Visualização do plexo coróide de um cérebro de camundongo usando microscopia eletrônica de varredura

Pegue o plexo coróide de um cérebro de camundongo em uma cesta de amostras.

O tecido, localizado dentro dos ventrículos cerebrais, contém uma camada de células epiteliais com microvilosidades em sua superfície apical.

Incubar o tecido em uma solução fixadora para preservar sua arquitetura celular.

Lave com um tampão para remover o excesso de fixador e estabilizar o pH.

Incube o tecido com tetróxido de ósmio que se liga aos lipídios da membrana celular, preservando a estabilidade da membrana, depois enxágue o excesso de reagente.

Desidrate o tecido usando concentrações crescentes de álcool para evitar distorção do tecido durante a imagem.

Seque o tecido, prenda-o em um suporte de amostra revestido de carbono e, em seguida, cubra-o com uma camada condutora de platina.

Usando microscopia eletrônica de varredura, concentre um feixe de elétrons na superfície. A camada de platina dissipa elétrons, evitando o acúmulo de carga e minimizando os artefatos de imagem.

Um detector captura os elétrons retroespalhados da superfície, produzindo uma imagem do tecido exibindo células epiteliais com microvilosidades.

Para realizar a preparação da amostra para MEV, transfira o plexo coróide recém-isolado para