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Um sistema de expressão dupla baseado em complementação GFP para avaliar o contato célula-célula ...
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JoVE Journal Developmental Biology
A GFP Complementation-based Dual-expression System for Assessing Cell-Cell Contact Mediated by Cytonemes in Live Drosophila Wing Imaginal Discs

Um sistema de expressão dupla baseado em complementação GFP para avaliar o contato célula-célula mediado por citonemas em discos imaginais de asas de Drosophila vivas

Full Text
660 Views
07:26 min
August 22, 2025

DOI: 10.3791/68411-v

Mathieu Joseph1,2, David R. Hipfner1,2,3

1Institut de recherches cliniques de Montréal (IRCM), 2Programmes de biologie moléculaire,Université de Montréal, 3Département de Médecine,Université de Montréal

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Descrevemos um protocolo para medir contatos entre células em camadas epiteliais adjacentes em discos imaginários de asas de Drosophila vivos usando uma abordagem baseada em reconstituição GFP.

Portanto, nossa pesquisa se concentra em entender como as células localizadas distantes nos tecidos se comunicam umas com as outras. Estamos usando o disco imaginário da asa de Drosophila como um sistema modelo para tentar entender como a citidina é formada, como funciona e qual o papel que desempenha no controle local do crescimento do tecido. Estudos sugerem que os fatores de crescimento estão frequentemente viajando através de projeções celulares especializadas, como filopódios de sinalização baseados em actina, chamados citonemas, para serem entregues às células-alvo.

Os citonemas são estruturas muito finas e frágeis que são facilmente interrompidas pelo protocolo de fixação. Para observá-los, você precisa usar abordagens de imagem ao vivo dedicadas com proteína marcada com fluorescência expressa. Isso limita muito a ferramenta e as abordagens que podemos usar para investigá-los.

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