Name: Síntese combinatória de alta capacidade e liberação de proteínas a partir de polímero de Cinema e Bibliotecas Nanopartículas (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-09-06T12:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 58 s
Description: Aprenda a síntese combinatória de filmes e nanopartículas de polianidrida biodegradável com detecção de liberação de proteínas em alta vazão. Este método acelera o desenvolvimento de biomateriais para liberação controlada de fármacos.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Os autores reconhecem o Prêmio ONR MURI-(NN00014-06-1-1176) e os EUA Army Medical Research e de Material Command (Grant No. W81XWH-10-1-0806) de apoio financeiro. Este material é baseado num trabalho apoiado pela National Science Foundation, Grant CEE n º 0552584 e 0851519.

1. Combinatória de Polímeros Síntese Library (Variando em Polymer Química) - veja a Figura 1 para a configuração Robotic <ol><li> Dissolver cada monómero na apropriada (concentração = 25 mg / ml) com solvente e carregar cada para uma seringa de 10 cc de gás apertado. </li><li> Anexar os solventes tubos capilares de bloqueio lure resistentes ao final de cada seringa. </li><li> Coloque as seringas nas bombas de seringa (New Era bombas de seringa Programáveis) e bloquear a posição. </li><li> Definir os actuadores lineares (Zaber) para a posição de partida. </li><li> Usando pinças do suporte do anel, a posição final de ambos os tubos capilares para dentro do frasco de partida / poço de deposição de monómero. </li><li> Inicie o programa de LabVIEW, que bombeia volumes variáveis ​​de cada monómero em cada poço, dependendo da composição do copolímero pretendido. Isto é conseguido no programa, instruindo o actuador do eixo Z para baixar os tubos capilares para dentro do frasco / recipiente e, em seguida, cada bomba para distribuir o volume desejado. Next, o programa instrui o Z-actuador para retornar à sua posição de repouso e os X e Y actuadores para mover para a posição seguinte do frasco / recipiente. Esta é realizada até que cada poço tem o volume desejado de monómero depositado nele. </li><li> Na sequência de deposição de monómero, a biblioteca de monómero multi-poços ou multi-frasco é transferido para um forno a vácuo pré-aquecido e incubou-se sob vácuo, durante a duração da reacção de polimerização de condensação. Para CPH: SA síntese a reacção é realizada a 180 ° C, 0,3 torr, durante 1,5 horas, mas estas condições de reacção irá variar entre os diferentes sistemas de polímeros. </li></ol> 2. Combinatória em branco e Proteína-carregado nanopartículas de polímeros e Fabricação Film Library - veja a Figura 1 para a instalação robótica <ol><li> A seringa na bomba de seringa em primeiro lugar programável é preenchido com um solvente (biblioteca em branco) ou com um solvente de proteínas dispersas nele (proteína-loaded biblioteca), enquanto a seringa na segunda seringabomba é deixada em branco. Tubos para o fabrico de nanopartículas no porta-amostras adjacentes são preenchidos com o não-solvente (proporção de solvente para não-solvente é de 1 a 100). Para a fabricação de uma película placa multi-poços vazios é utilizado em vez dos tubos de amostra no suporte adjacente. </li><li> Utilizando o programa de LabVIEW, o solvente é depositado em todos os frascos de polímero / poços da biblioteca (concentração = 20 mg / ml) e incubou-se durante 1-5 minutos. Um passo opcional sonicação (30 seg a 40 Hz) pode ser introduzido para assegurar a dissolução completa do polímero. </li><li> Em seguida, ao iniciar um programa LabVIEW separado, a amostra é retirada para a seringa vazia, e depositados na sua correspondente tubo de poço não solvente (nanopartículas) ou vazio (filmes) no porta-amostras adjacentes. </li><li> Este processo realiza-se, para cada composição da biblioteca de polímero discretas. </li><li> A nanopartícula ou biblioteca de película é então colocado numa câmara de vácuo para a remoção de solvente e não-solvente (a libra nanopartículary também podem ser recuperados através de filtração por vácuo). </li></ol> 3. Alto rendimento de Lançamento Cinética Proteína <ol><li> Para investigar high-throughput cinéticas de libertação de proteína a partir de uma biblioteca de polímeros, de 96 de profundidade welled (2 ml / poço), a placa de polipropileno é modificado de tal modo que a parte superior de 1/3 a parede do poço, em colunas adjacentes (ex: A e B, C e D, E e F, G e H) é removido para as cavidades adjacentes. Os filmes