Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 3:19 min. • July 8th, 2025
Pegue uma suspensão de células e detritos de fibras do nervo ciático de camundongo digeridas enzimaticamente.
Passe por uma peneira, removendo os detritos.
Centrifugar o filtrado e remover o sobrenadante.
Ressuspenda as células em meio contendo soro e semeie-as em uma placa de cultura revestida com proteína de adesão.
Incube para adesão celular. Substitua a mídia pela mídia de célula de Schwann. Incubar para formação de monocamada de células de Schwann.
Remova a mídia e lave com tampão. Incube com tripsina para separar as células.
Adicione meios contendo soro para interromper a atividade enzimática.
Recolha as células e centrifugue. Descarte o sobrenadante.
Ressuspenda as células em tampão e adicione microesferas magnéticas revestidas com anticorpos.
Incubar para ligar anticorpos a glicoproteínas de fibroblastos.
Centrifugue e descarte o sobrenadante. Ressuspenda as células em tampão e carregue-as em uma coluna de separação magnética contendo esferas ferromagnéticas colocadas no campo magnético do separador magnético.
O campo magnético retém os fibroblastos ligados às microesferas, permitindo que as células de Schwann sejam coletadas no fluxo.
Transferir os nervos digeridos para um
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