak i funkcjonalne10, co nazywa się "lateralizacją", pozwalając mózgowi skutecznie radzić sobie z wieloma zadaniami i czynnościami. Starzenie się powoduje pogorszenie funkcji poznawczych i lokomocji, a także zmniejszenie lateralizacji mózgu11,12. Zdolności motoryczne lewej półkuli są łatwo widoczne u zdrowego mózgu13, ale w AD nieprawidłowa lateralizacja mózgu występuje jako konsekwencja niepowodzenia dominacji lewej półkuli związanej z zanikiem kory lewej 14,15,16. W związku z tym zrozumienie możliwej zmiany lateralizacji mózgu w patogenezie choroby Alzheimera i mechanizmów leżących u jej podstaw może dostarczyć nowych informacji na temat patogenezy choroby Alzheimera i doprowadzić do identyfikacji potencjalnych biomarkerów do leczenia.
Pomiar elektrofizjologiczny jest czułą i skuteczną metodą oceny zmian w aktywności neuronalnej zwierząt. Zmniejszenie asymetrii półkulowej u osób starszych (HAROLD)17 zostało udokumentowane badaniami elektrofizjologicznymi z synchronizowanym czasem transferu międzypółkulowego, co wskazuje na osłabienie lub brak asymetrii półkulowej na monofoniczne bodźce mowy u osób starszych18. Korzystając z APP/PS1, jednego z najczęściej używanych modeli myszy AD19,20,21,22, w połączeniu z obustronnym zewnątrzkomórkowym zapisem LFP in vivo zarówno w lewym, jak i prawym M2, oceniliśmy możliwe deficyty lateralizacji w AD. Ponadto, dzięki prostym ustawieniom parametrów, wbudowana funkcja oprogramowania do analizy danych (patrz tabela materiałów) zapewnia szybszy i prostszy sposób analizy synchronizacji sygnałów elektrycznych niż matematycznie skomplikowany język programowania, który jest przyjazny dla początkujących z elektrofizjologią in vivo.

<table><tbody><tr><td>Wzmacniacz różnicowy AC/DC</td><td>A-M Systems</td><td>Model 3000</td><td></td></tr><tr><td>Przetwornik analogowo-cyfrowy</td><td>Cambridge Electronic Design Ltd.</td><td>Micro1401</td><td></td></tr><tr><td>Szklane mikropipety borokrzemianowe</td><td>Nanjing spring teaching experimental equipment company</td><td>161230</td><td>Średnica zewnętrzna: 1,0 mm</td></tr><tr><td>Ściągacz mikroelektrod</td><td>Narishige</td><td>PC-10</td><td></td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Guangzhou Chemical Reagent Factory</td><td>7647-14-5</td><td></td></tr><tr><td>Uchwyt mikroelektrody szpilkowej</td><td>World Precision Instruments, INC.</td><td></td><td></td>MEH3SW10</tr><tr><td>Spike2&nbsp;</td><td>Cambridge Electronic Design Sp. z o.o.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mikroskop stereoskopowy</td><td>Zeiss</td><td>435064-9020-000</td><td></td></tr><tr><td>Aparat stereotaktyczny&nbsp;</td><td>RWD Life Science</td><td>68045</td><td></td></tr><tr><td>Uretan</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>94300</td><td></td></tr></tbody></table>

ocena lateralizacji półkuli z obustronnym zapisem potencjału pola lokalnego w wtórnej korze ruchowej myszy

Evaluation of Hemisphere Lateralization with Bilateral Local Field Potential Recording in Secondary Motor Cortex of Mice

Ten artykuł demonstruje kompletne, szczegółowe procedury zarówno dwustronnego zapisu in vivo, jak i analizy potencjału lokalnego pola (LFP) w obszarach korowych myszy, które są przydatne do oceny możliwych deficytów lateralizacji, jak również do oceny połączeń mózgowych i sprzężenia aktywności sieci neuronowych u gryzoni. Mechanizmy patologiczne leżące u podstaw choroby Alzheimera (AD), powszechnej choroby neurodegeneracyjnej, pozostają w dużej mierze nieznane. U osób starzejących się wykazano zmienioną lateralizację mózgu, ale nie ustalono, czy nieprawidłowa lateralizacja jest jednym z wczesnych objawów choroby Alzheimera. Aby to zbadać, zarejestrowaliśmy obustronne LFP u 3-5-miesięcznych myszy modelowych AD, APP / PS1, wraz z kontrolami miotu typu dzikiego (WT). LFP lewej i prawej wtórnej kory ruchowej (M2), szczególnie w paśmie gamma, były bardziej zsynchronizowane u myszy APP / PS1 niż w kontrolach WT, co sugeruje zmniejszoną asymetrię półkuli obustronnego M2 w tym mysim modelu AD. Warto zauważyć, że procesy rejestracji i analizy danych są elastyczne i łatwe do przeprowadzenia, a także mogą być stosowane do innych ścieżek mózgowych podczas przeprowadzania eksperymentów koncentrujących się na obwodach neuronalnych.

