Name: Wielopoziomowa mikrodysekcja i profilowanie funkcjonalno-strukturalne gałęzi tętniczych ludzkiego nerki (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-09-05T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 51 s
Description: Poznaj wielopoziomową mikrodysekcję i profilowanie funkcjonalno-strukturalne gałęzi tętniczych ludzkiej nerki. Ta metoda umożliwia bezpośrednią ocenę funkcji naczyń krwionośnych, poprawiając translacyjny potencjał badań przedklinicznych.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Autorzy chcieliby podziękować ochotnikom za ich udział w tym badaniu, a także podziękować personelowi chirurgicznemu na Oddziale Urologii Pierwszego Szpitala Uniwersytetu Pekińskiego za dostarczenie tkanki nerkowej. Prace te były wspierane przez Miejską Fundację Nauk Przyrodniczych w Pekinie (F251013 do Y. Z., 7232096 do Y. L.); Chińska Narodowa Fundacja Naukowa (82325004, 92168114 do Y. Z., 82170422 do Y. L.); Krajowy kluczowy program badawczo-rozwojowy Chin (2021YFF0501401, 2018YFA0800501 do Y. Z., 2021YFF0501404 do Y. L., 2023YFC2415500 do L. Y.); Projekt badawczy Trzeciego Szpitala Uniwersytetu Pekińskiego w Państwowym Kluczowym Laboratorium Homeostazy i Remodelingu Naczyń (Uniwersytet Pekiński; 2024-VHR-SY-07 do Y.Z.); 2023 Miejska Komisja Zdrowia w Pekinie Stolica Transformacja Doskonałości Programu Promocji Nauk Medycznych i Technologii Transformacja Doskonałego Programu Promocji (YC202301QX0162 do LY); Krajowe finansowanie badań klinicznych szpitali wysokiego szczebla (projekt Funduszu Doradztwa Inkubacji Transformacji Osiągnięć Naukowych i Technologicznych Pierwszego Szpitala Uniwersytetu Pekińskiego, 2024CX24 do L. Y.).