carregados de proteína devem ser fabricados em ou as nanopartículas transferido para esta placa para realizar estudos de alto rendimento de libertação cinética. As amostras de proteína-carregado de nanopartículas ou película tem de ser colocado apenas em um poço das colunas adjacentes (ex: A, C, E e G). Veja a Figura 4 para detalhes. </li><li> Após a transferência das nanopartículas de libertação da placa de fundo 96-welled, as partículas são deixadas assentar. Tampão PBS (0,1 mM, pH 7,4) é lentamente adicionada a cada poço de amostra (colunas A, C, E e G) e, em seguida, a cada poço vizinho (colunas B, D, F e H), até que os poços são cheios e o tampão é de fluxo livre entre os poços adjacentes. Para as nanopartículas, este processo necessita de ser efectuado com cuidado extra para assegurar que as partículas permaneçam no fundo do poço de amostra (colunas A, C, E e G) e não transferido para a libertação contígua bem (colunas B, D, F , e H). Em alguns casos, a centrifugação é necessária para localizar as amostras de nanopartículas na parte inferior do poço de amostra (colunas A, C, E e G). </li><li> Em seguida, a placa de libertação é fechado com uma tampa e colocada à temperatura desejada (isto é, 37 ° C), sob agitação, durante a duração da experiência. </li><li> Em pontos de tempo incremental (ie 0,04, 1, 2, 3, 5, 7, 9, 12, 15, 19, 24, e 30 dias) a quantidade de proteína liberada conjugado com fluorocromo é quantificado utilizando um scanner plano Typhoon 9400 Fluorescente ( GE Healthcare). O prato de liberação é colocada sobre a superfície do scanner, digitalizados utilizando o laser de excitação e emissão adequados filters, e a intensidade de fluorescência da proteína libertada nas cavidades de libertação (colunas B, D, F e H) é quantificado (Quant Imagem). Sugere-se que os padrões de concentrações conhecidas de proteína ser incluídos na placa de poço para calcular a quantidade de proteína e de contabilidade para a têmpera fluorocromo. </li></ol> 4. Resultados representativos Após o fabrico da biblioteca de polímeros, caracterização foi efectuada com 1 H RMN, GPC, e FTIR para validar este método combinatorial 1,7,8,11. Gama de pesos moleculares de 10,000-20,000 g / mol, índice varia polidispersão 1,5-3,0, e composição química tem sido mostrado para ser preciso e de acordo com métodos convencionais de síntese de polianidrido 12-15. Do mesmo modo, as imagens de SEM das bibliotecas de nanopartículas apresentaram morfologia superficial similar, tamanho e distribuição de tamanho como a de nanopartículas convencionalmente fabricadas 2. Proteína de liberação kinetics a partir de nanopartículas de polianidrido ou películas é levada a cabo numa placa modificada bem como descrito anteriormente 1. Os resultados revelaram uma libertação de ordem aproximada de zero, com ou sem uma explosão depende da carga de proteína e da química do polímero (Figuras 2 e 3) 1,12,14,16. <img alt="Figura 1" src="/files/ftp_upload/3882/3882fig1.jpg" /> Figura 1. Combinatorial película de polímero e o aparelho de fabricação de nanopartículas. <img alt="Figura 2" src="/files/ftp_upload/3882/3882fig2.jpg" /> Figura 2 High-throughput libertação de Texas Red albumina de soro bovino (TRBSA) a partir de um CPH:. SA biblioteca de nanopartículas de polímero. SA químicos ricos polímero encapsulado TRBSA libertar o mais rapidamente, ao passo que produtos químicos CPH-ricos polímero libertar o mais lento. As barras de erro representam desvio padrãoção e n = 4. Reproduzido com a permissão de Petersen et. al. 1. Copyright 2010 American Chemical Society. <img alt="Figura 3" src="/files/ftp_upload/3882/3882fig3.jpg" /> Figura 3 High-throughput libertação de Texas Red albumina de soro bovino (TRBSA) a partir de um CPTEG:. CPH biblioteca película de polímero. Químicas CPTEG ricos polímero encapsulado TRBSA libertar o mais rapidamente, ao passo que produtos químicos CPH-ricos polímero libertar o mais lento. As barras de erro representam o desvio padrão e n = 3. <img alt="Figura 4" src="/files/ftp_upload/3882/3882fig4.jpg" /> Figura 4. Imagem mostrando dois poços vizinhos &quot;antes&quot; e modificação &quot;depois&quot; na placa de polipropileno de 96 profundidade de poços. A modificação da imagem &quot;depois&quot; da direita, também descreve a adição de uma película de polímero (parte inferior do lado esquerdo poço) com uma molécula fluorescente encapsuladoser libertado entre os dois poços numa solução tampão. A molécula fluorescente libertado é então detectada no muito bem.

