Ультраструктурный анализ среза мозга мыши с помощью просвечивающей электронной микроскопии
Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 2:53 мин. • April 28th, 2025
Возьмем фиксированный тетраоксидом осмия участок мозга мыши, встроенный в смоляной блок.
Получите изображение разреза и совместите его с заранее подготовленным изображением атласа, чтобы определить интересующую область.
Отметьте границы этого региона на блоке.
Нагрейте смолу, чтобы размягчить ее, и вырежьте отмеченный участок.
Приклейте образец к стеклянной стойке и обрежьте ее.
С помощью ультрамикротома подготовьте полутонкие и ультратонкие срезы.
Перенесите полутонкие и ультратонкие срезы на стеклянные носители и никелевые решетки соответственно.
Окрасьте полутонкие срезы красителем, который связывается с нуклеиновыми кислотами, богатой рибосомами цитоплазмой и внеклеточным матриксом.
Промойте срезы и рассмотрите их под световым микроскопом, чтобы подтвердить наличие целевой области.
Наблюдайте за ультратонкими срезами под просвечивающим электронным микроскопом.
Тетраоксид осмия повышает электронную плотность клеточных и органелльных мембран, обеспечивая высокий контраст на фоне менее электронно-плотной цитоплазмы, что позволяет визуализировать клеточную ультраструктуру.
Чтобы нанести на карту область интереса, выберите снимок, содержащий область интереса, из ранее подготовленного атласа и
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео