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Biology

마우스 뒷면에서 게놈 DNA의 분리

Published: July 29, 2007 doi: 10.3791/246

Summary

Protocol

  1. 꼬리 조각 (3mm)과 마크 귀를 컷.
  2. 720m 리터 인트 30 M L Proteinase K (10 MG / ML 주식)을 추가합니다.
  3. 55 품어 ° 가열 블록 및 와동 10 초 최고 속도로 3 시간 동안 매 시간에 C.
  4. ° C 5 분 70 proteinase K를 Inactivate.
  5. 5 분 얼음 끄다.
  6. 최고 속도로 10 분 꼬리 DNA를 원심 분리기.
  7. 720m 리터 이소프로판올를 포함하는 새로운 튜브에 가만히 따르다.  
  8. 반전 튜브 또는 vortexing으로 침전물의 DNA.
  9. 최고 속도에서 5 분간 DNA를 스핀 다운. 뜨는 제거합니다.
  10. 70 % 에탄올로 펠렛을 씻으십시오.
  11. 전속력으로 게놈 DNA 5 분 스핀 다운. 뜨는 제거합니다.
  12. DNA 1-2 분 동안 건조하실 수 있습니다.
  13. 펠렛의 크기에 따라 100-200미터의 리터의 Resuspend의 DNA.
  14. 55 플레이스 튜브 ° C 1 시간 동안 DNA의 해체를 촉진합니다.  

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Materials

Name Type Company Catalog Number Comments
STE Buffer 100 mm Tris; pH 8.5 /5 mM EDTA /0.2% SDS /200 mM NaCl / in H2O
TE Buffer 100 mM Tris; pH 5.0 /1 mM EDTA /10 mM NaCl

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기본 프로토콜 제 6 게놈 DNA genotyping 마우스
마우스 뒷면에서 게놈 DNA의 분리
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Zangala, T. Isolation of Genomic DNA More

Zangala, T. Isolation of Genomic DNA from Mouse Tails. J. Vis. Exp. (6), e246, doi:10.3791/246 (2007).

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