Separação magnética de células de Schwann de nervos ciáticos de camundongos

0 visualizações3:19 min. • July 8th, 2025

Pegue uma suspensão de células e detritos de fibras do nervo ciático de camundongo digeridas enzimaticamente.

Passe por uma peneira, removendo os detritos.

Centrifugar o filtrado e remover o sobrenadante.

Ressuspenda as células em meio contendo soro e semeie-as em uma placa de cultura revestida com proteína de adesão.

Incube para adesão celular. Substitua a mídia pela mídia de célula de Schwann. Incubar para formação de monocamada de células de Schwann.

Remova a mídia e lave com tampão. Incube com tripsina para separar as células.

Adicione meios contendo soro para interromper a atividade enzimática.

Recolha as células e centrifugue. Descarte o sobrenadante.

Ressuspenda as células em tampão e adicione microesferas magnéticas revestidas com anticorpos.

Incubar para ligar anticorpos a glicoproteínas de fibroblastos.

Centrifugue e descarte o sobrenadante. Ressuspenda as células em tampão e carregue-as em uma coluna de separação magnética contendo esferas ferromagnéticas colocadas no campo magnético do separador magnético.

O campo magnético retém os fibroblastos ligados às microesferas, permitindo que as células de Schwann sejam coletadas no fluxo.

Transferir os nervos digeridos para um

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Nervo Ciático de Camundongo