Administración de compuestos

Lab Animal Research
 

Overview

Fuente: Kay Stewart, RVT, RLATG, CMAR; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. Universidad de Notre Dame, en

como muchos protocolos de investigación requieren que una sustancia se inyecta en un animal, debe determinarse con precisión la ruta de entrega y la cantidad de la sustancia. Hay varias vías de administración disponibles en el ratón y la rata. Que ruta usar está determinada por varios factores de la sustancia que se inyecta: el pH de la solución, el volumen requerido para la dosis deseada y la viscosidad de la solución. Daño tisular severa puede ocurrir si una sustancia se administra incorrectamente. Este video se ve en los diversos métodos de sujeción y detalles técnicos para los más de uso general rutas inyección.

Cite this Video

JoVE Science Education Database. Fundamentos de la investigación de animales de laboratorio. Administración de compuestos. JoVE, Cambridge, MA, (2017).

Principles

como muchos de los compuestos de prueba que se utilizan en la investigación biomédica son sustancias nuevas que no están comercialmente disponibles, preparación de la sustancia apropiada es vital. Preocupaciones fundamentales de esterilidad, viscosidad y compatibilidad fisiológica de la formulación de la sustancia de ensayo y el medio- o vehículo en que se disolvió/suspendido deben abordarse. Una solución de dosificación, si por vía enteral o parenteral, debe ser fisiológicamente tamponada para el pH correcto para el compuesto para ser correctamente absorbida y para prevenir la lesión del tejido. La viscosidad de una solución puede ser el factor determinante de la ruta de la inyección. Una sustancia que es demasiado gruesa para pasar a través de la aguja de calibre pequeño para los sitios de inyección utilizadas en un ratón puede requerir la reformulación para administración oral. Todas las soluciones a inyectar por vía parenteral deben ser estériles para prevenir la introducción de patógenos en el animal. 1

selección de agujas para las inyecciones se basa en la vía de administración, la viscosidad de la solución y el tamaño del animal. En general, el calibre más pequeño posible para administrar la solución debe ser elegido; Esto es generalmente calibre 22-30 en el ratón y calibre de 20-25 para la rata. La jeringa para ser seleccionado es otra vez el más pequeño posible con las graduaciones correcta necesaria para la dosificación exacta. 2,3,4

hay varias rutas para las inyecciones parenterales. Con el propósito de este video, se discuten las rutas más utilizadas (subcutáneo [SQ], intraperitoneal [IP], intravenosa [IV] y intramuscular [IM]). Otras técnicas de inyección, como la intradérmica (ID), intracraneal, intracardiaco, las inyecciones de bandolero, intranasales o intravenosas vía el plexo retro orbital están cubiertas en un video diferente.

la velocidad de absorción de compuestos varía según la ruta. La ruta IV coloca la sustancia directamente en el torrente sanguíneo, eliminando cualquier tiempo necesario para la absorción. Una sustancia que inyectada IM se absorbe rápidamente debido a la abundante cantidad de vasos dentro del tejido muscular. Aunque una inyección del IP se considera la administración parenteral, el mecanismo de absorción es más similar con la dosis oral. Dosis subcutánea es una forma conveniente de administrar un gran volumen de líquido. La velocidad de absorción es más lenta que otras rutas, proporcionando un efecto sostenido. La elección de la ruta es un componente esencial del protocolo experimental. 4

subcutánea coloca los materiales entre las capas de la piel y el músculo en un espacio virtual creado por elevación de la piel. Esto permite la inyección segura de grandes volúmenes, ya que el líquido se absorbe lentamente y el exceso de líquido se excreta rápidamente por los riñones. Esto evita la sobrecarga de líquidos y edema pulmonar, que puede ser resultado de grandes volúmenes se inyecta por vía intravenosa. La aguja seleccionada debe ser la posible más pequeño de tamaño que permita la viscosidad del material inyectado, generalmente un 22-30 medidor de aguja para los ratones y un 22-25 calibre aguja para las ratas. Volúmenes de inyección oscilan 0,1 ml a 0,5 ml para los ratones y 0,1 ml a 1,0 ml para las ratas, por sitio de inyección.

ruta de IP es muy frecuente en roedores ya que puede utilizarse para la entrega de volúmenes más grandes que una vía IV o IM. Sin embargo, la absorción del material administrado IP es significativamente más lento que un IM o IV de la ruta. Sustancias administradas con este método se piensan para ser sometido a metabolismo hepático antes de entrar en el torrente sanguíneo. 5 Una vez más, la aguja seleccionada debe ser la posible más pequeño de tamaño que permita la viscosidad del material inyectado, generalmente un 22-30 medidor de aguja para los ratones y un 22-25 calibre aguja para las ratas. Para los ratones, gama de volúmenes de inyección de 0,05 ml a 1,0 ml por inyección en función del tamaño del ratón. Para las ratas, el rango es de 0,1 ml a 1,5 ml por sitio de inyección.

las inyecciones IM, aunque usados comúnmente en animales más grandes, tienen usos mínima en ratones y ratas debido a su pequeña masa muscular. Inyección incorrecta o repetida en el músculo puede causar daño del nervio dando por resultado parálisis o músculo necrosis. La aguja seleccionada debe ser la posible más pequeño de tamaño que permita la viscosidad del material inyectado, generalmente de calibre 27-30. Para los ratones, gama de volúmenes de inyección de 0.01 ml hasta un máximo de 0,05 ml por sitio de inyección para el músculo glúteo. Los volúmenes de inyección para el gastrocnemio tienen un máximo de 0,05 ml. En cambio, la rata gama de volúmenes de inyección de 0.01 ml hasta un máximo de 0,3 ml por sitio de inyección para el músculo glúteo. Los volúmenes de inyección para el gastrocnemio tienen un máximo de 0,1 ml.

inyección IV es la vía más eficaz de administración de la sustancia, ya que se introduce inmediatamente en el sistema circulatorio. Sin embargo, con los vasos de menor tamaño disponibles IV dosis en el ratón, su utilidad es limitada. Si se requiere la administración intravenosa, se debe considerar el uso de puertos de acceso vascular o de otros equipos dosificadores especializada para el bienestar de los animales. La aguja seleccionada debe ser la posible más pequeño de tamaño que permita la viscosidad del material inyectado, generalmente de calibre 27-30. Gama de volúmenes de inyección de 0,05 ml para un máximo de 0,5 ml por inyección, en función del tamaño del ratón.

ruta ratón rata
aguja calibre (g) Volumen de inyección (mL) aguja calibre (g) volumen de inyección (mL)
SC 22 – 30 0.1 – 1.5 22 – 25 0.1 – 3.0
IP 22 – 30 0.05 – 1.0 20 – 25 0.1 – 1.5
IM 27 – 30 0.01 – 0.05 (glútea/gastrocnemio) 25 – 27 0,01-0,3 (glúteos)

0.01-0.1 (gastrocnemio)

IV 27 – 30 0 .05 – 0.5 22 – 25 0.05 – 4.0

tabla 1. Apropiada de la aguja calibre inyección volumen gama y para ratones y ratas dependiendo de la ruta.

Procedure

1. inyección subcutánea

  1. refrena el ratón mediante la sujeción con una mano sostenga manualmente. Una vez entendido, permite el ratón para descansar sobre una mesa u otra superficie segura. Asegúrese de evitar la presión sobre el cuerpo del ratón.
  2. Descansar el talón de la mano sobre la mesa para evitar excesiva peso en el ratón que puede dificultar la respiración. Ratones pueden también ser asegurados en un dispositivo comercial. Para las ratas, es mejor usar un dispositivo de restricción comercial.
  3. Agarrar la piel y tire hacia arriba para crear una tienda de la piel. Si utiliza un dispositivo de sujeción, pinzas se requiera captar la piel a través de la ranura en la parte superior.
  4. Insertar la aguja paralela a la columna vertebral, dirigida a la cabeza en la base de la doblez de la piel de la tienda. Dirigir la aguja de la cabeza para evitar la posibilidad de pinchazos en el cráneo, como el hueso del cráneo del ratón es muy delgado. Las ratas tienen la tendencia a la parte trasera de su cabeza, que podría causar la inyección para colocarse en los músculos del cuello.
  5. Coloque el bisel de la aguja hacia arriba para permitir un deslizamiento suave en la piel. Tenga en cuenta que se inserta la aguja por debajo de los dedos sujetando la piel. Para mejorar la seguridad cuando fuesen artículos de inyección, la piel está agarrada con pinzas, eliminando así la posibilidad de lesiones accidentales de aguja.
  6. Tire hacia atrás el émbolo para verificar la colocación correcta. Si el aire es aspirado en la jeringa, indica que la punta de la aguja no se coloca debajo de la piel y tendrá que ser retirado y colocado de nuevo. Si hay presión cuando el émbolo se jala hacia atrás, indica la colocación correcta de la aguja y la inyección puede proceder.
  7. Inyectar la sustancia lentamente con un movimiento constante. Para evitar la pérdida del artículo inyección, hacer una pausa después de la inyección, gire ligeramente la aguja bajo la piel y pellizcar la piel en el sitio de la inyección mientras retira la aguja.

Figure 1
figura 1. La inyección subcutánea en los ratones.

2. inyección intraperitoneal

  1. el método de sujeción manual con una sola mano se utiliza para esta técnica de inyección en ratones. Ajustar la mano que quede colocado lo suficientemente alta en el cuello para evitar que gire el ratón.
  2. Agarre la piel floja en la nuca del cuello entre el pulgar y el dedo índice.
  3. Estabilizar los cuartos traseros, ya sea fijando la piel a lo largo de la parte posterior entre el segundo, tercero y cuarto dedos y la base del pulgar, o colocando la cola entre los dedos terceros y cuarto.
  4. Inyección de
  5. IP en la rata requiere dos personas, uno para sujetar la rata y el otro para realizar la inyección.
    1. Alcance la rata sobre los hombros usando el dedo índice y medio a cada lado del cuello y la palma en la parte posterior. El pulgar y los dedos terceros y cuarto deben rodear el pecho para evitar el movimiento hacia adelante o hacia atrás. La posición de los dedos a cada lado del cuello evita que la rata de girar su cabeza.
    2. La rata de levantar y girar para dejar expuesto el abdomen ventral.
    3. Estabilizar los cuartos traseros sujetando los pies y la cola bien y extiende lejos del cuerpo.
  6. Coloque el ratón o rata para exponer el abdomen, asegurando que se enfrenta a hacia arriba.
  7. El animal de la inclinación con la cabeza hacia abajo en un ángulo 30°, para permitir que los intestinos a caer hacia adelante.
  8. Lugares de inyección son los siguientes:
    1. el área a inyectar cranially está rodeado de una línea imaginaria que se extiende horizontalmente por todo el cuerpo en la parte superior de la cadera (de flanco a flanco).
    2. La línea media es la frontera intermedia, reconocida como donde se encuentra con pelo que crece en direcciones opuestas. En los animales sin pelo, la línea media se extiende en línea recta desde el xifoides hasta el ano.
    3. La frontera lateral es una línea desde la parte superior de la cadera para el prepucio en el varón y desde la parte superior de la cadera y los pezones en la mujer.
    4. Esto proporciona un área triangular de inyección segura.
  9. La inyección de un artículo dentro de los hitos
    1. insertar una aguja perpendicular a la columna vertebral, de la línea media, en el triángulo como se describió anteriormente. Colocar la aguja en un ángulo de 90° respecto al plano del cuerpo permite inyecciones seguras utilizando ambos lados del abdomen. Esto es especialmente importante con múltiples inyecciones, ya que minimiza el trauma tisular permitiendo la alternancia de sitios de inyección.
    2. Cuando la aguja se coloca en un ángulo de 90°, lo hará " pop " en el abdomen, lo que permite más fácil determinación de la profundidad. Esto también es una referencia visual y táctil que la aguja esté bien colocada.
    3. Aspirar la jeringa para asegurar la colocación dentro de la cavidad peritoneal y no dentro de la vejiga urinaria, intestino o estructuras vasculares.
    4. Evitar inyectar caudalmente en el ratón macho para evitar administrar el artículo en el saco escrotal. Evitar inyectar en la teta de la hembra para evitar trauma.

Figure 2
figura 2. Los lugares para inyección intraperitoneal en ratones.

3. inyección intramuscular

  1. restricción de esta técnica para ratones y ratas requiere dos personas o el uso de un tubo de sujeción. Se describe aquí es un método de una sola persona utilizando un dispositivo de restricción.
    1. Coloque el animal en el dispositivo de seguridad.
    2. Una vez que el animal está en el tubo, sujete la cola para colocar el animal con las patas traseras del tubo.
    3. Agarre la piel del flanco en la porción craneal del fémur para extender la pierna y evitar que la rodilla flexión.
    4. Colocar el dispositivo de sujeción para que está parado sobre la mesa con el animal ' cabeza apuntando hacia abajo, o acostado sobre la mesa apuntando hacia el cuerpo del técnico para permitir la estabilización del dispositivo mientras se realiza la inyección.
    5. Lugares de inyección es las siguientes: pierna el ratón y la rata son pequeños con los músculos glúteos (los músculos caudales del muslo) que comprende la mayor masa muscular en las extremidades, la segunda mayor masa muscular en las extremidades es el gastrocnemio (músculo del becerro). La inyección se realiza desde el aspecto caudal de la pierna.
      1. Localizar el glúteo músculo masa posterior en el fémur. Puede ser palpated el hueso y el músculo grande se siente fácilmente.
      2. Nota que la línea media de la pierna de la cara posterior del punto del corvejón a la cola. El pelo tiene a menudo una cresta donde viene junto, como crece en direcciones opuestas de las superficies lateral e interiores.
      3. Las inyecciones de
      4. se hacen hacia el aspecto lateral del muslo de la línea media. Esto reduce la probabilidad de dañar los nervios y los vasos sanguíneos situados en la superficie medial de la Leg
      5. Las inyecciones en el gastrocnemio se realizan desde la cara posterior y con la consideración cuidadosa de la localización de la vena safena lateral.
    6. La inyección de un artículo dentro de los hitos
      1. Insertar la aguja perpendicular al fémur fuera de la línea media, como se describe anteriormente, a una profundidad máxima de 5 mm para el músculo glúteo y un máximo de 3 mm para el gastrocnemio.
      2. Para evitar traumatismo en el músculo, el extraño movimiento de la aguja en el tejido debe ser prevenido. La jeringa debe celebrarse de una manera que no es necesario cambiar la posición de la mano para realizar la inyección.
      3. Aspirar la jeringa para asegurar la colocación dentro del músculo y no en un vaso sanguíneo.
      4. Inyectar el material en un movimiento fluido y constante. No se inyecte rápidamente tal que permita la expansión lenta del músculo. Inyección rápida puede causar trauma de tejido.