<ol><li>Petersen, L. K., Sackett, C. K., Narasimhan, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel%2C+high-throughput+method+to+study+in+vitro+protein+release+from+polymer+nanospheres%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comb.+Chem%22%5BJournal%5D)">A novel, high-throughput method to study in vitro protein release from polymer nanospheres.</a> J. Comb. Chem. 12, 51-56 (2010).</li>
<li>Petersen, L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activation+of+innate+immune+responses+in+a+pathogen-mimicking+manner+by+amphiphilic+polyanhydride+nanoparticle+adjuvants%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Activation of innate immune responses in a pathogen-mimicking manner by amphiphilic polyanhydride nanoparticle adjuvants.</a> Biomaterials. 32, 6815-6822 (2011).</li>
<li>Vogel, B. M., Cabral, J. T., Eidelman, N., Narasimhan, B., Mallapragada, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parallel+synthesis+and+high-throughput+dissolution+testing+of+biodegradable+polyanhydride+copolymers%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comb.+Chem%22%5BJournal%5D)">Parallel synthesis and high-throughput dissolution testing of biodegradable polyanhydride copolymers.</a> J. Comb. Chem. 7, 921-928 (2005).</li>
<li>Petersen, L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-throughput+evaluation+of+in+vivo+biodistribution+of+polyanhydride+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Adv.+Healthcare+Mater%22%5BJournal%5D)">High-throughput evaluation of in vivo biodistribution of polyanhydride nanoparticles.</a> Adv. Healthcare Mater. , Forthcoming (2012).</li>
<li>Petersen, L. K., Narasimhan, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combinatorial+design+of+biomaterials+for+drug+delivery%3A+opportunities+and+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opin.+Drug+Deliv%22%5BJournal%5D)">Combinatorial design of biomaterials for drug delivery: opportunities and challenges.</a> Expert Opin. Drug Deliv. 5, 837-846 (2008).</li>
<li>Petersen, L. K., Oh, J., Sakaguchi, D. S., Mallapragada, S. K., Narasimhan, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amphiphilic+polyanhydride+films+promote+neural+stem+cell+adhesion+and+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng%22%5BJournal%5D)">Amphiphilic polyanhydride films promote neural stem cell adhesion and differentiation.</a> Tissue Eng. 17, 2533-2541 (2011).</li>
<li>Petersen, L. K., Sackett, C. K., Narasimhan, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-throughput+analysis+of+protein+stability+in+polyanhydride+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomater%22%5BJournal%5D)">High-throughput analysis of protein stability in polyanhydride nanoparticles.</a> Acta Biomater. 6, 3873-3881 (2010).</li>
<li>Petersen, L. K., Xue, L., Wannemuehler, M. J., Rajan, K., Narasimhan, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+simultaneous+effect+of+polymer+chemistry+and+device+geometry+on+the+in+vitro+activation+of+murine+dendritic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">The simultaneous effect of polymer chemistry and device geometry on the in vitro activation of murine dendritic cells.</a> Biomaterials. 30, 5131-5142 (2009).</li>