<ol><li>Molema, G., Aird, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+heterogeneity+in+the+kidney%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Vascular heterogeneity in the kidney.</a> Semin Nephrol. 32 (2), 145-155 (2012).</li>
<li>Jentzer, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contemporary+management+of+severe+acute+kidney+injury+and+refractory+cardiorenal+syndrome%3A+Jacc+council+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Contemporary management of severe acute kidney injury and refractory cardiorenal syndrome: Jacc council perspectives.</a> J Am Coll Cardiol. 76 (9), 1084-1101 (2020).</li>
<li>Kanji, H. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Difference+between+preoperative+and+cardiopulmonary+bypass+mean+arterial+pressure+is+independently+associated+with+early+cardiac+surgeryassociated+acute+kidney+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cardiothorac+Surg%22%5BJournal%5D)">Difference between preoperative and cardiopulmonary bypass mean arterial pressure is independently associated with early cardiac surgeryassociated acute kidney injury.</a> J Cardiothorac Surg. 5 (1), 71(2010).</li>
<li>Kwiatkowska, E., Kwiatkowski, S., Dziedziejko, V., Tomasiewicz, I., Domanski, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+microcirculation+injury+as+the+main+cause+of+ischemic+acute+kidney+injury+development%5BTitle%5D)+AND+%22Biology+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">Renal microcirculation injury as the main cause of ischemic acute kidney injury development.</a> Biology (Basel). 12 (2), 327(2023).</li>
<li>Ruilope, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypertension+in+2010%3ABlood+pressure+and+the+kidney%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Hypertension in 2010:Blood pressure and the kidney.</a> Nat Rev Nephrol. 7 (2), 73-74 (2011).</li>
<li>Barger, A. C., Herd, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+renal+circulation%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">The renal circulation.</a> N Engl J Med. 284 (9), 482-490 (1971).</li>
<li>Beloncle, F., Piquilloud, L., Asfar, P. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBeloncle%2C+F+%22Critical+care+nephrology%22">Critical care nephrology</a>. , third edition, Elsevier. Philadelphia. (2019).</li>
<li>MompeóCorredera, B., HernándezMorera, P., CastañoGonzález, I., QuintanaMontesdeoca, M. D. P., MederosReal, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regions+of+the+human+renal+artery%3AHistomorphometric+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Anat+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Regions of the human renal artery:Histomorphometric analysis.</a> Anat Cell Biol. 55 (3), 330-340 (2022).</li>
<li>Evans, R. G., Smith, D. W., Lee, C. J., Ngo, J. P., Gardiner, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+makes+the+kidney+susceptible+to+hypoxia%5BTitle%5D)+AND+%22Anat+Rec+%28Hoboken%29%22%5BJournal%5D)">What makes the kidney susceptible to hypoxia.</a> Anat Rec (Hoboken). 303 (10), 2544-2552 (2020).</li>
<li>Hwa, J. J., Ghibaudi, L., Williams, P., Chatterjee, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+acetylcholinedependent+relaxation+in+large+and+small+arteries+of+rat+mesenteric+vascular+bed%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Comparison of acetylcholinedependent relaxation in large and small arteries of rat mesenteric vascular bed.</a> Am J Physiol. 266 (3 Pt 2), H952-H958 (1994).</li>
<li>Buus, N. H., Van Bavel, E., Mulvany, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differences+in+sensitivity+of+rat+mesenteric+small+arteries+to+agonists+when+studied+as+ring+preparations+or+as+cannulated+preparations%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Differences in sensitivity of rat mesenteric small arteries to agonists when studied as ring preparations or as cannulated preparations.</a> Br J Pharmacol. 112 (2), 579-587 (1994).</li>
<li>Barone, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+arterial+and+venous+doppler+in+cardiorenal+syndrome%3A+Pathophysiological+and+clinical+insights%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedicines%22%5BJournal%5D)">Renal arterial and venous doppler in cardiorenal syndrome: Pathophysiological and clinical insights.</a> Biomedicines. 12 (6), 1166(2024).</li>
<li>Cuttone, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploring+the+utility+of+renal+resistive+index+in+critical+care%3A+Insights+into+ARDS+and+cardiac+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedicines%22%5BJournal%5D)">Exploring the utility of renal resistive index in critical care: Insights into ARDS and cardiac failure.</a> Biomedicines. 13 (2), 519(2025).</li>
<li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+practice+report+of+contrastenhanced+ultrasound+in+renal+artery+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ultrasound+Med%22%5BJournal%5D)">Clinical practice report of contrastenhanced ultrasound in renal artery disease.</a> J Ultrasound Med. 43 (1), 117-125 (2023).</li>
<li>Andersen, F. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Continuous+assessment+of+tissue+perfusion+using+quantitative+indocyanine+green+fluorescence+imaging+during+controlled+hypo+and+reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Surg+Endosc%22%5BJournal%5D)">Continuous assessment of tissue perfusion using quantitative indocyanine green fluorescence imaging during controlled hypo and reperfusion.</a> Surg Endosc. 39 (10), 6512-6521 (2025).</li>
<li>Schubert, R., Gaynullina, D., Shvetsova, A., Tarasova, O. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myography+of+isolated+blood+vessels%3AConsiderations+for+experimental+design+and+combination+with+supplementary+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Physiol%22%5BJournal%5D)">Myography of isolated blood vessels:Considerations for experimental design and combination with supplementary techniques.</a> Front Physiol. 14 (8), 1176748(2023).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mir1865p+carried+by+M2+macrophagederived+exosomes+downregulates+TRPP2+expression+in+airway+smooth+muscle+to+alleviate+asthma+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Immunopharmacol%22%5BJournal%5D)">Mir1865p carried by M2 macrophagederived exosomes downregulates TRPP2 expression in airway smooth muscle to alleviate asthma progression.</a> Int Immunopharmacol. 148 (1), 114107(2025).</li>
<li>Ikeda, M., Nakada, A., Abukawa, H., Yamazaki, T., Maruyama, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vibegron+inhibits+enhanced+spontaneous+contractions+induced+by+anoxia%2Freoxygenation+in+isolated+whole+bladder+from+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Vibegron inhibits enhanced spontaneous contractions induced by anoxia/reoxygenation in isolated whole bladder from rats.</a> Eur J Pharmacol. 926 (1), 175017(2022).</li>
<li>Wenceslau, C. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+the+measurement+of+vascular+function+and+structure+in+isolated+arteries+and+veins%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Guidelines for the measurement of vascular function and structure in isolated arteries and veins.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 321 (1), H77-H111 (2021).</li>
<li>Bayliss, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+local+reactions+of+the+arterial+wall+to+changes+of+internal+pressure%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">On the local reactions of the arterial wall to changes of internal pressure.</a> J Physiol. 28 (3), 220-231 (1902).</li>
<li>Darmon, M., Schnell, D., Schneider, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+of+renal+perfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Intensive+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Monitoring of renal perfusion.</a> Intensive Care Med. 48 (10), 1505-1507 (2022).</li>
<li>Offenhäuser, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((EphA2+regulates+vascular+permeability+and+prostate+cancer+metastasis+via+modulation+of+cell+junction+protein+phosphorylation%5BTitle%5D)+AND+%22Oncogene%22%5BJournal%5D)">EphA2 regulates vascular permeability and prostate cancer metastasis via modulation of cell junction protein phosphorylation.</a> Oncogene. 44 (4), 208-227 (2025).</li>
<li>Vitverova, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Soluble+endoglin+and+hypercholesterolemia+aggravate+endothelial+and+vessel+wall+dysfunction+in+mouse+aorta%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">Soluble endoglin and hypercholesterolemia aggravate endothelial and vessel wall dysfunction in mouse aorta.</a> Atherosclerosis. 271, 15-25 (2018).</li>