Figure 3
figura 3. La inyección intramuscular en el músculo glúteo en ratas.

4. inyección intravenosa utilizando la vena de la cola

  1. sujeción del animal es dependiente sobre si el animal está anestesiado o despierto. Animales
    1. uso un tubo de sujeción cilíndrico para conscientes ratones o ratas, excepto sin pelo o desnudo. Debido a la naturaleza grasa de los animales sin pelo, es difícil de colocar y quitar de las restrainers acrílico, ya que su piel tiende a adherirse al plástico rígido. Por lo tanto, se utiliza un cono de plástico flexible.
    2. Otros dispositivos de inyección incluyen plataformas iluminadas, climatizadas plataformas y conos de plástico rígidos donde el ratón se mantiene en el cono estrictamente con la tensión en la cola.
    3. Anesthetized ratones pueden no necesitar seguridad.
    4. Caliente el cuerpo entero o sólo la cola para la vasodilatación de los vasos de la cola.
      1. Caliente todo el cuerpo con una almohadilla de calefacción eléctrica en media o una manta de agua circulante con.
      2. Colocar el animal en el dispositivo de sujeción, envuelto en la fuente de calor.
      3. Observar de cerca el animal y retire de la fuente de calor tan pronto como se dilatan los vasos sanguíneos. Calentamiento de cuerpo entero también puede lograrse con el uso de una lámpara de calor dirigido en una jaula. Cuando se utiliza una lámpara de calor los animales estrechamente respete, ya que es fácil sobrecalentarlos.
      4. Al calentamiento de cuerpo entero no es factible, la cola solo la calefacción se logra utilizando compresas calientes de un calentador de toallas, botella de agua caliente, o sumergir la cola en agua caliente. PRECAUCIÓN debe ser empleada para evitar que se queme la cola porque el agua caliente, caliente toallas y bolsas de agua caliente no tienen controles de temperatura. Es común que las fuentes de calor que se sobrecalienta inicialmente. Estas fuentes de calor también enfríen rápidamente.
    5. El uso de aceite de tejido es otra forma de mejorar la visualización de los vasos.
      1. Sumergir un aplicador con punta de algodón en el aceite del tejido y el pozo de petróleo de la porción de la cola que se apoderó de estabilización se aplica. El aceite del tejido hace que los vasos que aparecen más claramente definidos.
      2. Allí es aceites no tóxicos comercialmente disponibles que contienen un producto químico en la formulación que genera calentamiento de la piel y vasodilatación con la evaporación. Estos aceites se aplican, y después de unos momentos, cuando los vasos son accesibles, el exceso de aceite es enjugado con una bola de algodón.
      3. Todos los aceites pueden dificultar la cola hacer.
      4. Uso de aceites, la inyección debe hacerse inmediatamente en la visualización de los vasos.
    6. Lugares de inyección son los siguientes:
      1. las venas laterales de la cola se encuentran en los lados de la cola. También hay barcos que recorren nuestra dorsal y ventral de la cola que no es adecuado para propósitos de la inyección.
      2. El animal en el limitador puede girarse para que las naves laterales son hacia arriba para facilitar la inyección. Por otra parte, la cola puede dar vuelta para traer los vasos en una posición más aceptable para la inyección.
      3. Los vasos son muy superficiales. Llegan a ser más superficiales que llegan a la base de la cola.
    7. Inyección de un artículo en la vena de la cola requiere habilidad. Para evitar traumatismos a los vasos sanguíneos, el extraño movimiento de la aguja debe evitarse. La jeringa se celebra de una manera que no es necesario cambiar la posición de la mano para realizar la inyección.
      1. Posición de la cola para que la nave es visible y sostenido bajo tensión. No aplique una tensión excesiva en la cola, o se puede estirar el vaso y el flujo de sangre disminuido.
      2. Colocar la aguja directamente sobre el recipiente hasta distal como sea posible.
      3. Aplique una ligera presión y deslice la aguja en el paralelo de cola a las vértebras. Evitar la pesca de la aguja hacia abajo, como la aguja transecto del buque. La aguja debe ser visible en el vaso como se es avanzado por lo menos 2 mm en el lumen.
      4. Inyectar el material en un movimiento lento y fluido para evitar la ruptura de la vasija.
      5. Prestar especial atención a la cola durante la inyección. Si correctamente en el recipiente, el material de la inyección que fluye en el recipiente se siente con ninguna resistencia. El vaso sanguíneo debe blanquear como la sangre es empujada hacia fuera por el material de inyección.
      6. Si la aguja no está en el recipiente, habrá fuerte resistencia al inyectar. Si inyectar con fuerza, el material llenará el espacio subcutáneo y la cola se globo. Parar inmediatamente, como un material diseñado para ser inyectado por vía intravenosa puede ser cáustico para los tejidos circundantes. Retire la aguja y trate de otra inyección más cranially en la cola.
      7. Después de la inyección acertada, retire la aguja y aplique presión en el sitio de la inyección para asegurar buena hemostasia antes de regresar el animal a la jaula.

Figure 4
figura 4. Inyección en la vena en los ratones de cola.

Administración compuesto suele ser un componente integral de un estudio en animales, y muchos factores deben evaluarse para asegurar que el compuesto sea entregado correctamente y de manera humana. Las dos vías de administración principales son enterales-través de la zona digestiva y parenteral fuera del tracto digestivo. La principal diferencia es, si el compuesto se administra por vía enteral se somete a metabolismo hepático antes de entrar en el torrente sanguíneo. Considerando que, por cualquier vía parenteral, intravenosa o intramuscular, la sustancia pasa este primer paso por el hígado, generalmente dando por resultado una biodisponibilidad más alta.

En este primer video de la serie de administración compuesta, a empezar por discutir los factores que afectan la elección de la vía de administración en general. Y luego Repasamos las inyecciones parenterales más comunes métodos, incluyendo subcutáneo abreviados como SC o SubQ, intraperitoneal o IP, intramuscular o IM y IV también conocido como intravenoso.

empecemos por revisar algunas cosas que uno debe tener en cuenta antes de preforma cualquier tipo de procedimiento de la administración compuesto. El primer paso es preparar la solución o suspensión que se inyecta, y la primera consideración fundamental para la preparación de la sustancia es esterilidad. Para evitar la introducción de patógenos en el animal, es importante que el material de inyección, así como las agujas y jeringas a utilizar estériles.