<li>Thorstenson, J. B., Petersen, L. K., Narasimhan, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combinatorial%2Fhigh-throughput+methods+for+the+determination+of+polyanhydride+phase+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comb.+Chem%22%5BJournal%5D)">Combinatorial/high-throughput methods for the determination of polyanhydride phase behavior.</a> J. Comb. Chem. 11, 820-828 (2009).</li>
<li>Xue, L., Petersen, L., Broderick, S., Narasimhan, B., Rajan, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identifying+factors+controlling+protein+release+from+combinatorial+biomaterial+libraries+via+hybrid+data+mining+methods%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Comb.+Sci%22%5BJournal%5D)">Identifying factors controlling protein release from combinatorial biomaterial libraries via hybrid data mining methods.</a> ACS Comb. Sci. 13, 50-58 (2011).</li>
<li>Adler, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-throughput+cell-based+screening+of+biodegradable+polyanhydride+libraries%5BTitle%5D)+AND+%22Comb.+Chem.+High+Through.+Screen%22%5BJournal%5D)">High-throughput cell-based screening of biodegradable polyanhydride libraries.</a> Comb. Chem. High Through. Screen. 12, 634-645 (2009).</li>
<li>Determan, A. S., Trewyn, B. G., Lin, V. S., Nilsen-Hamilton, M., Narasimhan, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Encapsulation%2C+stabilization%2C+and+release+of+BSA-FITC+from+polyanhydride+microspheres%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Control.+Release%22%5BJournal%5D)">Encapsulation, stabilization, and release of BSA-FITC from polyanhydride microspheres.</a> J. Control. Release. 100, 97-109 (2004).</li>
<li>Determan, A. S., Wilson, J. H., Kipper, M. J., Wannemuehler, M. J., Narasimhan, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protein+stability+in+the+presence+of+polymer+degradation+products%3A+consequences+for+controlled+release+formulations%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Protein stability in the presence of polymer degradation products: consequences for controlled release formulations.</a> Biomaterials. 27, 3312-3320 (2006).</li>
<li>Torres, M. P., Determan, A. S., Anderson, G. L., Mallapragada, S. K., Narasimhan, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amphiphilic+polyanhydrides+for+protein+stabilization+and+release%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Amphiphilic polyanhydrides for protein stabilization and release.</a> Biomaterials. 28, 108-116 (2007).</li>
<li>Torres, M. P., Vogel, B. M., Narasimhan, B., Mallapragada, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthesis+and+characterization+of+novel+polyanhydrides+with+tailored+erosion+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biomed.+Mater.+Res.+A%22%5BJournal%5D)">Synthesis and characterization of novel polyanhydrides with tailored erosion mechanisms.</a> J. Biomed. Mater. Res. A. 76, 102-110 (2006).</li>
<li>Carrillo-Conde, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Encapsulation+into+amphiphilic+polyanhydride+microparticles+stabilizes+Yersinia+pestis+antigens%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomater%22%5BJournal%5D)">Encapsulation into amphiphilic polyanhydride microparticles stabilizes Yersinia pestis antigens.</a> Acta Biomater. 6, 3110-3119 (2010).</li>
</ol>

