Avaliação de uma junção neuromuscular funcional por meio de estimulação óptica simultânea e gravação de vídeo

Comece com um biorreator com uma câmara muscular contendo tecido muscular incrustado em colágeno apoiado sobre os pilares da câmara.

O canal da neuroesfera contém uma neuroesfera em uma matriz de colágeno. Os neurônios motores da neuroesfera expressam canais sensíveis à luz.

Adicione um meio de diferenciação contendo fatores de crescimento neural que estimulam os neurônios a estender suas projeções.

Troque regularmente o meio para garantir a extensão contínua do neurônio em direção ao tecido muscular, formando junções neuromusculares.

Observe o biorreator sob um microscópio equipado com uma câmera e uma fonte de luz azul.

Aplique pulsos de luz azul para abrir os canais sensíveis à luz nos neurônios, permitindo que os íons do meio fluam e estimulem os neurônios a gerar sinais elétricos.

Esses sinais viajam através das projeções neuronais para as junções neuromusculares, transmitindo o sinal elétrico para o tecido muscular.

Grave um vídeo simultaneamente. Uma contração gradual da fibra muscular confirma o desenvolvimento de uma junção neuromuscular funcional.

Prepare uma mistura de 4 para 1 de 3 miligramas por mililitro de colágeno I e matriz de membrana basal solubibilizada. Em segu