La segunda consideración es fisiológico compatiBility. Una solución de dosificación, si administrados por vía enteral o parenteral, debe ser fisiológicamente tamponada a pH adecuado para el compuesto para ser absorbido correctamente y para evitar la lesión del tejido. El tercer factor es la viscosidad del artículo de inyección, que juega un papel fundamental en la selección de la aguja. Generalmente, se utilizan agujas de calibre 20 a 30 en los procedimientos de administración parenteral para ratones y ratas. Los centros de estas agujas generalmente son color cifrado para la facilidad de identificación.

La solución debe tener la suficiente fluidez para pasar a través de al menos una de estas agujas. Si la solución puede pasar a través de más de uno, entonces, en general, la elección es el calibre más pequeño posible. El siguiente factor es volumen de administración que afecta a la jeringuilla de la selección. Similar a las agujas, la jeringa posible más pequeño necesaria para una dosificación exacta con graduaciones correcto, debe seleccionarse. El calibre de la aguja y el volumen de administración dependen también la ruta y las especies, tamaño y edad del animal se administra. Vea la tabla 1 a continuación para revisar los valores relacionados con las rutas que se discute en este video. La última consideración importante es la velocidad de absorción, que varía significativamente con cada vía de administración y puede jugar un papel en la selección del método más adecuado.

ahora, vamos a hablar de las características peculiares de los métodos de inyección habitualmente empleados.

SC o inyección de SubQ pone el material entre las capas de la piel y el músculo en un espacio virtual creado por elevación de la piel. Esto permite una inyección segura de grandes volúmenes, pero la velocidad de absorción es más lenta que otras rutas, proporcionando un efecto más sostenido. Durante la administración de IP, el compuesto se inyecta directamente en la cavidad peritoneal. Este es otro método común usado para entregar grandes volúmenes de solución. Aunque una inyección del IP se considera la administración parenteral, el mecanismo de absorción es más similar con la dosis oral.

Inyectable IM an entrega un compuesto directamente en los glúteos o del músculo gastrocnemio. Una sustancia que inyectada IM se absorbe rápidamente debido a la abundante cantidad de vasos dentro del tejido muscular, que podría hacer una ruta preferida en algunos casos. Inyección incorrecta o repetida en el músculo puede causar daño del nervio dando por resultado parálisis o músculo necrosis. Por último, una inyección IV en la vena de la cola de los animales es la vía más eficaz de administración, como la sustancia se introduce directamente en el sistema circulatorio. Tenga en cuenta que el compuesto debe ser inyectada en una de las venas de la cola caudal lateral ubicadas a los costados de la cola. Hay un barco que recorre la línea media ventral de la cola, que no es conveniente para propósitos de la inyección.

ahora que hemos discutido a fondo, vamos a aprender los procedimientos, a partir de las inyecciones SC. Para los ratones, escoger el animal por la cola y déjelo descansar en otro lugar seguro, como tapa de la barra de alambre. A continuación, manualmente refrenar el animal levantando la piel alrededor del cuello, formando una tienda de campaña. A continuación, establecer el animal sobre la mesa con los pies espaldos descansando en la superficie y descansar el talón de su mano sobre la mesa para evitar excesiva peso en el animal que puede comprometer la respiración.

Para inyectar, tomar la jeringa con la solución que se inyecta y dirigir el paralelo de la aguja y la espina dorsal de la cabeza para evitar la posibilidad de pinchazos en el cráneo. A continuación, inserte la aguja con el bisel hacia arriba, que permite un deslizamiento suave en la piel. Tire hacia atrás el émbolo para verificar la colocación de la aguja adecuada. Si hay contrapresión cuando el émbolo se jala hacia atrás, la aguja está en la posición correcta. Si el aire es aspirado en el émbolo, la aguja tendrá que cambiarse de lugar.

Después de confirmar que la aguja está en la posición correcta, inyecte lentamente con un movimiento constante. Pausa después de la inyección y girar la aguja ligeramente debajo de la piel para evitar la pérdida del artículo inyección. Luego, pellizcar la piel en el sitio de inyección y retire la aguja. Este mismo método puede utilizarse en ratas destetadas.

Para ratas adultas, en primer lugar el animal tiene restringida usando un dispositivo, el procedimiento que se explica en el video de "Conceptos básicos de manejo y moderación" de esta colección. Entonces, uno puede realizar la inyección SC de la misma manera como hizo en ratones.

a continuación, vamos a aprender cómo llevar a cabo una inyección de IP. En ratones, utilizan la técnica de moderación a dos manos para frenar manualmente el animal, que otra vez se describe en el video de "Conceptos básicos de manejo y moderación". Asegúrese de que su mano no dominante se coloca lo suficientemente alta en el cuello para evitar que el animal gire. Estabilizar los cuartos traseros colocando la cola entre los dedos terceros y cuarto o por fijación a la piel firmemente entre los dedos restantes y la base del pulgar.

a continuación, coloque el animal para dejar expuesto su abdomen. Incline el animal con la cabeza hacia abajo en un ángulo de 30° para permitir que los intestinos a caer hacia adelante. La señal de inyección puede esbozarse así: dibuja una línea imaginaria que se extiende horizontalmente a través del cuerpo, en la parte superior de la cadera, de flanco a flanco. Luego dibujar el borde medial o la línea media, a lo largo de la línea donde se encuentra con el pelo que crece en direcciones opuestas. Por último, imagina el borde lateral, que es una línea de la tapa las caderas en el prepucio en los machos y después los pezones en las hembras. Esto proporciona el área triangular para inyección IP segura.

el siguiente método que discutiremos es la inyección IM. Moderación en esta técnica para ratones y ratas requiere dos personas o el uso de un tubo de sujeción. Aquí, describimos el método de una persona utilizando un dispositivo que refrena.

En primer lugar, coloque el animal en el tubo y con las patas traseras hacia fuera, tire la cola a la posición del animal. A continuación, sujete la piel del flanco en la porción craneal del fémur para extender la pierna y evitar la rodilla de flexión. Luego, coloque el dispositivo de sujeción para permitir la visualización del sitio de inyección.

Para identificar la señal glútea, localizar el músculo glúteo masa posterior en el fémur. Puede ser palpated el hueso y el músculo grande se siente fácilmente. Tenga en cuenta la línea media que va desde el punto del corvejón hasta la cola. A menudo vemos la cresta donde confluyen el pelo de las superficies lateral e interiores crecen en direcciones opuestas. Por lo general, las inyecciones se realizan hacia al lateral el aspecto de la línea media. El gastrocnemio es el músculo de la pantorrilla y la inyección en este músculo también mejor se realiza desde la cara posterior.

Para el músculo glúteo, en el monumento situado, inserte la aguja a una profundidad de unos 5 mm. Evite colocar de nuevo la jeringa durante la inyección para prevenir el daño muscular. A continuación, aspirar para asegurar que la colocación es en el músculo, no de un vaso sanguíneo. Y por último, inyectar el material de manera lenta y constante, ya que la inyección rápida puede causar trauma tisular. Retire la aguja de forma perpendicular siguiendo la misma ruta que la de la inserción. Músculo gastrocnemio, inserte la aguja a una profundidad de 3 mm y realizar la inyección de la misma manera que el músculo glúteo.

por último, vamos a aprender a realizar una inyección IV en las venas de la cola de los roedores. El mismo método es apArá para ratones y ratas.

