Разработка микротканеинженерной нейронной сети с использованием микроколонки на основе гидрогеля

Начните с чашки, содержащей микроколонку. Микроколонка имеет гидрогелевую внешнюю оболочку и внеклеточный матрикс, или ядро ВКМ.

Добавьте капли питательной среды в ту же посуду.

Перенесите агрегаты нейронных клеток в чашку, затем поместите их в одну из средних капель.

Наблюдайте под стереомикроскопом и вставляйте клеточные агрегаты на обоих концах микроколонки.

Затем перенесите засеянный микростолбик в среду для клеточной жизнеспособности.

Инкубируйте для присоединения клетки к ВКМ.

С помощью стереомикроскопа подтвердите прикрепление клеток. Затем добавьте питательную среду, чтобы накрыть чашку, и инкубируйте.

Прикрепленные нейроны начинают расширять свои аксоны через ВКМ.

Регулярно заменяйте полусреду свежей средой для поддержания уровня питательных веществ.

Со временем аксоны разрастаются и охватывают всю длину микроколонки, образуя нейронные сети.

Разработанная микротканевая нейронная сеть готова к реконструкции поврежденной нейронной схемы.

Приступайте к посеву клеток сразу после инкубации. Перенесите примерно от 10 до 20 микролитров питательной среды в две свободные области в чашках Петри, где находятся микроколонны. С помощью микропипетки соберите нейронные агрегаты по отдельности и пе