Uma técnica rápida para a visualização de células vivas de levedura Imobilizado
November 9th, 2006
Uma técnica rápida para a visualização do crescimento de células de levedura imobilizadas, aqui aplicado a repórteres fluorescentes no silêncio de acasalamento loci HML e HMR
O objetivo do experimento é ser capaz de acompanhar uma população de células sob o microscópio para que eu possa ver como os estados epigenéticos mudam com que frequência os estados epigênicos mudam com cada um, com cada divisão sucessiva das células, pegue uma longa lamínula, pegue cerca de sete microlitros de células, Coloque na lamínula longa e use uma COM, uma placa de mídia sintética. Pegue uma lâmina de barbear e faça cortes no ágar. Então pegue um bloco de ágar, levante-o e coloque sobre as células.
Ok, para experimentos de curto prazo, até três horas. Isso por si só é bom. As células serão imobilizadas para experimentos de longo prazo, adiciono meio líquido li ao topo da almofada de ágar e, em seguida, coloco uma lâmina de vidro por cima de tudo.
A mídia nos fornecerá como um selo entre os dois. O, o slide é apenas para evitar a evaporação do topo do bloco de ágar. Portanto, com essa configuração, o bloco de egger permanecerá úmido e as células continuarão se dividindo por até oito, pelo menos até oito horas.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Visão Geral
Este artigo apresenta uma técnica rápida para visualizar células de levedura imobilizadas, focando em repórteres fluorescentes nos loci de acasalamento silenciosos HML e HMR. O método permite a observação de mudanças no estado epigenético durante a divisão celular.
Componentes Principais do Estudo
Área da Ciência
- Biologia Celular
- Epigenética
- Fisiologia Microbiana
Fundamento
- Entender as mudanças epigenéticas nas células de levedura é crucial para insights sobre o comportamento celular.
- Repórteres fluorescentes podem visualizar efetivamente os loci genéticos.
- Técnicas de imobilização são essenciais para observação de longo prazo sob um microscópio.
- A levedura serve como um organismo modelo para estudar processos genéticos e epigenéticos.
Propósito do Estudo
- Visualizar o crescimento e divisão de células de levedura imobilizadas.
- Monitorar mudanças nos estados epigenéticos durante a divisão celular.
- Desenvolver um método que facilite experimentos de curto e longo prazo.
Métodos Utilizados
- Preparação de um slide longo com um volume específico de células de levedura.
- Utilização de placas de mídia sintética para o crescimento celular.
- Imobilização das células usando blocos de ágar para observação.
- Aplicação de meio líquido para durações experimentais estendidas.
Principais Resultados
- Visualização bem-sucedida do crescimento e divisão das células de levedura.
- Observação de mudanças no estado epigenético ao longo de divisões sucessivas.
- Demonstração da eficácia da técnica de imobilização.
- Insights sobre a dinâmica das mudanças epigenéticas na levedura.
Conclusões
- A técnica fornece um método confiável para estudar o comportamento das células de levedura.
- Repórteres fluorescentes são eficazes para monitorar loci genéticos.
- Esta abordagem pode melhorar a compreensão da regulação epigenética nas células.