<li>Maathuis, M. H. J., De Groot, M., Ploeg, R. J., Leuvenink, H. G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deterioration+of+endothelial+and+smooth+muscle+cell+function+in+DCD+kidneys+after+static+cold+storage+in+IGL1+or+UW%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Deterioration of endothelial and smooth muscle cell function in DCD kidneys after static cold storage in IGL1 or UW.</a> J Surg Res. 152 (2), 231-237 (2009).</li>
<li>Ingemansson, R., Budrikis, A., Bolys, R., Sjoberg, T., Steen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+temperature+in+longterm+preservation+of+vascular+endothelial+and+smooth+muscle+function%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Thorac+Surg%22%5BJournal%5D)">Effect of temperature in longterm preservation of vascular endothelial and smooth muscle function.</a> Ann Thorac Surg. 61 (5), 1413-1417 (1996).</li>
<li>McIntyre, C. A., Williams, B. C., Lindsay, R. M., McKnight, J. A., Hadoke, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preservation+of+vascular+function+in+rat+mesenteric+resistance+arteries+following+cold+storage%2C+studied+by+small+vessel+myography%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Preservation of vascular function in rat mesenteric resistance arteries following cold storage, studied by small vessel myography.</a> Br J Pharmacol. 123 (8), 1555-1560 (1998).</li>
<li>Ingemansson, R., Sjoberg, T., Massa, G., Steen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Longterm+preservation+of+vascular+endothelium+and+smooth+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Thorac+Surg%22%5BJournal%5D)">Longterm preservation of vascular endothelium and smooth muscle.</a> Ann Thorac Surg. 59 (5), 1177-1181 (1995).</li>
<li>Zheng, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HMGB2+promotes+smooth+muscle+cell+proliferation+through+PPAR%CE%B3%2FPGC1%CE%B1+pathwaymediated+glucose+changes+in+aortic+dissection%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">HMGB2 promotes smooth muscle cell proliferation through PPARγ/PGC1α pathwaymediated glucose changes in aortic dissection.</a> Atherosclerosis. 399, 119044(2024).</li>
<li>Zhang, B., Zhang, Y., Deng, F., Fang, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ligustrazine+prevents+basilar+artery+remodeling+in+twokidneytwoclip+renovascular+hypertension+rats+via+suppressing+PI3K%2FAKT+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Microvasc+Res%22%5BJournal%5D)">Ligustrazine prevents basilar artery remodeling in twokidneytwoclip renovascular hypertension rats via suppressing PI3K/AKT signaling.</a> Microvasc Res. 128, 103938(2020).</li>
<li>Somiari, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+the+quality+of+RNA+isolated+from+human+breast+tissue+after+ambient+room+temperature+exposure%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Assessing the quality of RNA isolated from human breast tissue after ambient room temperature exposure.</a> PLoS One. 17 (1), e0262654(2022).</li>
<li>Srinivasan, M., Sedmak, D., Jewell, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+fixatives+and+tissue+processing+on+the+content+and+integrity+of+nucleic+acids%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Effect of fixatives and tissue processing on the content and integrity of nucleic acids.</a> Am J Pathol. 161 (6), 1961-1971 (2002).</li>
<li>Potente, M., Makinen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+heterogeneity+and+specialization+in+development+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Vascular heterogeneity and specialization in development and disease.</a> Nat Rev Mol Cell Biol. 18 (8), 477-494 (2017).</li>
<li>Lake, B. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+atlas+of+healthy+and+injured+cell+states+and+niches+in+the+human+kidney%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">An atlas of healthy and injured cell states and niches in the human kidney.</a> Nature. 619 (7970), 585-594 (2023).</li>
<li>Greenbaum, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+spatially+resolved+timeline+of+the+human+maternal-fetal+interface%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A spatially resolved timeline of the human maternal-fetal interface.</a> Nature. 619 (7970), 595-605 (2023).</li>
<li>The Tabula Sapiens Consortium. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Tabula+Sapiens%3A+A+multipleorgan%2C+singlecell+transcriptomic+atlas+of+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">The Tabula Sapiens: A multipleorgan, singlecell transcriptomic atlas of humans.</a> Science. 376 (6594), eabl4896(2022).</li>
<li>Barnett, S. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+organotypic+atlas+of+human+vascular+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">An organotypic atlas of human vascular cells.</a> Nat Med. 30 (12), 3468-3481 (2024).</li>
<li>Shen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+cytokinelike+protein+FAM3D+lowers+blood+pressure+in+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep+Med%22%5BJournal%5D)">Targeting cytokinelike protein FAM3D lowers blood pressure in hypertension.</a> Cell Rep Med. 4 (6), 101072(2023).</li>
<li>Zhao, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Restoration+of+autophagic+flux+improves+endothelial+function+in+diabetes+through+lowering+mitochondrial+ROSmediated+eNOS+monomerization%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Restoration of autophagic flux improves endothelial function in diabetes through lowering mitochondrial ROSmediated eNOS monomerization.</a> Diabetes. 71 (5), 1099-1114 (2022).</li>
<li>Ergin, B., Akin, S., Ince, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kidney+microcirculation+as+a+target+for+innovative+therapies+in+AKI%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Med%22%5BJournal%5D)">Kidney microcirculation as a target for innovative therapies in AKI.</a> J Clin Med. 10 (18), (2021).</li>
<li>Deferrari, G., Cipriani, A., La Porta, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+dysfunction+in+cardiovascular+diseases+and+its+consequences%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Renal dysfunction in cardiovascular diseases and its consequences.</a> J Nephrol. 34 (1), 137-153 (2021).</li>
<li>Owen, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perivascular+adipose+tissue+potentiates+contraction+of+coronary+vascular+smooth+muscle%3A+Influence+of+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Perivascular adipose tissue potentiates contraction of coronary vascular smooth muscle: Influence of obesity.</a> Circulation. 128 (1), 9-18 (2013).</li>
<li>AyalaLopez, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perivascular+adipose+tissue+contains+functional+catecholamines%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Res+Perspect%22%5BJournal%5D)">Perivascular adipose tissue contains functional catecholamines.</a> Pharmacol Res Perspect. 2 (3), e00041(2014).</li>
<li>AyalaLopez, N., Thompson, J. M., Watts, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perivascular+adipose+tissue%27s+impact+on+norepinephrineinduced+contraction+of+mesenteric+resistance+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Physiol%22%5BJournal%5D)">Perivascular adipose tissue's impact on norepinephrineinduced contraction of mesenteric resistance arteries.</a> Front Physiol. 8, 37(2017).</li>
<li>Ahmad, M. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perivascular+adipocytes+store+norepinephrine+by+vesicular+transport%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Perivascular adipocytes store norepinephrine by vesicular transport.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 39 (2), 188-199 (2019).</li>
<li>Ya-Jing, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipose+tissue-derived+cytokines%2C+CTRPs+as+biomarkers+and+therapeutic+targets+in+metabolism+and+the+cardiovascular+system%5BTitle%5D)+AND+%22Vessel+Plus%22%5BJournal%5D)">Adipose tissue-derived cytokines, CTRPs as biomarkers and therapeutic targets in metabolism and the cardiovascular system.</a> Vessel Plus. (1), 202-212 (2017).</li>
<li>Osol, G., Brekke, J. F., McElroyYaggy, K., Gokina, N. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myogenic+tone%2C+reactivity%2C+and+forced+dilatation%3A+A+threephase+model+of+in+vitro+arterial+myogenic+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Myogenic tone, reactivity, and forced dilatation: A threephase model of in vitro arterial myogenic behavior.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 283 (6), H2260-H2267 (2002).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Stabilność perfuzji nerek służy zarówno jako krytyczny cel terapeutyczny, jak i okno na patofizjologię hemodynamiczną39,40. Przedstawiamy protokół hierarchicznej izolacji i oceny funkcjonalnej ludzkich tętnic nerkowych na podstawie świeżych próbek nefrektomii, wypełniając istotne luki w obecnych metodologiach. W przeciwieństwie do istniejących metod ograniczonych do próbek zwłok lub modeli zwierzęcych, nasza technika umożliwia niezawodną izolację żywotnych tętnic...