Aby sprawdzić, czy wczesna patologia AD upośledza zdolność do lateralizacji półkulowej, przeprowadzono obustronne pozakomórkowe pomiary LFP w lewym i prawym M2 myszy APP/PS1 oraz kontrolnych myszy WT (w wieku 3–5 miesięcy), a następnie przeanalizowano kroskorelację tych lewych i prawych LFP. U myszy WT wyniki wykazały, że średnia korelacja między lewym a prawym LFP przy dodatnich opóźnieniach czasowych różniła się znacząco od korelacji przy ujemnych opóźnieniach czasowych, co wskazuje na istnienie asymetrii półkulowych w...

Prezentujemy in vivo elektrofizjologiczny zapis potencjału pola lokalnego (LFP) w obustronnej wtórnej korze ruchowej (M2) myszy, który może być zastosowany do oceny lateralizacji półkuli. Badanie wykazało zmienione poziomy synchronizacji między lewym i prawym M2 u myszy APP/PS1 w porównaniu z kontrolami WT.

Ocena lateralizacji półkuli z obustronnym zapisem potencjału pola lokalnego w wtórnej korze ruchowej myszy

This article demonstrates complete, detailed procedures for both in vivo bilateral recording and analysis of local field potential (LFP) in the cortical ...

Technika ta może być wykorzystana do przeglądu niektórych podstawowych właściwości elektrofizjologii międzyregionalnej dla lateralizacji półkuli, a także łączności, kierunkowości i sprzężenia. Pomiar elektrofizjologiczny jest czułą i skuteczną metodą oceny aktywności neuronalnej u zwierząt. Protokół ten zapewnia lepszy sposób na podparcie synchronizacji sygnałów elektrycznych.Zrozumienie mechanizmu leżącego u podstaw możliwej zmienionej lateralizacji mózgu w patogenezie choroby Alzheimera może dostarczyć nowych informacji na temat potencjalnych biomarkerów w leczeniu choroby Alzheimera. Przed zabiegiem potwierdź głębokość znieczulenia myszy, wykonując szczypanie ogona lub palca u nogi kleszczami. Następnie umieść mysz w aparacie stereotaktycznym i zamocuj jej głowę.Nałóż maść na oba oczy, aby były wilgotne. Następnie ogol głowę i wysterylizuj obszar. Wykonaj małe nacięcie od 12 do 15 milimetrów w środku ogolonego obszaru.Za pomocą kleszczy delikatnie odciągnij skórę głowy od linii środkowej. Następnie delikatnie oddziel skórę i usuń pozostałą tkankę. Oczyść czaszkę za pomocą patyczków kosmetycznych pokrytych nadtlenkiem wodoru.Pod mikroskopem stereoskopowym wywierć dwa małe otwory o promieniu od jednego do 1,5 milimetra po lewej i prawej stronie czaszki, aby umożliwić wprowadzenie mikroelektrod rejestrujących do obszarów M2. Ostrożnie usuń oponę twardą za pomocą igły wolframowej. Następnie należy wprowadzić do otworów dwie oddzielne mikroelektrody rejestrujące, wypełnione 0,5 molowym chlorkiem sodu, pod kątem 60 stopni, za pomocą mikromanipulatorów mechanicznych.W przypadku nagrywania LFP powoli opuść lewą i prawą szklaną elektrodę do współrzędnych M2. W celu kontroli jakości przetestuj rezystancję każdej elektrody za pomocą wzmacniacza różnicowego. Następnie ustaw proces nagrywania na górnoprzepustowy 0,1 herca i dolnoprzepustowy 1000 Hz z 1000-krotnym wzmocnieniem.Zbierz zdigitalizowane surowe dane LFP w stabilnym stanie, przez co najmniej 60 sekund, przy czym mysz oddycha równomiernie z prędkością dwóch oddechów na sekundę, pod narkozą. Po nagraniu powoli podnieś elektrody z mózgu. Zapisz dane i analizuj je w trybie offline za pomocą oprogramowania do analizy.Aby przeprowadzić analizę korelacji krzyżowej, w oprogramowaniu do analizy kliknij analizę, a następnie korelację przebiegu i zaimportuj dane. Następnie przypisz jeden sygnał kanału falowego jako pierwszy kanał, a drugi jako odniesienie. Ustaw szerokość jako dwa, a odsunięcie jako jeden.Następnie ustaw czas trwania obu LFP na 100 sekund, wybierając