Coloque el animal en un tubo de sujeción cilíndrico y calentar todo el cuerpo del animal mediante el uso de una almohadilla de calefacción eléctrica establece en medio durante unos 2-5 minutos. Seguirá caliente del animal, hasta que se dilatan los vasos sanguíneos, que es perceptiblemente más grande. Recuerde, las venas laterales cola caudal se encuentran en los lados de la cola. La arteria que está en la línea media ventral no es adecuada para propósitos de la inyección. Gire el dispositivo de sujeción y colocar la cola que las venas laterales de la cola son hacia arriba y bajo tensión. No aplique una tensión excesiva o el recipiente puede ser estirado y el flujo de sangre disminuido.

Coloque la aguja bisel-para arriba directamente sobre el vaso sanguíneo distal como sea posible y aplique una ligera presión para deslizar la aguja hasta el paralelo de cola a la columna vertebral. Inyectar el material en un movimiento lento, fluido y notar que el buque palidece como sangre es empujada hacia fuera por el material de inyección. Si la aguja no está colocada correctamente en el recipiente, habrá fuerte resistencia al inyectar y si se inyecta con fuerza el material llenará el espacio subcutáneo y la cola se globo. Detener inmediatamente el material - que está diseñado para ser inyectado por vía intravenosa - sea cáustico para los tejidos circundantes. Retire la aguja e intentar otra inyección más cranially en la cola. Después de la inyección acertada, retire la aguja y aplique presión en el sitio de la inyección para asegurar buena hemostasia antes de regresar el animal a la jaula.

ahora que está familiarizado con los métodos de inyección común, vamos a ver algunas aplicaciones de estas vías de administración, que no sea el suministro de medicamentos.

En varios experimentos, los ratones se inyectan con un patógeno específico para el estudio de la infección. Aquí, los investigadores utilizaron la vía subcutánea para introducir las bacterias resistentes a los antibióticos que causa las lesiones, y el tamaño de estas lesiones sirvió como una lectura para la virulencia del patógeno. Varios científicos están interesados en estudiar la distribución y la supervivencia de las células madre después de la entrega sistémica. En este estudio, los investigadores realizaron cola inyección en la vena de etiquetado genéticamente las células madre neurales en un modelo animal de esclerosis múltiple y encuentra la distribución de las células inyectadas a la médula espinal y regiones del cerebro.

En otro experimento, los investigadores inyectados fluorescencia etiquetada mioblastos por vía intramuscular en un modelo animal de la distrofia muscular. A continuación, bioluminiscencia fue realizado para analizar el éxito de la implantación de las células madre. Por último, las inyecciones también pueden utilizarse para generar modelos animales. Estos científicos realizan inyección intraperitoneal de Dimetilnitrosamina - una potente toxina hepática - en ratas Wistar macho para generar un modelo animal de fibrosis hepática, que era entonces utilizar para estudiar el desarrollo de la enfermedad del higado.

sólo ha visto primera entrega de JoVE en administración compuesta discutiendo las inyecciones parenterales comúnmente empleadas. Recuerde, la ruta de entrega óptima se basa en varios factores, incluyendo el pH, el volumen y la viscosidad de la solución inyectada. Y cada técnica tiene ventajas y desventajas, que deben ser consideradas en relación con las necesidades experimentales. ¡Como siempre, gracias por ver!

Summary

Administración de la sustancia es un componente común de protocolos experimentales que utilizan animales. Al elegir una ruta de entrega, deben deliberaron muchos factores, incluyendo la competencia técnica de los individuos responsables de los animales, el tamaño del animal, la viscosidad del fluido y la cantidad de dosificación a administrar. Una cuidadosa consideración de estos factores aumentará el bienestar de los animales y el resultado total del experimento.

References

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1. inyección subcutánea

  1. refrena el ratón mediante la sujeción con una mano sostenga manualmente. Una vez entendido, permite el ratón para descansar sobre una mesa u otra superficie segura. Asegúrese de evitar la presión sobre el cuerpo del ratón.
  2. Descansar el talón de la mano sobre la mesa para evitar excesiva peso en el ratón que puede dificultar la respiración. Ratones pueden también ser asegurados en un dispositivo comercial. Para las ratas, es mejor usar un dispositivo de restricción comercial.
  3. Agarrar la piel y tire hacia arriba para crear una tienda de la piel. Si utiliza un dispositivo de sujeción, pinzas se requiera captar la piel a través de la ranura en la parte superior.
  4. Insertar la aguja paralela a la columna vertebral, dirigida a la cabeza en la base de la doblez de la piel de la tienda. Dirigir la aguja de la cabeza para evitar la posibilidad de pinchazos en el cráneo, como el hueso del cráneo del ratón es muy delgado. Las ratas tienen la tendencia a la parte trasera de su cabeza, que podría causar la inyección para colocarse en los músculos del cuello.
  5. Coloque el bisel de la aguja hacia arriba para permitir un deslizamiento suave en la piel. Tenga en cuenta que se inserta la aguja por debajo de los dedos sujetando la piel. Para mejorar la seguridad cuando fuesen artículos de inyección, la piel está agarrada con pinzas, eliminando así la posibilidad de lesiones accidentales de aguja.
  6. Tire hacia atrás el émbolo para verificar la colocación correcta. Si el aire es aspirado en la jeringa, indica que la punta de la aguja no se coloca debajo de la piel y tendrá que ser retirado y colocado de nuevo. Si hay presión cuando el émbolo se jala hacia atrás, indica la colocación correcta de la aguja y la inyección puede proceder.
  7. Inyectar la sustancia lentamente con un movimiento constante. Para evitar la pérdida del artículo inyección, hacer una pausa después de la inyección, gire ligeramente la aguja bajo la piel y pellizcar la piel en el sitio de la inyección mientras retira la aguja.

Figure 1
figura 1. La inyección subcutánea en los ratones.