Nerka jest ważnym narządem odpowiedzialnym za utrzymanie homeostazy człowieka poprzez usuwanie produktów przemiany materii, równowagę elektrolitową i regulację płynów - funkcje, które wymagają wyjątkowo wysokiego przepływu krwi. W warunkach fizjologicznych nerki otrzymują około 25% całkowitej objętości krwi pompowanej przez serce co minutę (pojemność minutowa serca), co podkreśla ich istotną rolę w ogólnoustrojowym przepływie krwi i krytyczne znaczenie perfuzji nerkowej w utrzymaniu ogólnej równowagi fizjologicznej1. Układ tętniczy nerkowy precyzyjnie reguluje ten masywny dopływ krwi w celu utrzymania GFR, jednocześnie dostosowując się do ogólnoustrojowych zmian hemodynamicznych. W związku z tym upośledzenie perfuzji nerek stanowi krytyczny mechanizm patologiczny, który przyczynia się do zmniejszenia współczynnika filtracji kłębuszkowej (GFR) w stanach takich jak ostre uszkodzenie nerek i niedokrwienie nerek. Ponadto często występuje wtórnie do zaburzeń ogólnoustrojowych, które upośledzają przepływ krwi przez nerki, w tym wstrząsu, dysfunkcji serca i sepsy 2,3,4,5. Tętnica nerkowa ulega sekwencyjnemu rozgałęzianiu w nerce, najpierw dzieląc się na tętnice międzypłatowe, które przebiegają przez kolumny nerkowe między piramidami rdzeniowymi. Po dotarciu do połączenia korowo-rdzeniowego naczynia te powodują powstanie łukowatych tętnic, które wyginają się w łuk wzdłuż granicy między korą a rdzeniem. Z tych krzywoliniowych naczyń wyłaniają się tętnice międzyzrazikowe, które wnikają promieniście w miąższ korowy, ostatecznie dostarczając krew do naczyń włosowatych kłębuszków nerkowych przez tętniczki doprowadzające w celu perfuzji poszczególnych nefronów 1,6,7. Tętnice międzypłatowe, łukowate i międzyzrazikowe stanowią kluczowe unaczynienie oporowe w nerkach, służąc jako podstawowe regulatory hemodynamiki wewnątrznerkowej i kontroli ciśnienia 1,8. Precyzyjna izolacja i charakterystyka tych naczyń mają kluczowe znaczenie dla wyjaśnienia podstawowych mechanizmów rządzących homeostazą perfuzji nerkowej9. Co więcej, ich niejednorodna reaktywność naczyniowa w różnych stanach patofizjologicznych stanowi strategiczne ramy dla opracowania nowych środków rozszerzających naczynia krwionośne o potencjale ochronnym dla nerek10,11.
Obecnie techniki obrazowania klinicznego (np. ultradźwięki) są rutynowo stosowane do monitorowania zmian przepływu krwi w nerkach; Jednak metodologie eksperymentalne w badaniach podstawowych do bezpośredniej oceny napięcia naczyniowego nerek, kluczowego czynnika determinującego perfuzję nerek, pozostają ograniczone 12,13,14,15. System miografii drucianej jest ugruntowaną platformą eksperymentalną, która mierzy zmiany napięcia w małych tkankach biologicznych in vitro, w tym w naczyniach krwionośnych, tchawicy 16,17,18, o średnicach od 50 μm do 10 mm 16,19,20 . Chociaż miografia drutowa jest szeroko stosowana w badaniach na zwierzętach, międzygatunkowe różnice w strukturze i funkcji naczyń krwionośnych ograniczają zakres, w jakim naczynia krwionośne gryzoni mogą reprezentować fizjologię naczyń krwionośnych człowieka21. W związku z tym precyzyjna identyfikacja i izolacja ludzkich tętnic wewnątrznerkowych na różnych poziomach anatomicznych (międzypłatowych, łukowatych i międzyzrazikowych) ma kluczowe znaczenie dla umożliwienia kompleksowych badań in vitro nad ich właściwościami fizjologicznymi, a także związanymi z chorobą zmianami funkcjonalnymi i patologicznymi mechanizmami uszkodzeń. W połączeniu z interwencjami farmakologicznymi z wykorzystaniem różnych związków wazoaktywnych, system ten pozwala na dynamiczną ocenę i ilościowe rejestrowanie odpowiedzi na zwężenie/rozszerzenie naczyń krwionośnych w izolowanych pierścieniach tętniczych, zapewniając potężne narzędzie do badania reaktywności naczyń w kontrolowanych warunkach eksperymentalnych 19,22,23.
Protokół ten szczegółowo opisuje kompleksową metodologię precyzyjnej lokalizacji anatomicznej i mikrodysekcji ludzkich gałęzi tętnic wewnątrznerkowych (tętnic międzypłatowych, łukowatych i międzyzrazikowych), a następnie charakterystykę funkcjonalną przy użyciu systemu monitorowania napięcia naczyniowego in vitro w celu oceny ich zróżnicowanej reaktywności na leki wazoaktywne, ustanawiając w ten sposób zarówno strukturalne, jak i funkcjonalne różnice między tymi segmentami naczyń krwionośnych. Łącząc lokalizację anatomiczną z profilowaniem reaktywności farmakologicznej i analizą histopatologiczną, tworzymy platformę ex vivo , która umożliwia kompleksową ocenę specyficznych dla regionu odpowiedzi naczyniowych na czynniki wazoaktywne.

