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DOI: 10.3791/52643-v
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This article describes a method for the quick, efficient, and inexpensive preparation of polyacrylamide gels in a multiwell plate format. The technique is accessible to any research laboratory and is particularly beneficial for studies on stiffness-dependent cell responses.
Aqui, é descrito um método que permite a preparação rápida, eficiente e barata de géis de poliacrilamida em um formato de placa multipoços. O método não requer nenhum equipamento especializado e pode ser facilmente adotado por qualquer laboratório de pesquisa. Seria particularmente útil em pesquisas focadas na compreensão das respostas celulares dependentes da rigidez.
O objetivo geral deste procedimento é permitir uma preparação rápida, eficiente e barata de géis de poliacrilamida em um formato de placa de vários poços. Isso é feito primeiro imprensando, a solução precursora de gel entre uma placa de vidro revestida hidrofóbica e um suporte de plástico flexível adesivo de acrilamida. O segundo passo é retirar o gel da placa de vidro, que se prendeu covalentemente ao suporte de plástico flexível após a polimerização e deixá-lo secar.
Em seguida, o gel seco e o suporte de plástico flexível subjacente são cortados nas formas desejadas e colados com o lado do plástico no fundo do poço de uma placa de vários poços ou qualquer outro recipiente de cultura de células. A etapa final é revestir os géis de poliacrilamida montados em placas de vários poços com um revestimento adesivo celular, como uma monocamada de colágeno tipo um. Em última análise, a microscopia, bem como outras técnicas de caracterização celular, são usadas para observar o efeito do substrato de poliacrilamida subjacente.
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