Não há conflitos de interesse declarados.

O conhecimento das condições de síntese necessários e as temperaturas de transição vítrea (T g s) dos polímeros a ser sintetizados são essenciais para o fabrico de biblioteca. Se o T g s estão abaixo da temperatura ambiente, o passo de fabrico de nanopartículas podem ter de ser realizado num ambiente com temperatura controlada abaixo da Tg dos polímeros. Além disso, o cuidado deve ser tomado para assegurar que todo o equipamento que entra em contato com altas temperaturas e os solventes ...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nome </td><td> Companhia </td><td> Número de catálogo </td></tr><tr><td> Estágio motorizado XYZ: 3x T-LSM050A, 50 mm de curso por eixo </td><td> Zaber Technologies </td><td> T-XYZ-LSM050A-KT04 </td></tr><tr><td> NE-1000 bomba de seringa única </td><td> Sistemas com bombas de Época </td><td> NE-1000 </td></tr><tr><td> Pyrex * Vista * Rimless tubos de cultura de vidro reutilizáveis </td><td> Corning </td><td> 07-250-125 </td></tr><tr><td> Cubetas de vidro </td><td> Estratégias científicos </td><td> G102 </td></tr><tr><td> LabVIEW </td><td> National Instruments </td><td> 776671-35 </td></tr><tr><td> Seringas SGE gás apertado, Luer Loc </td><td> Sigma Aldrich </td><td> 509507 </td></tr><tr><td> U96 Deepwell Plates 1,3 ml e 2,0 ml </td><td> Thermo Scientific: Nunc </td><td> 278743 </td></tr><tr><td> Bem esteiras cap </td><td> Thermo Scientific: Nunc </td><td> 276000 </td></tr><tr><td> Tufão 9400 </td><td> GE Healthcare </td><td> 63-0055-79 </td></tr><tr><td> Whatman Grade 50 Círculos 90 milímetros </td><td> Whatman </td><td> 1450-090 </td></tr></tbody></table>

síntese combinatória de alta capacidade e liberação de proteínas a partir de polímero de cinema e bibliotecas nanopartículas

Combinatorial Synthesis of and High-throughput Protein Release from Polymer Film and Nanoparticle Libraries

Polianidridos são uma classe de biomateriais com excelente biocompatibilidade e capacidade de entrega de drogas. Embora tenham sido estudados extensivamente com convencional de um exemplo de-a-um-tempo técnicas de síntese, uma abordagem mais recente de alto rendimento tem sido desenvolvido permitindo a síntese e teste de grandes bibliotecas de polianidridos 1. Isto irá facilitar a optimização mais eficiente e processo de concepção desses biomateriais para aplicações de entrega de drogas e vacinas. O método, neste trabalho descreve a síntese combinatória de película de polianidrido biodegradáveis ​​e bibliotecas de nanopartículas e de detecção de elevado débito de libertação de proteínas a partir destas bibliotecas. Neste método roboticamente operado (Figura 1), os actuadores lineares e bombas de seringa são controlados por LabVIEW, que permite que um protocolo de mãos-livres automatizado, eliminando o erro do utilizador. Além disso, este método permite a fabricação rápida de bibliotecas de micro-escala de polímero, vermelhoucing o tamanho do lote, enquanto que resulta na criação de sistemas de multivariante polímero. Esta abordagem combinatória para a síntese do polímero facilita a síntese de até 15 diferentes polímeros em uma quantidade equivalente de tempo que seria necessário para sintetizar um polímero convencional. Além disso, a biblioteca combinatória de polímero pode ser fabricada em geometrias em branco ou proteína-carregado incluindo filmes ou nanopartículas mediante dissolução da biblioteca de polímero em um solvente e precipitação num não-solvente (por nanopartículas), ou por secagem sob vácuo (para filmes). Durante o carregamento de uma proteína conjugados com fluorocromos para as bibliotecas de polímeros, a cinética de libertação de proteína podem ser avaliadas em alto rendimento, utilizando um método de detecção de fluorescência de base (Figuras 2 e 3), conforme descrito anteriormente 1. Esta plataforma combinatória foi validado com métodos convencionais de 2 e a película de polianidrido e bibliotecas de nanopartículas foram caracterizadas com <sup&gt; 1 H NMR e FTIR. As bibliotecas foram pesquisadas quanto a cinética de libertação da proteína, estabilidade e antigenicidade; in vitro de toxicidade celular, citocinas, produção superfície marcador de expressão, adesão, proliferação e diferenciação, e na biodistribuição in vivo e mucoadesão 1-11. O método desenvolvido aqui combinatória permite alto rendimento de síntese de polímeros e fabrico de proteína-carregado de nanopartículas e bibliotecas de película, a qual pode, por sua vez, ser rastreadas in vitro e in vivo para a optimização do desempenho do biomaterial.

