Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 2:43 min. • June 18th, 2025
Pegue uma placa de vários poços contendo células-tronco neurais aderidas ou NSCs isoladas de um cérebro de camundongo transgênico. Esses NSCs contêm uma proteína marcada com fluorescência que é específica para a primeira fase de crescimento, ou G1.
À medida que o NSC se divide, ele fluoresce na fase G1 do ciclo celular, enquanto não emite fluorescência em outras fases.
Coloque a placa em uma câmara confocal de varredura a laser para imagens de microscópio, mantida a uma temperatura controlada.
Selecione a lente objetiva desejada e ajuste a intensidade de fluorescência.
Configure os parâmetros para imagens de lapso de tempo.
Escolha a opção de imagem grande e agende a aquisição de imagens em intervalos regulares para a duração desejada.
Use um scanner ressonante de alta velocidade para evitar fotobranqueamento e manter alta resolução.
Use a configuração de campo claro para visualizar a forma da célula e use um filtro fluorescente apropriado para capturar a fluorescência.
Inicie a imagem de lapso de tempo do NSC para visualizar diferentes fases do ciclo celular.
Prepare um microscópio confocal de varredura a laser para imagens pré-aquecendo a câmara de controle de temperatura anexada a 37 gr
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