<table><tbody><tr><td>Chlorek acetylocholiny</td><td>Sigma-Aldrich, Merck, Darmstadt, Niemcy</td><td>Nr kat. A6625</td><td></td></tr><tr><td>Naczynie hodowlane z czarnym dnem</td><td>Danish Myo Technology, Aarhus, Dania</td><td>300412</td><td></td></tr><tr><td>CaCl2</td><td>Sangon Biotech Co., Ltd., Szanghaj, Chiny</td><td>A501330</td><td></td></tr><tr><td>D-glukoza</td><td>Sangon Biotech Co., Ltd., Szanghaj, Chiny</td><td>A610219</td><td></td></tr><tr><td>Kleszcze Dumonta</td><td>Danish Myo Technology, Aarhus, Dania</td><td>300413</td><td></td></tr><tr><td>Nożyczki do rozwarstwiania Geuder</td><td>Danish Myo Technology, Aarhus, Dania</td><td>400431</td><td></td></tr><tr><td>Przewód doprowadzający</td><td>Danish Myo Technology, Aarhus, Dania</td><td>400447</td><td>Średnica 40 i mikro; m</td></tr><tr><td>Kcl</td><td>Sangon Biotech Co., Ltd., Szanghaj, Chiny</td><td>A100395</td><td></td></tr><tr><td>KH2PO4</td><td>Sangon Biotech Co., Ltd., Szanghaj, Chiny</td><td>A100781</td><td></td></tr><tr><td>LabChart Professional wersja 8.3&nbsp;</td><td>ADInstruments, Australia</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>MgCl2&middot; 6H2O</td><td>Sangon Biotech Co., Ltd., Szanghaj, Chiny</td><td>A100288</td><td></td></tr><tr><td>System Multi miograph&nbsp;</td><td>Danish Myo Technology, Aarhus, Dania</td><td>620 mln</td><td></td></tr><tr><td>Zawartość NaCl</td><td>Sangon Biotech Co., Ltd., Szanghaj, Chiny</td><td>A100241</td><td></td></tr><tr><td>NaHCO3</td><td>Sangon Biotech Co., Ltd., Szanghaj, Chiny</td><td>A100865</td><td></td></tr><tr><td>Fenylefryna</td><td>Sigma-Aldrich, Merck, Darmstadt, Niemcy</td><td>Zobacz materiał P6126 powiedział:</td><td></td></tr></tbody></table>

