Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 2:00 min. • June 17th, 2025
Comece com um prato contendo fatias corticais de cérebro de embriões de camundongos transgênicos em meios suplementados com luciferina.
A região cortical contém células-tronco neurais que expressam proteínas fluorescentes verdes ou GFPs e um gene de interesse fundido a um gene repórter de luciferase.
Coloque o prato no microscópio stage para medições de fluorescência e luminância.
Capture imagens de teste de fluorescência GFP, com foco em regiões de interesse.
Durante a diferenciação neuronal, as células-tronco começam a expressar o gene de interesse e produzem proteínas fundidas com a enzima luciferase.
A luciferina interage com enzimas luciferase, gerando bioluminescência que reflete diretamente a expressão do gene de interesse durante a diferenciação.
Capture uma imagem de fluorescência para identificar regiões específicas de atividade, uma imagem de bioluminescência para monitorar a expressão gênica dinâmica e uma imagem de campo claro para fornecer informações morfológicas.
Adquira essas imagens tridimensionais de lapso de tempo para visualizar a expressão gênica durante a diferenciação neuronal dentro do ambiente do tecido nativo.
Para visualizar a expressão do repórter de luciferas
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