Caracterizando a migração celular no tridimensional em Vitro ferida ambientes

O objetivo geral deste procedimento é observar o efeito de tratamentos específicos de interesse na migração celular em um andaime de fibrina associado a uma ferida tridimensional. Este método pode ajudar a responder a questões-chave no campo da cicatrização de feridas, sobre como as alterações na estrutura da rede de fibras influenciam a migração celular e para coágulos de fibrina nos locais da ferida, a principal vantagem desta técnica é que ela fornece um método simples e reprodutível para analisar a migração celular dentro de coágulos de fibrina em 3D. Geralmente, os indivíduos novos neste método terão dificuldades porque a transferência dos esferóides pode ser difícil.

Comece aquecendo um frasco de fibroblasto dérmico humano neonatal congelado em banho-maria a 37 graus Celsius. Quando as células estiverem descongeladas, colete-as por centrifugação e ressuspenda o pellet em meio de fibroblastos dérmicos humanos neonatais frescos a 1 x 10 elevado à concentração de 6 células por mililitro. Em seguida, semeie as células em um frasco de cultura T75 para uma incubação de 72 horas a 37 graus Celsius e 5% de dióxido de carbono.