wielopoziomowa mikrodysekcja i profilowanie funkcjonalno-strukturalne gałęzi tętniczych ludzkiego nerki

Multilevel Microdissection and Functional-Structural Profiling of Human Renal Arterial Branches

Dysfunkcja naczyń nerkowych odgrywa kluczową rolę w patogenezie wielu stanów klinicznych, w tym ostrego uszkodzenia nerek, niedokrwienia nerek i nadciśnienia, stanowiąc poważne wyzwania w postępowaniu klinicznym i niekorzystnie wpływając na wyniki pacjentów. Izolacja i charakterystyka funkcjonalna tętnic wewnątrznerkowych mają kluczowe znaczenie dla wyjaśnienia mechanizmów leżących u podstaw dysfunkcji naczyń nerkowych, szczególnie związanych z uszkodzeniem nerek, oraz ukierunkowania ukierunkowanego rozwoju terapeutycznego. Pomimo znaczenia klinicznego, ustandaryzowane podejścia do izolacji i funkcjonalnej oceny ludzkich tętnic wewnątrznerkowych na różnych poziomach rozgałęzień pozostają słabo rozwinięte. Protokół ten zapewnia kompleksowe ramy dla systematycznej izolacji i multimodalnej oceny wewnątrznerkowych odgałęzień tętniczych, obejmujących oceny funkcjonalne i strukturalne zarówno w warunkach fizjologicznych, jak i patologicznych. Metodologia obejmuje trzy kluczowe elementy: (1) precyzyjną anatomiczną identyfikację i mikrodysekcję tętnic wewnątrznerkowych z nerek dawcy, której towarzyszy barwienie hematoksyliną-eozyną (H&E) w celu potwierdzenia strukturalnego; (2) rygorystyczne procedury normalizacji w miografii drutowej w celu zwiększenia odtwarzalności i wiarygodności pomiarów; oraz (3) analiza ilościowa odpowiedzi naczynioruchowych przy użyciu precyzyjnych technik miografii drucianej. Normalizacja opiera się na zależności długości mięśnia od napięcia, w której przyrostowe rozciąganie odcinków tętnic ustanawia optymalne napięcie spoczynkowe, aby zmaksymalizować nakładanie się aktyny i miozyny, wywołując w ten sposób szczytowe reakcje skurczowe. W miografii drutowej izolowane segmenty naczyń są zawieszone między dwoma równoległymi drutami, co umożliwia precyzyjny pomiar napięcia naczyniowego. Dzięki zastosowaniu rygorystycznych protokołów normalizacji technika ta umożliwia powtarzalną i wiarygodną ocenę ilościową reaktywności naczyń krwionośnych w różnych stanach patofizjologicznych i interwencjach farmakologicznych.

W ludzkiej nerce tętnica międzypłatowa biegnie między piramidami nerkowymi wzdłuż odpowiadającej jej żyły. Charakteryzująca się stosunkowo grubą ścianą naczyniową i znacznym pokryciem tkanki tłuszczowej, tętnica ta wymaga szczególnie starannego rozwarstwienia. Otaczająca tkanka tłuszczowa powinna być skrupulatnie usunięta, aby uniknąć przyłożenia nadmiernej siły podczas procedury izolacji (ryc. 1C).
Tętnica łukowata jest anatomicznie umieszczona na skrzyżowaniu ko...

W artykule przedstawiono krok po kroku protokół izolacji i oceny funkcjonalnej ludzkich gałęzi tętnic nerkowych, ułatwiający badania przedkliniczne w celu opracowania farmaceutycznego.

Wielopoziomowa mikrodysekcja i profilowanie funkcjonalno-strukturalne gałęzi tętniczych ludzkiego nerki

Renal vascular dysfunction plays a critical role in the pathogenesis of multiple clinical conditions, including acute kidney injury, renal ischemia, and ...

