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DOI: 10.3791/57149-v
Akihiro Isomura1,2, Ryoichiro Kageyama1,3,4,5
1Institute for Frontier Life and Medical Sciences,Kyoto University, 2Japan Science and Technology Agency,PRESTO, 3Institute for Integrated Cell-Material Sciences,Kyoto University, 4Graduate School of Medicine,Kyoto University, 5Graduate School of Biostudies,Kyoto University
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This article presents a protocol for analyzing cell-to-cell transfer of oscillatory information using optogenetic control and live monitoring of gene expression. The method allows for precise control and observation of gene expression dynamics, providing insights into cellular communication.
Aqui, apresentamos um protocolo para analisar a transferência de célula a célula de informação oscilatória pelo controle de optogenetic e viver monitoramento da expressão do gene. Essa abordagem fornece uma plataforma única para testar um significado funcional dos programas de expressão do gene dinâmico em sistemas multicelulares.
O objetivo geral deste experimento é observar a transferência de informações oscilatórias célula a célula por controle optogenético e monitoramento ao vivo da expressão gênica. Este método pode ajudar a responder a questões-chave de como as células se comunicam umas com as outras através da via de sinalização Notch, particularmente de como as células transmitem as informações oscilatórias umas às outras. A principal vantagem dessa técnica é que podemos controlar e monitorar a dinâmica da expressão gênica com altíssima precisão.
Demonstrando o procedimento estará Akihiro Isomura, um pesquisador do meu laboratório que desenvolveu essa nova tecnologia. Para transfectar vetores de plasmídeo de módulos optogenéticos baseados em Tol2 junto com o vetor de expressão da transposase em células C2C12, primeiro conte as células tripsinizadas com um contador de células. Placa de 50.000 células C2C12 por poço em uma placa de 12 poços um dia antes da transfecção.
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