Observando mitótico Division e Dinâmica em um embrião de peixe-zebra ao vivo

O objetivo geral deste procedimento é monitorar a fidelidade da segregação cromossômica durante a mitose em um embrião vivo de peixe-zebra usando cromatina marcada com fluorescência e proteínas da membrana celular que serão capturadas usando microscopia confocal de alta resolução. Este método pode ajudar a responder a questões-chave no campo da mitose, como como os defeitos mitóticos resultam em um defeito de desenvolvimento ou formação de tumor em um organismo vertebrado vivo? A principal vantagem desta técnica é que estamos observando mitose em um organismo vertebrado vivo que permite a coleta de dados fisiologicamente relevantes.

Depois de criar peixes-zebra adultos e injetar ovos com H2A. F/Z-EGFP e/ou pCS2 mCherry-CAAX RNA, aproximadamente duas horas antes da imagem, use um microscópio de dissecação fluorescente para identificar embriões GFP-positivos. Transfira embriões verdes brilhantes que expressam GFP para uma nova placa de Petri de 100 por 15 milímetros com meio azul E3.