2. inyección intraperitoneal

  1. el método de sujeción manual con una sola mano se utiliza para esta técnica de inyección en ratones. Ajustar la mano que quede colocado lo suficientemente alta en el cuello para evitar que gire el ratón.
  2. Agarre la piel floja en la nuca del cuello entre el pulgar y el dedo índice.
  3. Estabilizar los cuartos traseros, ya sea fijando la piel a lo largo de la parte posterior entre el segundo, tercero y cuarto dedos y la base del pulgar, o colocando la cola entre los dedos terceros y cuarto.
  4. Inyección de
  5. IP en la rata requiere dos personas, uno para sujetar la rata y el otro para realizar la inyección.
    1. Alcance la rata sobre los hombros usando el dedo índice y medio a cada lado del cuello y la palma en la parte posterior. El pulgar y los dedos terceros y cuarto deben rodear el pecho para evitar el movimiento hacia adelante o hacia atrás. La posición de los dedos a cada lado del cuello evita que la rata de girar su cabeza.
    2. La rata de levantar y girar para dejar expuesto el abdomen ventral.
    3. Estabilizar los cuartos traseros sujetando los pies y la cola bien y extiende lejos del cuerpo.
  6. Coloque el ratón o rata para exponer el abdomen, asegurando que se enfrenta a hacia arriba.
  7. El animal de la inclinación con la cabeza hacia abajo en un ángulo 30°, para permitir que los intestinos a caer hacia adelante.
  8. Lugares de inyección son los siguientes:
    1. el área a inyectar cranially está rodeado de una línea imaginaria que se extiende horizontalmente por todo el cuerpo en la parte superior de la cadera (de flanco a flanco).
    2. La línea media es la frontera intermedia, reconocida como donde se encuentra con pelo que crece en direcciones opuestas. En los animales sin pelo, la línea media se extiende en línea recta desde el xifoides hasta el ano.
    3. La frontera lateral es una línea desde la parte superior de la cadera para el prepucio en el varón y desde la parte superior de la cadera y los pezones en la mujer.
    4. Esto proporciona un área triangular de inyección segura.
  9. La inyección de un artículo dentro de los hitos
    1. insertar una aguja perpendicular a la columna vertebral, de la línea media, en el triángulo como se describió anteriormente. Colocar la aguja en un ángulo de 90° respecto al plano del cuerpo permite inyecciones seguras utilizando ambos lados del abdomen. Esto es especialmente importante con múltiples inyecciones, ya que minimiza el trauma tisular permitiendo la alternancia de sitios de inyección.
    2. Cuando la aguja se coloca en un ángulo de 90°, lo hará " pop " en el abdomen, lo que permite más fácil determinación de la profundidad. Esto también es una referencia visual y táctil que la aguja esté bien colocada.
    3. Aspirar la jeringa para asegurar la colocación dentro de la cavidad peritoneal y no dentro de la vejiga urinaria, intestino o estructuras vasculares.
    4. Evitar inyectar caudalmente en el ratón macho para evitar administrar el artículo en el saco escrotal. Evitar inyectar en la teta de la hembra para evitar trauma.

Figure 2
figura 2. Los lugares para inyección intraperitoneal en ratones.

3. inyección intramuscular

  1. restricción de esta técnica para ratones y ratas requiere dos personas o el uso de un tubo de sujeción. Se describe aquí es un método de una sola persona utilizando un dispositivo de restricción.
    1. Coloque el animal en el dispositivo de seguridad.
    2. Una vez que el animal está en el tubo, sujete la cola para colocar el animal con las patas traseras del tubo.
    3. Agarre la piel del flanco en la porción craneal del fémur para extender la pierna y evitar que la rodilla flexión.
    4. Colocar el dispositivo de sujeción para que está parado sobre la mesa con el animal ' cabeza apuntando hacia abajo, o acostado sobre la mesa apuntando hacia el cuerpo del técnico para permitir la estabilización del dispositivo mientras se realiza la inyección.
    5. Lugares de inyección es las siguientes: pierna el ratón y la rata son pequeños con los músculos glúteos (los músculos caudales del muslo) que comprende la mayor masa muscular en las extremidades, la segunda mayor masa muscular en las extremidades es el gastrocnemio (músculo del becerro). La inyección se realiza desde el aspecto caudal de la pierna.
      1. Localizar el glúteo músculo masa posterior en el fémur. Puede ser palpated el hueso y el músculo grande se siente fácilmente.
      2. Nota que la línea media de la pierna de la cara posterior del punto del corvejón a la cola. El pelo tiene a menudo una cresta donde viene junto, como crece en direcciones opuestas de las superficies lateral e interiores.
      3. Las inyecciones de
      4. se hacen hacia el aspecto lateral del muslo de la línea media. Esto reduce la probabilidad de dañar los nervios y los vasos sanguíneos situados en la superficie medial de la Leg
      5. Las inyecciones en el gastrocnemio se realizan desde la cara posterior y con la consideración cuidadosa de la localización de la vena safena lateral.
    6. La inyección de un artículo dentro de los hitos
      1. Insertar la aguja perpendicular al fémur fuera de la línea media, como se describe anteriormente, a una profundidad máxima de 5 mm para el músculo glúteo y un máximo de 3 mm para el gastrocnemio.
      2. Para evitar traumatismo en el músculo, el extraño movimiento de la aguja en el tejido debe ser prevenido. La jeringa debe celebrarse de una manera que no es necesario cambiar la posición de la mano para realizar la inyección.
      3. Aspirar la jeringa para asegurar la colocación dentro del músculo y no en un vaso sanguíneo.
      4. Inyectar el material en un movimiento fluido y constante. No se inyecte rápidamente tal que permita la expansión lenta del músculo. Inyección rápida puede causar trauma de tejido.

Figure 3
figura 3. La inyección intramuscular en el músculo glúteo en ratas.

4. inyección intravenosa utilizando la vena de la cola

  1. sujeción del animal es dependiente sobre si el animal está anestesiado o despierto. Animales
    1. uso un tubo de sujeción cilíndrico para conscientes ratones o ratas, excepto sin pelo o desnudo. Debido a la naturaleza grasa de los animales sin pelo, es difícil de colocar y quitar de las restrainers acrílico, ya que su piel tiende a adherirse al plástico rígido. Por lo tanto, se utiliza un cono de plástico flexible.
    2. Otros dispositivos de inyección incluyen plataformas iluminadas, climatizadas plataformas y conos de plástico rígidos donde el ratón se mantiene en el cono estrictamente con la tensión en la cola.
    3. Anesthetized ratones pueden no necesitar seguridad.
    4. Caliente el cuerpo entero o sólo la cola para la vasodilatación de los vasos de la cola.
      1. Caliente todo el cuerpo con una almohadilla de calefacción eléctrica en media o una manta de agua circulante con.
      2. Colocar el animal en el dispositivo de sujeción, envuelto en la fuente de calor.
      3. Observar de cerca el animal y retire de la fuente de calor tan pronto como se dilatan los vasos sanguíneos. Calentamiento de cuerpo entero también puede lograrse con el uso de una lámpara de calor dirigido en una jaula. Cuando se utiliza una lámpara de calor los animales estrechamente respete, ya que es fácil sobrecalentarlos.
      4. Al calentamiento de cuerpo entero no es factible, la cola solo la calefacción se logra utilizando compresas calientes de un calentador de toallas, botella de agua caliente, o sumergir la cola en agua caliente. PRECAUCIÓN debe ser empleada para evitar que se queme la cola porque el agua caliente, caliente toallas y bolsas de agua caliente no tienen controles de temperatura. Es común que las fuentes de calor que se sobrecalienta inicialmente. Estas fuentes de calor también enfríen rápidamente.
    5. El uso de aceite de tejido es otra forma de mejorar la visualización de los vasos.
      1. Sumergir un aplicador con punta de algodón en el aceite del tejido y el pozo de petróleo de la porción de la cola que se apoderó de estabilización se aplica. El aceite del tejido hace que los vasos que aparecen más claramente definidos.
      2. Allí es aceites no tóxicos comercialmente disponibles que contienen un producto químico en la formulación que genera calentamiento de la piel y vasodilatación con la evaporación. Estos aceites se aplican, y después de unos momentos, cuando los vasos son accesibles, el exceso de aceite es enjugado con una bola de algodón.
      3. Todos los aceites pueden dificultar la cola hacer.
      4. Uso de aceites, la inyección debe hacerse inmediatamente en la visualización de los vasos.
    6. Lugares de inyección son los siguientes:
      1. las venas laterales de la cola se encuentran en los lados de la cola. También hay barcos que recorren nuestra dorsal y ventral de la cola que no es adecuado para propósitos de la inyección.
      2. El animal en el limitador puede girarse para que las naves laterales son hacia arriba para facilitar la inyección. Por otra parte, la cola puede dar vuelta para traer los vasos en una posición más aceptable para la inyección.
      3. Los vasos son muy superficiales. Llegan a ser más superficiales que llegan a la base de la cola.
    7. Inyección de un artículo en la vena de la cola requiere habilidad. Para evitar traumatismos a los vasos sanguíneos, el extraño movimiento de la aguja debe evitarse. La jeringa se celebra de una manera que no es necesario cambiar la posición de la mano para realizar la inyección.
      1. Posición de la cola para que la nave es visible y sostenido bajo tensión. No aplique una tensión excesiva en la cola, o se puede estirar el vaso y el flujo de sangre disminuido.
      2. Colocar la aguja directamente sobre el recipiente hasta distal como sea posible.
      3. Aplique una ligera presión y deslice la aguja en el paralelo de cola a las vértebras. Evitar la pesca de la aguja hacia abajo, como la aguja transecto del buque. La aguja debe ser visible en el vaso como se es avanzado por lo menos 2 mm en el lumen.
      4. Inyectar el material en un movimiento lento y fluido para evitar la ruptura de la vasija.
      5. Prestar especial atención a la cola durante la inyección. Si correctamente en el recipiente, el material de la inyección que fluye en el recipiente se siente con ninguna resistencia. El vaso sanguíneo debe blanquear como la sangre es empujada hacia fuera por el material de inyección.
      6. Si la aguja no está en el recipiente, habrá fuerte resistencia al inyectar. Si inyectar con fuerza, el material llenará el espacio subcutáneo y la cola se globo. Parar inmediatamente, como un material diseñado para ser inyectado por vía intravenosa puede ser cáustico para los tejidos circundantes. Retire la aguja y trate de otra inyección más cranially en la cola.
      7. Después de la inyección acertada, retire la aguja y aplique presión en el sitio de la inyección para asegurar buena hemostasia antes de regresar el animal a la jaula.

