Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Técnicas Biológicas
0 visualizações • 5:54 min. • July 8th, 2025
A microscopia de fluorescência intravital é útil para estudar a indução fototóxica da formação de um trombo - um coágulo sanguíneo - em um local de lesão microvascular.
Comece tomando um camundongo sem pêlos anestesiado injetado com um polissacarídeo marcado com fluoróforo fototóxico. Coloque o mouse em decúbito ventral em uma plataforma de aquecimento para manter a temperatura fisiológica para uma circulação sanguínea adequada.
Coloque a parte apical da orelha sob um microscópio de fluorescência intravital. Após a excitação com a luz, o fluoróforo emite fluorescência - permitindo o monitoramento do fluxo sanguíneo microvascular. Aumente a intensidade da luz para induzir a formação de trombos.
O fluoróforo absorve a luz de alta intensidade e reage com o oxigênio molecular para gerar espécies reativas de oxigênio. Essas moléculas causam estresse oxidativo nas células endoteliais, levando a danos celulares e à exposição da matriz subendotelial.
As células danificadas liberam mediadores trombóticos que unem o colágeno exposto na matriz subendotelial e as plaquetas circulantes, que se ligam aos mediadores por meio de receptores específicos.
A ligação ativa as plaquetas, causando a libe
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