Isolamento de RNA Rato Pâncreas: Um tecido rico em Ribonuclease

O objetivo geral deste procedimento é isolar o RNA com alta integridade do pâncreas de camundongo com crista de ribonuclease. Isso é feito removendo rapidamente o pâncreas da carcaça de um camundongo sacrificado. Em seguida, o pâncreas submergiu em reagente de lise e o tecido é homogeneizado.

Após a centrifugação, o RNA é isolado do sobrenadante usando protocolos padrão e a solução inibidora de RNAs é adicionada à solução final de RNA. A etapa final é limpar cuidadosamente as lâminas do homogeneizador, removendo quaisquer pedaços de tecido presos nas lâminas e, em seguida, realizando uma série de lavagens com etanol e água. Em última análise, este procedimento permite o isolamento de RNA para pâncreas de camundongo com um número de integridade de RNA maior que sete para ser usado para análise de expressão gênica de rotina.