Figure 4
figura 4. Inyección en la vena en los ratones de cola.

Administración compuesto suele ser un componente integral de un estudio en animales, y muchos factores deben evaluarse para asegurar que el compuesto sea entregado correctamente y de manera humana. Las dos vías de administración principales son enterales-través de la zona digestiva y parenteral fuera del tracto digestivo. La principal diferencia es, si el compuesto se administra por vía enteral se somete a metabolismo hepático antes de entrar en el torrente sanguíneo. Considerando que, por cualquier vía parenteral, intravenosa o intramuscular, la sustancia pasa este primer paso por el hígado, generalmente dando por resultado una biodisponibilidad más alta.

En este primer video de la serie de administración compuesta, a empezar por discutir los factores que afectan la elección de la vía de administración en general. Y luego Repasamos las inyecciones parenterales más comunes métodos, incluyendo subcutáneo abreviados como SC o SubQ, intraperitoneal o IP, intramuscular o IM y IV también conocido como intravenoso.

empecemos por revisar algunas cosas que uno debe tener en cuenta antes de preforma cualquier tipo de procedimiento de la administración compuesto. El primer paso es preparar la solución o suspensión que se inyecta, y la primera consideración fundamental para la preparación de la sustancia es esterilidad. Para evitar la introducción de patógenos en el animal, es importante que el material de inyección, así como las agujas y jeringas a utilizar estériles.

La segunda consideración es fisiológico compatiBility. Una solución de dosificación, si administrados por vía enteral o parenteral, debe ser fisiológicamente tamponada a pH adecuado para el compuesto para ser absorbido correctamente y para evitar la lesión del tejido. El tercer factor es la viscosidad del artículo de inyección, que juega un papel fundamental en la selección de la aguja. Generalmente, se utilizan agujas de calibre 20 a 30 en los procedimientos de administración parenteral para ratones y ratas. Los centros de estas agujas generalmente son color cifrado para la facilidad de identificación.

La solución debe tener la suficiente fluidez para pasar a través de al menos una de estas agujas. Si la solución puede pasar a través de más de uno, entonces, en general, la elección es el calibre más pequeño posible. El siguiente factor es volumen de administración que afecta a la jeringuilla de la selección. Similar a las agujas, la jeringa posible más pequeño necesaria para una dosificación exacta con graduaciones correcto, debe seleccionarse. El calibre de la aguja y el volumen de administración dependen también la ruta y las especies, tamaño y edad del animal se administra. Vea la tabla 1 a continuación para revisar los valores relacionados con las rutas que se discute en este video. La última consideración importante es la velocidad de absorción, que varía significativamente con cada vía de administración y puede jugar un papel en la selección del método más adecuado.

ahora, vamos a hablar de las características peculiares de los métodos de inyección habitualmente empleados.

SC o inyección de SubQ pone el material entre las capas de la piel y el músculo en un espacio virtual creado por elevación de la piel. Esto permite una inyección segura de grandes volúmenes, pero la velocidad de absorción es más lenta que otras rutas, proporcionando un efecto más sostenido. Durante la administración de IP, el compuesto se inyecta directamente en la cavidad peritoneal. Este es otro método común usado para entregar grandes volúmenes de solución. Aunque una inyección del IP se considera la administración parenteral, el mecanismo de absorción es más similar con la dosis oral.

Inyectable IM an entrega un compuesto directamente en los glúteos o del músculo gastrocnemio. Una sustancia que inyectada IM se absorbe rápidamente debido a la abundante cantidad de vasos dentro del tejido muscular, que podría hacer una ruta preferida en algunos casos. Inyección incorrecta o repetida en el músculo puede causar daño del nervio dando por resultado parálisis o músculo necrosis. Por último, una inyección IV en la vena de la cola de los animales es la vía más eficaz de administración, como la sustancia se introduce directamente en el sistema circulatorio. Tenga en cuenta que el compuesto debe ser inyectada en una de las venas de la cola caudal lateral ubicadas a los costados de la cola. Hay un barco que recorre la línea media ventral de la cola, que no es conveniente para propósitos de la inyección.

ahora que hemos discutido a fondo, vamos a aprender los procedimientos, a partir de las inyecciones SC. Para los ratones, escoger el animal por la cola y déjelo descansar en otro lugar seguro, como tapa de la barra de alambre. A continuación, manualmente refrenar el animal levantando la piel alrededor del cuello, formando una tienda de campaña. A continuación, establecer el animal sobre la mesa con los pies espaldos descansando en la superficie y descansar el talón de su mano sobre la mesa para evitar excesiva peso en el animal que puede comprometer la respiración.

Para inyectar, tomar la jeringa con la solución que se inyecta y dirigir el paralelo de la aguja y la espina dorsal de la cabeza para evitar la posibilidad de pinchazos en el cráneo. A continuación, inserte la aguja con el bisel hacia arriba, que permite un deslizamiento suave en la piel. Tire hacia atrás el émbolo para verificar la colocación de la aguja adecuada. Si hay contrapresión cuando el émbolo se jala hacia atrás, la aguja está en la posición correcta. Si el aire es aspirado en el émbolo, la aguja tendrá que cambiarse de lugar.