Nasze badania mają na celu opracowanie ustandaryzowanych metod izolacji i funkcjonalnej oceny ludzkich gałęzi tętnic nerkowych, odkrycie mechanizmów dysfunkcji naczyń krwionośnych i ukierunkowanie terapii celowanych. Wcześniejsze badania opierały się na modelach zwierzęcych lub obrazowaniu pośrednim, w którym nasza miografia drutowa bezpośrednio odzwierciedla funkcję ludzkiej tętnicy nerkowej in vitro. Nasza metoda umożliwia precyzyjną, specyficzną dla człowieka analizę naczyniową, przezwyciężając ograniczenia gatunkowe i usprawniając opracowywanie leków translacyjnych.Na początek upewnij się, że tkanka nerkowa pozostaje całkowicie zanurzona w płynie podczas transportu, aby utrzymać żywotność tkanki i integralność strukturalną. Wizualnie zidentyfikuj płaszczyznę koronalną, lokalizując wnękę nerki i wyrównując cięcie tak, aby przechodziło zarówno przez miedniczkę nerkową, jak i boczną wypukłą granicę. Za pomocą sterylnego skalpela przetnij nerkę wzdłuż tej płaszczyzny koronalnej, aby utworzyć dwie symetryczne połówki i odsłonić struktury wewnętrzne, takie jak piramidy i kolumny nerkowe.Pod mikroskopem stereoskopowym użyj nożyczek do mikrodysekcji i kleszczy, aby skrupulatnie oddzielić tętnice międzypłatowe, łukowate i międzyzrazikowe w 10-centymetrowym naczyniu hodowlanym z czarnym dnem. Następnie delikatnie usuń otaczającą tkankę i tłuszcz z wypreparowanych tętnic w tym samym 10-centymetrowym naczyniu hodowlanym z czarnym dnem, aby dokładnie je oczyścić. Za pomocą nożyczek do mikrodysekcji pokrój oczyszczone tętnice na pierścienie o długości około dwóch milimetrów w celu zbadania funkcji naczyń krwionośnych.Ostrożnie włóż pierwszy przewód doprowadzający do pierścienia tętniczego w naczyniu. Zegnij jedną stronę drutu prowadzącego pod kątem 90 stopni i przenieś pierścień tętniczy z drutem do komory. Przed zamocowaniem pierścienia tętniczego na uchwycie próbki należy zanotować długość naczynia.Umieść pierścień między dwoma uchwytami i odczytaj skalę mikrometryczną, gdzie jedna działka skali równa się 10 mikrometrom. Odejmij początkową wartość skali zmierzoną, gdy uchwyty po prostu się stykają, aby obliczyć długość i szerokość pierścienia tętniczego. Następnie przymocuj pierścień tętniczy do uchwytu na próbkę typu małż za pomocą dostarczonych przez przyrząd, dokręcając je w kierunku zgodnym z ruchem wskazówek zegara.Następnie przeciągnij drugi przewód prowadzący przez pierścień tętniczy. Owiń drut zgodnie z ruchem wskazówek zegara wokół mocujących na obu końcach, mocno przymocowując go do powierzchni uchwytu próbki. Wybierz Ustawienia normalizacji z menu DMT i ustaw kalibrację okularu na jeden milimetr na działkę, ciśnienie docelowe na 13.3 kilopaskala, IC1/IC100 na 0.9, czas uśredniania online na trzy sekundy i czas opóźnienia na 60 sekund.Wybierz kanał odpowiadający tętnicy docelowej i otwórz ekran Normalizacja z menu DMT. W odpowiednich polach wprowadź punkty końcowe tkanki, ponieważ a1 równa się zero, a a2 równa się zmierzonej długości naczynia w milimetrach. Wprowadź średnicę drutu jako 40 mikrometrów i wprowadź odczyt mikrometru ze skali.Kliknij przycisk Dodaj punkt, aby zapisać dane. Teraz zastosuj pasywne rozciąganie i odczekaj trzy minuty. Wprowadź nowy odczyt mikrometru jako następny punkt i kliknij Dodaj punkt.Dodaj pięć mililitrów 60 roztworu jonów potasu do komory, aby wywołać skurcz naczynia za pośrednictwem potasu. Aby wypłukać 60 roztworów jonów potasu, dodaj trzy razy pięć mililitrów roztworu Krebsa. Aby ocenić skurcz wywołany przez fenylefrynę, zależny od stężenia, należy zastosować skumulowaną fenylefrynę w krokach co pół logarytmu od 10 do potęgi ujemnych dziewięciu do 10 do potęgi ujemnych czterech zębów trzonowych.W celu przeprowadzenia dodatkowych testów na obecność narkotyków należy przemyć komorę ciepłymi pięcioma mililitrami roztworu Krebsa co najmniej pięć razy, aż napięcie powróci do wartości podstawowej i pozostanie stabilne przez co najmniej 10 minut. Tętnica międzypłatowa została pomyślnie wycięta z rdzenia nerkowego, ukazując grubą ścianę naczyniową i otaczającą tkankę tłuszczową, która wymagała starannego usunięcia w celu zachowania integralności strukturalnej. Tętnica łukowata została odizolowana w połączeniu korowo-rdzeniowym, wykazując cieńszą ścianę naczyniową i łukowatą trajektorię.Zidentyfikowano tętnicę międzyzrazikową biegnącą liniowo przez korę nerkową o bardzo cienkiej ściance i ściśle zintegrowanej z tkanką korową. Analiza histologiczna wykazała, że tętnica międzypłatowa miała najgrubszą ścianę naczyniową z wyraźną przydanką, podczas gdy tętnice łukowate i międzyzrazikowe wykazywały coraz cieńsze ściany i mniej warstw mięśni gładkich. Normalizacja tętnic polegała na wielokrotnym rozciąganiu mechanicznym i stymulacji wywołanej potasem, ustalając stabilne warunki napięcia wyjściowego we wszystkich próbkach.Skumulowane dodanie fenylefryny od 10 do potęgi od minus 9 do 10 do potęgi ujemnych stężeń 4 molowych indukowało stopniowo silniejsze skurcze w pierścieniach tętniczych w sposób zależny od dawki. W tętnicach z fenylefryną zwiększenie stężenia acetylocholiny z 10 do potęgi ujemnej 8 do trzech razy 10 do potęgi ujemnych 5 molowych powodowało zależne od stężenia rozszerzenie naczyń krwionośnych.

multilevel-microdissection-functional-structural-profiling-human

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Stopień dysfunkcji naczyń krwionośnych i przyczyniających się do nich mechanizmów fizjologicznych można ocenić u pacjentów z przewlekłą chorobą nerek, mierząc rozszerzenie zależne od przepływu tętnicy ramiennej, prędkość fali tętna aorty i ekspresję białka w komórkach śródbłonka naczyniowego.