czas rozpoczęcia i czas zakończenia. Następnie naciśnij przycisk procesu, aby przeprowadzić analizę korelacji krzyżowej. Kliknij filet, eksportuj jako, a następnie zapisz wyniki korelacji krzyżowej odpowiadające wynikowemu wykresowi podręcznemu w formacie tekstowym.Następnie usuń wartości korelacji w opóźnieniach czasowych w zakresie zero plus i minus 01 sekundy, a następnie zajmij się resztą danych korelacji krzyżowej. Aby przeprowadzić analizę spójności, uruchom dane w oprogramowaniu do analizy. Następnie ułóż dwa sygnały LFP jako pierwszy i drugi kanał falowy, a następnie ustaw wartość rozmiaru bloku na 4096.Rozmiar bloku oznacza liczbę punktów danych używanych w pierwszym do rzeczywistej transformacji. Im większy rozmiar bloku, tym lepsza rozdzielczość częstotliwości. Przesuń przerywane linie ręcznie, aby upewnić się, że dokładność czasu dla sygnałów w obu kanałach jest ustawiana na ten sam okres.Naciśnij przycisk dodawania obszaru, aby załadować obszar i przeprowadzić analizę spójności. Następnie kliknij plik i zapisz jako, aby zapisać wyniki spójności odpowiadające wynikowemu wykresowi wyskakującemu w formacie tekstowym. Aby sprawdzić, czy wczesna patologia choroby Alzheimera upośledza zdolność lateralizacji półkuli, zewnątrzkomórkowe LFP zarejestrowano w lewym i prawym M2 myszy APP / PS1 i kontrolnych typu dzikiego, a także przeanalizowano ich korelację krzyżową.U myszy typu dzikiego wyniki wykazały, że średnia korelacja między lewym i prawym LFP przy dodatnich opóźnieniach czasowych różniła się znacznie od tej przy ujemnych opóźnieniach czasowych, co sugeruje istnienie asymetrii półkul w obszarach M2 kontroli typu dzikiego. Dla porównania, lewe i prawe LFP myszy APP / PS1 wykazywały wyższą synchronizację w dziedzinie czasu, co sugeruje zmniejszenie asymetrii między lewym i prawym M2. Oscylacje gamma zostały następnie odfiltrowane z LFP i przeprowadzono analizę koherencji w celu zmierzenia podobieństwa sygnałów elektrycznych w zakresie częstotliwości gamma. Wynik pokazał, że koherencja gamma między lewym i prawym M2 u myszy APP / PS1 była znacznie wyższa niż u myszy typu dzikiego, co wskazuje na wyższą synchronizację, a w konsekwencji zmniejszyła lateralizację między lewym i prawym M2 u myszy APP / PS1.Uretan jest toksyczny i rakotwórczy, dlatego zawsze należy zachować ostrożność i przestrzegać przepisów bezpieczeństwa podczas obchodzenia się z nim. Bardzo ważne jest, aby co godzinę testować głębokość znieczulenia, aby zapewnić stabilne rejestrowanie LFP. Proces rejestracji i analizy może być zastosowany do innych ścieżek mózgowych, szczególnie w laboratoriach, które nie mają systemów do wielokanałowej rejestracji u swobodnie poruszających się zwierząt.

evaluation-hemisphere-lateralization-with-bilateral-local-field

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neuronauka

Film demonstruje procedurę rejestrowania potencjału pola lokalnego (LFP) w wycinkach kory hipokampowo-śródwęchowej myszy. Stymulacja elektryczna jest zapewniona w warstwie promieniowej CA3 hipokampa, co powoduje zmiany potencjału postsynaptycznego w warstwie piramidalnej CA1. Rejestrowana jest łączna zmiana potencjału błonowego neuronów CA1, zwana potencjałem pola lokalnego.

Rejestracja potencjału pola lokalnego w wycinkach kory hipokampowo-śródwęchowej myszy

Ten film demonstruje in vivo rejestrację potencjału lokalnego pola (LFP) z obustronnych obszarów M2 mózgu myszy. Znieczulona mysz jest zabezpieczona i przygotowana do zabiegu. Aby zarejestrować LFP, należy wprowadzić mikroelektrody do docelowych współrzędnych obustronnych obszarów M2, które są odpowiedzialne za złożone ruchy motoryczne.