Después de confirmar que la aguja está en la posición correcta, inyecte lentamente con un movimiento constante. Pausa después de la inyección y girar la aguja ligeramente debajo de la piel para evitar la pérdida del artículo inyección. Luego, pellizcar la piel en el sitio de inyección y retire la aguja. Este mismo método puede utilizarse en ratas destetadas.

Para ratas adultas, en primer lugar el animal tiene restringida usando un dispositivo, el procedimiento que se explica en el video de "Conceptos básicos de manejo y moderación" de esta colección. Entonces, uno puede realizar la inyección SC de la misma manera como hizo en ratones.

a continuación, vamos a aprender cómo llevar a cabo una inyección de IP. En ratones, utilizan la técnica de moderación a dos manos para frenar manualmente el animal, que otra vez se describe en el video de "Conceptos básicos de manejo y moderación". Asegúrese de que su mano no dominante se coloca lo suficientemente alta en el cuello para evitar que el animal gire. Estabilizar los cuartos traseros colocando la cola entre los dedos terceros y cuarto o por fijación a la piel firmemente entre los dedos restantes y la base del pulgar.

a continuación, coloque el animal para dejar expuesto su abdomen. Incline el animal con la cabeza hacia abajo en un ángulo de 30° para permitir que los intestinos a caer hacia adelante. La señal de inyección puede esbozarse así: dibuja una línea imaginaria que se extiende horizontalmente a través del cuerpo, en la parte superior de la cadera, de flanco a flanco. Luego dibujar el borde medial o la línea media, a lo largo de la línea donde se encuentra con el pelo que crece en direcciones opuestas. Por último, imagina el borde lateral, que es una línea de la tapa las caderas en el prepucio en los machos y después los pezones en las hembras. Esto proporciona el área triangular para inyección IP segura.

el siguiente método que discutiremos es la inyección IM. Moderación en esta técnica para ratones y ratas requiere dos personas o el uso de un tubo de sujeción. Aquí, describimos el método de una persona utilizando un dispositivo que refrena.

En primer lugar, coloque el animal en el tubo y con las patas traseras hacia fuera, tire la cola a la posición del animal. A continuación, sujete la piel del flanco en la porción craneal del fémur para extender la pierna y evitar la rodilla de flexión. Luego, coloque el dispositivo de sujeción para permitir la visualización del sitio de inyección.

Para identificar la señal glútea, localizar el músculo glúteo masa posterior en el fémur. Puede ser palpated el hueso y el músculo grande se siente fácilmente. Tenga en cuenta la línea media que va desde el punto del corvejón hasta la cola. A menudo vemos la cresta donde confluyen el pelo de las superficies lateral e interiores crecen en direcciones opuestas. Por lo general, las inyecciones se realizan hacia al lateral el aspecto de la línea media. El gastrocnemio es el músculo de la pantorrilla y la inyección en este músculo también mejor se realiza desde la cara posterior.

Para el músculo glúteo, en el monumento situado, inserte la aguja a una profundidad de unos 5 mm. Evite colocar de nuevo la jeringa durante la inyección para prevenir el daño muscular. A continuación, aspirar para asegurar que la colocación es en el músculo, no de un vaso sanguíneo. Y por último, inyectar el material de manera lenta y constante, ya que la inyección rápida puede causar trauma tisular. Retire la aguja de forma perpendicular siguiendo la misma ruta que la de la inserción. Músculo gastrocnemio, inserte la aguja a una profundidad de 3 mm y realizar la inyección de la misma manera que el músculo glúteo.

por último, vamos a aprender a realizar una inyección IV en las venas de la cola de los roedores. El mismo método es apArá para ratones y ratas.

Coloque el animal en un tubo de sujeción cilíndrico y calentar todo el cuerpo del animal mediante el uso de una almohadilla de calefacción eléctrica establece en medio durante unos 2-5 minutos. Seguirá caliente del animal, hasta que se dilatan los vasos sanguíneos, que es perceptiblemente más grande. Recuerde, las venas laterales cola caudal se encuentran en los lados de la cola. La arteria que está en la línea media ventral no es adecuada para propósitos de la inyección. Gire el dispositivo de sujeción y colocar la cola que las venas laterales de la cola son hacia arriba y bajo tensión. No aplique una tensión excesiva o el recipiente puede ser estirado y el flujo de sangre disminuido.

Coloque la aguja bisel-para arriba directamente sobre el vaso sanguíneo distal como sea posible y aplique una ligera presión para deslizar la aguja hasta el paralelo de cola a la columna vertebral. Inyectar el material en un movimiento lento, fluido y notar que el buque palidece como sangre es empujada hacia fuera por el material de inyección. Si la aguja no está colocada correctamente en el recipiente, habrá fuerte resistencia al inyectar y si se inyecta con fuerza el material llenará el espacio subcutáneo y la cola se globo. Detener inmediatamente el material - que está diseñado para ser inyectado por vía intravenosa - sea cáustico para los tejidos circundantes. Retire la aguja e intentar otra inyección más cranially en la cola. Después de la inyección acertada, retire la aguja y aplique presión en el sitio de la inyección para asegurar buena hemostasia antes de regresar el animal a la jaula.

ahora que está familiarizado con los métodos de inyección común, vamos a ver algunas aplicaciones de estas vías de administración, que no sea el suministro de medicamentos.

En varios experimentos, los ratones se inyectan con un patógeno específico para el estudio de la infección. Aquí, los investigadores utilizaron la vía subcutánea para introducir las bacterias resistentes a los antibióticos que causa las lesiones, y el tamaño de estas lesiones sirvió como una lectura para la virulencia del patógeno. Varios científicos están interesados en estudiar la distribución y la supervivencia de las células madre después de la entrega sistémica. En este estudio, los investigadores realizaron cola inyección en la vena de etiquetado genéticamente las células madre neurales en un modelo animal de esclerosis múltiple y encuentra la distribución de las células inyectadas a la médula espinal y regiones del cerebro.

En otro experimento, los investigadores inyectados fluorescencia etiquetada mioblastos por vía intramuscular en un modelo animal de la distrofia muscular. A continuación, bioluminiscencia fue realizado para analizar el éxito de la implantación de las células madre. Por último, las inyecciones también pueden utilizarse para generar modelos animales. Estos científicos realizan inyección intraperitoneal de Dimetilnitrosamina - una potente toxina hepática - en ratas Wistar macho para generar un modelo animal de fibrosis hepática, que era entonces utilizar para estudiar el desarrollo de la enfermedad del higado.

sólo ha visto primera entrega de JoVE en administración compuesta discutiendo las inyecciones parenterales comúnmente empleadas. Recuerde, la ruta de entrega óptima se basa en varios factores, incluyendo el pH, el volumen y la viscosidad de la solución inyectada. Y cada técnica tiene ventajas y desventajas, que deben ser consideradas en relación con las necesidades experimentales. ¡Como siempre, gracias por ver!

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