Ocena funkcji naczyń krwionośnych u pacjentów z przewlekłą chorobą nerek

Dorosła nerka danio pręgowanego jest doskonałym systemem do regeneracji nerek i badań nad chorobami.  Istotnym aspektem takich badań jest ocena struktury i funkcji nefronu. Protokół ten opisuje kilka metodologii, które można zastosować do oceny składu kanalików nefronowych i oceny wchłaniania zwrotnego przez nerki.

Analiza składu i funkcji nefronów w nerce dorosłego danio pręgowanego

Opisano zastosowanie rezonansu magnetycznego o ultrawysokim polu jako nieinwazyjny sposób uzyskiwania informacji fenotypowych o modelach gryzoni dla wielotorbielowatości nerek i monitorowania interwencji. W porównaniu z tradycyjnym podejściem histologicznym, obrazy MRI można uzyskać in vivo, co pozwala na długotrwałą obserwację.

Zastosowanie rezonansu magnetycznego o ultrawysokim polu w modelach wielotorbielowatości nerek u małych gryzoni do fenotypowania in vivo i monitorowania leków

Ten protokół opisuje metodę izolowania i hodowli podstaw metanefrycznych z embrionów myszy.

Sekcja i hodowla embrionalnej nerki myszy

Inżynierskie konstrukty nerkowe dostarczają rozwiązania na niedobór narządów i szkodliwe skutki dializy. W tym miejscu opisujemy protokół mikropreparacji mysich nerek w celu izolacji segmentów korowo-rdzeniowych. Segmenty te są wszczepiane do konstruktów komórkowych wolnych od rusztowań, tworząc organoidy nerkowe.

Mikrodysekcja pierwotnych segmentów tkanki nerkowej i włączenie do niej nowatorskiej technologii konstrukcji bez rusztowań

Zmodyfikowany model myszy Goldblatt z 2 nerkami i klipsem (2K1C) został opracowany przy użyciu rurki poliuretanowej do zainicjowania zwężenia tętnicy nerkowej, wywołując wzrost ekspresji reniny i uszkodzenie nerek. W tym miejscu opisujemy szczegółową procedurę przygotowania i umieszczenia mankietu na tętnicy nerkowej w celu wygenerowania powtarzalnego i spójnego modelu myszy 2K1C.

Zmodyfikowany mysi model regulacji reniny w zwężeniu tętnicy nerkowej z jedną nerką i jednym klipsem

Opisujemy protokół laserowej mikrodysekcji podsegmentów ludzkiej nerki, w tym kłębuszka nerkowego, kanalika proksymalnego, grubej kończyny wstępującej, przewodu zbiorczego i śródmiąższu. RNA jest następnie izolowane z uzyskanych przedziałów i przeprowadza się sekwencjonowanie RNA w celu określenia zmian w sygnaturze transkryptomicznej w każdym podsegmencie.

Zastosowanie mikrodysekcji laserowej do odkrycia regionalnej transkryptomiki w ludzkiej tkance nerkowej

Protokół opisuje izolację, hodowlę i profilowanie komórek śródbłonka z ludzkiej tętnicy krezkowej. Dodatkowo opracowano metodę przygotowania tętnicy człowieka do transkryptomiki przestrzennej. Proteomika, transkryptomika i testy funkcjonalne mogą być wykonywane na izolowanych komórkach. Protokół ten można zastosować do każdej tętnicy średniej lub dużej wielkości.

Izolacja i profilowanie ludzkich pierwotnych komórek śródbłonka tętnic krezkowych na poziomie transkryptomu

Tutaj prezentujemy protokół z wykorzystaniem mikroskopii 2-fotonowej u szczurów z Monachium Wistar Fromter z powierzchniowymi kłębuszkami nerkowymi w celu ilościowego określenia wpływu przedłużonej niedrożności moczowodu na dynamikę i funkcję kłębuszków nerkowych.

Wykorzystanie mikroskopii 2-fotonowej do ilościowego określenia wpływu przewlekłej jednostronnej niedrożności moczowodu na procesy kłębuszkowe

Tutaj prezentujemy szczegółowy protokół analizy proteomicznej całej nerki, izolowanych kanalików korowych i proteomów rdzeniowych. W badaniu porównano również regionalne proteomy w mysim modelu z cukrzycą i myszach bez cukrzycy.

Porównawcza analiza proteomiczna całej nerki, rdzenia i kanalików korowych w patogenezie cukrzycowej uszkodzenia nerek u myszy

Poznaj wielopoziomową mikrodysekcję i profilowanie funkcjonalno-strukturalne gałęzi tętniczych ludzkiej nerki. Ta metoda umożliwia bezpośrednią ocenę funkcji naczyń krwionośnych, poprawiając translacyjny potencjał badań przedklinicznych.

Wielopoziomowa mikrodysekcja i profilowanie funkcjonalno-strukturalne gałęzi tętniczych ludzkiego nerki

Przeglądaj więcej filmów