Modelo experimental de camundongo com melanoma metastático: uma plataforma para estudar o potencial metastático de células de melanoma nos pulmões

- Modelos experimentais de metástase ajudam a avaliar o potencial das células tumorais para extravasar e proliferar em locais específicos após injeção intravascular. Para começar, prepare uma suspensão unicelular de células de melanoma na concentração desejada usando um meio apropriado. Coloque a suspensão em uma seringa.

Em seguida, prenda um rato em uma câmara e prenda-o de forma que sua cauda fique acessível. Gire o mouse 90 graus para visualizar sua veia lateral. Use uma lâmpada de calor para aumentar a temperatura ambiente para dilatar a veia da cauda. Agora, insira a agulha em direção à extremidade distal da cauda e injete a suspensão de células de melanoma preparada na veia dilatada.

As células tumorais metastáticas injetadas migram pelo sistema circulatório. Eventualmente, algumas dessas células extravasam da circulação para órgãos distantes, como os pulmões. Essas células tumorais se adaptam ao seu novo microambiente para proliferar e estabelecer focos metastáticos experimentais.

No protocolo a seguir, demonstraremos a injeção da veia da cauda de células de melanoma B16-BL6 em um modelo de camundongo para estudar seu potencial metastático.

- Depois que todas as suspensões de células B16-BL6 forem preparadas, selecione um mouse. Segurando-o pela cauda, guie o animal, primeiro para trás, em um contentor. Quando o torso do rato estiver na câmara principal e sua cauda fora do aparelho, puxe o animal para o final do sistema de contenção.

Em seguida, insira o êmbolo de retenção e continue a empurrar o êmbolo até que o mouse esteja seguro. Assim que o animal estiver no lugar, gire o mouse 90 graus de modo que uma das veias laterais da cauda fique voltada para cima. Em seguida, use uma compressa com álcool para limpar vigorosamente o lado da cauda do rato onde a veia é mais visível.

Para se preparar para a injeção, primeiro colete 300 microlitros da suspensão de 0,5 milhão de células por mililitro em uma seringa. Em seguida, ejete as bolhas da seringa invertendo-a, sacudindo seu lado e empurrando o êmbolo. Depois que as bolhas forem removidas, ejete a cultura de células para obter um volume final de 250 microlitros na seringa.

Prossiga para estender a cauda do rato com a mão não dominante. Segure-o de forma que o dedo indicador eleve a extremidade proximal da cauda e o polegar pressione a porção distal. Com a mão dominante, insira a agulha na veia em direção à extremidade distal da cauda, em um ângulo minúsculo para baixo. Em seguida, insira a agulha ainda mais, ajustando-a para que corresponda ao ângulo da veia da cauda.

Depois que a agulha for inserida, aproximadamente 1 centímetro na veia da cauda, comece a empurrar o êmbolo enquanto segura a seringa com firmeza. Pare qualquer sangramento segurando a gaze contra o local de entrada. Uma vez ejetada a suspensão celular, remova a agulha da veia e descarte-a. Em seguida, remova o êmbolo do limitador e coloque o mouse em uma gaiola receptora.

• Experimental metastasis models - Tools to evaluate tumor cells' propensity to extravasate and proliferate following intravascular injection.
• Melanoma - A potent type of skin cancer that can spread to other organs like the lungs.
• B16-BL6 melanoma cells - Specific melanoma cells used in research for their metastatic potential.
• Tail vein injection - Technique to introduce substances directly into the bloodstream for experimental purposes.
• Metastatic foci - The sites where cancer cells adapt, proliferate and establish after traveling from the original tumor site.

• Melanoma metastasis - This describes how melanoma cells spread from the primary site to other parts of the body (e.g., lungs).
• Basics of tail vein injection - This procedure is a method of administering substances directly into the bloodstream (e.g., B16-BL6 melanoma cells).
• Metastatic foci formation process - This describes how injected cancer cells adapt to new environments, leading to metastasis.
• Link to mouse model - B16-BL6 melanoma cells are injected into a mouse model to study their metastatic potential.

• What is melanoma and how does it metastasize to the lungs?
• What is the purpose of tail vein injection in the metastatic model?
• How do melanoma cells form metastatic foci in distant organs?

• Targeted cancer treatments - Understanding metastasis could guide development of targeted therapies (e.g., for melanoma).
• Cancer research - The B16 mouse model aids in understanding cancer spread (e.g., melanoma metastasis).
• Medical advancements - Learning about metastasis contributes to treating other metastatic cancers (e.g., lung metastasis).
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