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DOI: 10.3791/56069-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol describes a high-throughput methodology to functionally screen for protein-based inheritance in S. cerevisiae. The method aims to identify proteins that can induce a lasting phenotypic memory, providing insights into protein-based inheritance mechanisms.
Este protocolo descreve uma metodologia de alta produtividade para a tela funcionalmente para herança à base de proteínas no S. cerevisiae.
O objetivo geral desta fenotipagem de levedura de alto rendimento é rastrear proteínas que ilícitas uma memória fenotípica duradoura de expressão passada, como um proxy para a herança baseada em proteínas. Este método pode ajudar a responder a perguntas-chave no campo do príon de levedura, como, por exemplo, quantas proteínas podem herança ilícita desse tipo. A principal vantagem dessa técnica é que você pode rastrear muitas proteínas e vias de maneira imparcial.
Inicie este procedimento cultivando as células de levedura apropriadas em uma placa de 96 poços a 30 graus Celsius, conforme descrito no protocolo de texto. Inspecione visualmente as culturas para confirmar se as culturas estão saturadas, as células devem ser visíveis a olho nu, no fundo de cada poço. Use um robô de manuseio de líquidos para preparar placas de 384 poços, contendo 45 microlitros do meio apropriado por poço.
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