O método descreve a síntese combinatória de película de polianidrido biodegradáveis ​​e bibliotecas de nanopartículas e de detecção de elevado débito de libertação de proteínas a partir destas bibliotecas.

Síntese combinatória de alta capacidade e liberação de proteínas a partir de polímero de Cinema e Bibliotecas Nanopartículas

Polianidridos são uma classe de biomateriais com excelente biocompatibilidade e capacidades de entrega de fármacos. Embora tenham sido extensamente estudados com...

Este vídeo descreve a síntese combinatória de bibliotecas de filmes e nanopartículas de polianidrido biodegradável e a detecção de alto rendimento da liberação de proteínas a partir dessas bibliotecas. Primeiro, um aparelho automatizado de deposição de alto rendimento é usado para depositar uma matriz com diversidade composicional de monômeros em cubetas de vidro. Uma reação de policondensação é realizada a 180 graus Celsius e 0,3 torr por 1,5 hora.Essas condições de reação são específicas para a síntese do polímero anidrido poli C-P-H-S-A. Utilizando o aparelho de deposição automatizado, o solvente e quaisquer componentes para encapsulação são depositados nas cubetas contendo a biblioteca de polímeros. Pode-se aplicar sonicação para garantir a dissolução completa do polímero e a dispersão uniforme dos componentes adicionais.Em seguida, o polímero dissolvido é transferido para um tubo contendo um antissolvente para fabricar a biblioteca de nanopartículas por nanoprecipitação. As nanopartículas são recuperadas por secagem a vácuo ou filtração e, em seguida, transferidas para uma placa modificada de 96 poços com liberação controlada. Por fim, a biblioteca carregada com proteína é inc

combinatorial-synthesis-high-throughput-protein-release-from-polymer

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bioengenharia

Uma descrição da formação de um polímero de microarray utilizando uma técnica de fotopolimerização on-chip. A caracterização de superfície de alto rendimento utilizando a microscopia de força atómica, as medições do ângulo de contacto da água, raios-X e espectroscopia de fotoelectrões de tempo de voo de espectrometria de massa de iões secundários e um ensaio de ligação celular é também descrito.

Microarrays de polímeros para Discovery High Throughput de Biomateriais

Apresenta-se um método de microfluidos para a expressão de arrays de proteínas. O dispositivo consiste de milhares de câmaras de reacção controladas por válvulas de micro-mecânicos. O dispositivo micro é acoplado a uma biblioteca de genes microarray-impresso. Estes genes são transcritos e traduzidos em seguida, on-chip, resultando numa matriz de proteína pronta para o uso experimental.

Alto rendimento Gerador Protein Expression Usando uma plataforma microfluídica

Neste artigo, um método de produção elevada é apresentada para a síntese de oligossacáridos e à sua fixação à superfície de nanopartículas de polianidrido para utilização posterior em alvejar receptores específicos em células apresentadoras de antigénio.