Rejestracja potencjału pola lokalnego z obu półkul mózgu myszy

Ten protokół przedstawia metodę tworzenia dużej jednostronnej kraniotomii nad obszarami skroniowymi i ciemieniowymi kory mózgowej myszy. Jest to szczególnie przydatne do obrazowania w czasie rzeczywistym rozległego obszaru półkuli korowej.

Duży zabieg kraniotomii bocznej do mezoskalowego obrazowania optycznego o szerokim polu widzenia aktywności mózgu

Niniejszy protokół ma na celu ocenę funkcji poznawczo-emocjonalnych w zwojach podstawy poprzez jednoczesny neurofizjologiczny zapis lokalnych potencjałów pola i nieinwazyjną aktywność kory mózgowej (EEG). Przykładem procedury jest zastosowanie paradygmatów obejmujących bodźce mowy o konotacji emocjonalnej lub zadania Flankera polegającego na kontroli poznawczej.

Połączone inwazyjne podkorowe i nieinwazyjne powierzchniowe zapisy neurofizjologiczne do oceny funkcji poznawczych i emocjonalnych u ludzi

Ten protokół opisuje prostą metodę jednoczesnego rejestrowania kolokalizowanej elektroencefalografii (EEG) i wielolaminarnego potencjału pola lokalnego u znieczulonego szczura. Wykazano, że otwór w czaszce wywiercony w czaszce w celu wprowadzenia mikroelektrody powoduje znikome zniekształcenia sygnału EEG.

Jednoczesna rejestracja kolokalizowanej elektroencefalografii i lokalnego potencjału pola u gryzoni

Ten protokół opisuje rejestrację lokalnych potencjałów pola za pomocą wielozębowych liniowych sond krzemowych. Konwersja sygnałów za pomocą analizy gęstości źródła prądu pozwala na rekonstrukcję lokalnej aktywności elektrycznej w hipokampie myszy. Dzięki tej technice można badać ograniczone przestrzennie oscylacje mózgu u swobodnie poruszających się myszy.

Rejestrowanie przestrzennie ograniczonych oscylacji w hipokampie zachowujących się myszy

Opracowaliśmy technikę, która jednocześnie rejestruje zarówno elektrokortykografię, jak i lokalne potencjały pola w odpowiedzi na nocyceptywne bodźce laserowe od swobodnie poruszających się szczurów. Technika ta pomaga ustalić bezpośredni związek sygnałów elektrokorowych na poziomie mezoskopowym i makroskopowym, co ułatwia badanie nocyceptywnego przetwarzania informacji w mózgu.

Jednoczesne zapisy lokalnych potencjałów pola korowego i elektrokortykogramy w odpowiedzi na nocyceptywne bodźce laserowe od swobodnie poruszających się szczurów

Protokół opisuje metodologię zewnątrzkomórkowego zapisu w korze ruchowej (MC) w celu ujawnienia zewnątrzkomórkowych właściwości elektrofizjologicznych u swobodnie poruszających się świadomych myszy, a także analizę danych lokalnych potencjałów pola (LFP) i skoków, co jest przydatne do oceny aktywności neuronalnej sieci leżącej u podstaw interesujących zachowań.

Wielokanałowy zapis zewnątrzkomórkowy w swobodnie poruszających się myszach

Ten protokół opisuje użycie specjalnie zaprojektowanego urządzenia rejestrującego i elektrod do rejestrowania lokalnych potencjałów pola i badania przepływu informacji w hipokampie myszy i korze przedczołowej.

Podwójne nagrania zewnątrzkomórkowe w hipokampie myszy i korze przedczołowej myszy

Protokół ten opisuje dwufazową metodę chirurgiczną mającą na celu stworzenie dużego, ponownie zamykalnego, oszczędzającego dura okno czaszkowe u myszy. Technika ta umożliwia przewlekłe, wielomodalne zapisy elektrofizjologiczne z rozproszonych, głębokich sieci mózgowych, takich jak Sieć Trybu Domyślnego, przez kilka tygodni.

Protokół chirurgiczny dla dużego, zamykalnego okna czaszkowego umożliwiającego podłużne, wielomodalne rejestrowanie elektrofizjologii sieci domyślnej myszy

Poznaj metodę rejestracji potencjałów pola lokalnego w obustronnej wtórnej korze ruchowej myszy. Technika ta umożliwia badanie lateralizacji półkulowej i zmian synchronizacji w modelu choroby Alzheimera APP/PS1.

Ocena lateralizacji półkuli z obustronnym zapisem potencjału pola lokalnego w wtórnej korze ruchowej myszy

Przeglądaj więcej filmów