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Fluxo de trabalho de "captura de superfície celular" para quantificação sem rótulo do proteoma da...
Fluxo de trabalho de "captura de superfície celular" para quantificação sem rótulo do proteoma da...
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JoVE Journal Biochemistry
“Cell Surface Capture” Workflow for Label-Free Quantification of the Cell Surface Proteome

Fluxo de trabalho de "captura de superfície celular" para quantificação sem rótulo do proteoma da superfície celular

Full Text
3,194 Views
06:31 min
March 24, 2023

DOI: 10.3791/64952-v

Akul Naik1, Sanjeeva Srivastava1,2, Arun P. Wiita1,3,4

1Department of Laboratory Medicine,University of California, San Francisco, 2Department of Biosciences and Bioengineering,Indian Institute of Technology Bombay, 3Deptartment of Bioengineering and Therapeutic Sciences,University of California, San Francisco, 4Chan Zuckerberg Biohub

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Aqui, descrevemos um fluxo de trabalho proteômico para caracterização do proteoma da superfície celular de vários tipos de células. Esse fluxo de trabalho inclui enriquecimento de proteínas de superfície celular, preparação subsequente de amostras, análise usando uma plataforma LC-MS/MS e processamento de dados com software especializado.

Este protocolo nos permite investigar antígenos presentes na superfície celular de vários tipos de células para encontrar antígenos específicos para esse tipo de célula ou tecido. A técnica que apresentamos aqui permite o enriquecimento de proteínas da membrana celular a partir de um lisado celular inteiro, em última análise, para análise por proteômica baseada em espectrometria de massa. Portanto, uma aplicação específica deste protocolo é aplicá-lo a células tumorais para procurar antígenos presentes na superfície dessas células cancerígenas e não células normais que possam servir como novos alvos para imunoterapias contra o câncer.

Uma coisa a observar sobre este protocolo é que pode ser importante otimizar sua entrada de amostra para o experimento de interesse. Portanto, pode levar várias iterações ou titulações para encontrar as condições ideais. Portanto, demonstrando o procedimento estará Akul Naik, um especialista júnior de nosso laboratório.

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