Alta capacidade de síntese de hidratos de carbono e funcionalização de nanopartículas polianidrido

Uma técnica simples, robusta e escalável para funcionalizar e auto-montar macroscópicas filmes monocamada de nanopartículas-ligante em substratos sem modelo descrito neste protocolo.

Uma técnica para funcionalizar e auto-montar macroscópicas Nanopartículas-ligante monocamada Films em substratos sem Modelo

Relatamos protocolos para "polimerizar" vários tipos de nanopartículas metálicas encapsuladas em polímeros em longas cadeias de "homo-" e "copolímeros".

Usando Polystyrene-<em&gt; Bloco</em&gt; -poli (Ácido acrílico) -Revestido metal Nanopartículas como monómeros para a sua homo- e co-polimerização

Não agitada polimerização precipitação fornece uma abordagem de prototipagem rápida, reprodutível para a síntese de estímulos-Sensitive poli (N -isopropylacrylamide) microgéis de distribuição de tamanhos estreita. Nesta síntese protocolo, luz caracterização dispersão e rastreamento de partículas de fluorescência única dessas microgï¿½s em uma configuração de microscopia de campo amplo são demonstrados.

Síntese controlada e Fluorescência de rastreamento de Poly altamente uniforme (<em&gt; N</em&gt; -isopropylacrylamide) microgéis

Nanomateriais fornecem mecanismos versátil de entrega terapêutico controlado para tanto a ciência básica e aplicações de translação, mas sua fabricação muitas vezes requer perícia que não está disponível em laboratórios mais biomédicos. Aqui, apresentamos os protocolos para a fabricação escalável e carregamento terapêutico de diversas nanocarriers Self montado usando flash nanoprecipitation.

Montagem rápida, escalável e carregamento de proteínas bioativas e Imunoestimuladores em diversas Nanocarriers sintéticas através de Flash Nanoprecipitation

Aqui, apresentamos um protocolo para conjugar o monômero proteico por enzimas que formam polímero de proteína com uma sequência controlada e imobilizá-lo na superfície para estudos de espectroscopia de força de molécula única.

Síntese Enzimática Mediada oOAEP1 e Imobilização de Proteína Polimerizada para Espectroscopia de Força De Molécula Única

Os nanogéis são uma plataforma de nanopartículas excelente e versátil para a entrega de produtos biológicos. Nanogéis poliméricos à base de polietilenoglicol responsivos a estímulos, capazes de encapsular cargas úteis à base de proteínas, foram sintetizados usando uma estratégia de co-nanopolimerização de reticulação de uma etapa em condições aquosas. A fabricação e caracterização ideais dessas novas nanopartículas são apresentadas aqui.

Síntese de Nanogéis Responsivos a Estímulos utilizando Reticulação Aquosa de Uma Etapa e Co-nanopolimerização

Aqui, apresentamos dois protocolos para incorporar reações de síntese proteica livre de células em matrizes de hidrogel em macroescala sem a necessidade de uma fase líquida externa.

Métodos para Incorporação de Reações de Síntese Proteica Livre de Células em Hidrogéis em Macroescala

A fabricação de um dispositivo de bicamada à base de polidimetilsiloxano (PDMS) para a produção de bibliotecas combinatórias em emulsões de água em óleo (plugs) é apresentada aqui. O hardware e o software necessários para automatizar a produção de plugues são detalhados no protocolo, e a produção de uma biblioteca quantitativa de plugues fluorescentes também é demonstrada.

Dispositivo microfluídico bicamada para produção de plugue combinatório

Aprenda a síntese combinatória de filmes e nanopartículas de polianidrida biodegradável com detecção de liberação de proteínas em alta vazão. Este método acelera o desenvolvimento de biomateriais para liberação controlada de fármacos.

Síntese combinatória de alta capacidade e liberação de proteínas a partir de polímero de Cinema e Bibliotecas Nanopartículas

Explorar mais vídeos