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DOI: 10.3791/51359-v
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Para entender a estrutura das redes neuronais, caracterização funcional e morfológica de neurônios individuais é uma necessidade. Aqui, nós demonstramos rotulagem juxtasomal biocitina, que permite que registros eletrofisiológicos na configuração extracelular, mas mantendo a capacidade de rotular intracelular do neurônio para a reconstrução post hoc de dendrítica e arquitetura axonal.
O objetivo geral deste procedimento é vincular o potencial de ação específico do tipo de célula no córtex sensorial durante o processamento de informações à identidade morfológica dos neurônios registrados. Isso é feito primeiro preparando cirurgicamente o rato para gravações justassomais. Uma vez preparado, um eletrodo registra a atividade espontânea e sensorial de pico evocado, e o neurônio registrado é carregado com biocidina usando corrente e injeções.
Depois, o cérebro é processado para coloração de biotina. Finalmente, o neurônio preenchido com biotina é reconstruído digitalmente a partir de seções subsequentes para classificação do tipo de célula. Em última análise, os registros justos de neurônios individuais permitem o estudo do processamento sensorial e da informação estrutural dentro da rede cortical.
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