基本的なケア手順

Lab Animal Research

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Overview

< p クラス = 'jove_content' > ソース: ケイ ・ スチュワート、RVT、RLATG、CMAR;ヴァレリー A. シュレーダー、RVT、RLATG。ノートルダムのノートルダム大学

マウスおよびラット生物医学的研究に使用される動物の 90% 以上を占めています。実験の結果には、これらの研究動物の適切なケアが欠かせません。これらのマウスおよびラットの大半に適用される一般的な手順がありますが、免疫不全の人などの動物のいくつかは実験のためにそれらを維持するために撮影するための追加手順を必要とします。

一般的に使用される免疫不全マウスには近交系マウスと遺伝子工学によって作成されているもので自然発生したものが含まれます。研究で使用される最初の免疫不全マウスはあった「ヌードマウス」です。Balb/c ヌード (nu) マウスは、髪と、胸腺に欠けているマウスを生産していた BALB/c コロニーの中で、1966 年に発見されました。これらの無胸腺マウス T 細胞を欠いている抑制免疫システムがあります。この動物の値は微生物感染症、免疫不全症、自己免疫の研究で使用するためすぐに発見されました。裸のマウスないほど普及して、また裸のラットがあります。裸のラット T 細胞欠損であり、末梢リンパ器官の胸腺依存領域で枯渇した細胞集団を示します。別の自然に発生する免疫欠損マウスは、重症複合免疫不全マウス (SCID) です。これらのマウスには、機能 B および T 細胞の生産を損なう欠陥があります。十分な免疫応答をマウントできない、これらのマウスはひと細胞の移植の受信者をホストとして使用できます。免疫の欠陥を持ついくつかの遺伝子組み換えマウス系統が市販されています。1遺伝子組み換えの欠乏の重大度によって異なりますただし、免疫不全のマウスおよびラットのすべては同様に処理されます

。 < p クラス = 'jove_content' > この原稿は免疫と免疫不全動物のケアを説明します。動物の両方のグループの住宅、食事、環境要件、および処理について取り上げます。

Cite this Video

JoVE Science Education Database. ラボ動物研究の必需品. 基本的なケア手順. JoVE, Cambridge, MA, (2017).

Principles

住宅/ケージング

マウスおよびラットは主に靴箱タイプの寝具材料を含む固体底部でケージングに収容されています。典型的な靴箱マウス ケージは、75 平方インチは最大 5 つの成体マウスのための十分なフロア スペースを提供します。ただし、実験的なデザインは、4 マウスのグループの呼び出すことができます。この場合、マウスは実験開始時に社会グループの中断を避けるために、4 つのグループで受信時に収納する必要があります。一般に、2 つの完全育てられた大人の動物の最大のことができますラット ケージングします。ラットを長期収納する場合は、彼らがペア住宅に設置したする必要があります

ケージは静的または個別換気 (IVC)。静的ケージ ワイヤ バーふたで覆われているかまたはケージの上部は、棚の下のラックの上に定住しました。ワイヤー バー蓋の上にボンネット、またはラックの棚の上のフィルター紙のシートとして、フィルター材料がケージの上に追加されます。IVCs はケージ、ワイヤー バーふたをしケージに空気の流れを提供するラックに配置されているボンネットとして設定されます。IVCs の使用ケージを静的なケージを変更に応じて変更する必要がある

標準ケージ システムは、食品流通の水と地域のソースを提供します。水は、水のボトル、ケージの上に配置や動物のケージのコンポーネントに組み込まれてあるシッパー チューブを介して提供できます。ケージをラックにエンゲージ、動物施設全体動物のニーズを満たすために設計されている自動散水システムのシッパー チューブに水が輸送されます。ケージングは、動物の適切なケアを提供するためにきちんと準備されなければなりません。食品貯蔵用ワイヤー バーふたのセクションを使用またはいずれかのフィーダーを動物のケージ内に配置があります。その動物が汚ない食品を置く必要があります

ケアおよび実験動物の使用のためのガイド 2 (、" ガイド ") 状態はすべてケージ実装は少なくとも 2 週間ごとを消毒する必要があります。いくつかのケージやアクセサリーは、臭気とエンクロージャ内アンモニアのレベルによって決まるより頻繁に変更する必要があります。4 つ以上の男性または女性; ごみがない限り、2 週間ごとの変更、IVCs を予定する一般的には、これらのエンクロージャは、毎週変更する必要があります。ケージを変更することは、病原体にさらされるマウスのための機会は、免疫欠損マウスのケージングの変更行う必要がありますできるだけ頻繁

ダイエット

タンパク質、炭水化物、および脂肪レベルの変化で利用できる食事療法の多くの曲があります。通常、15-19% のタンパク質、44% の炭水化物、および 4-9% の脂肪のフィードをで構成する必要があります。食品、脂肪含有量の増加は、再生を強化する繁殖コロニーに用いられます。食品は、免疫不全のマウスの汚染の源をすることができます、それはいずれかの蒸気滅菌または照射なりません。オートクレーブ処理を施した食品は、プロセスに耐えるように特別に策定する必要があります。ただし、照射過程は料理内容を変更されません

水は免疫欠乏動物の汚染のもう一つの潜在的なソースです。オートクレーブまたは UV フィルターを通過する水は、ろ過によって、水を処理する必要があります。蒸気オートクレーブで水を消毒、水のボトルは、アルミ箔で覆われています。シッパー チューブとボトルの蓋は、オートクレーブ袋に個別に滅菌されています。酸性化水の pH を 2.5-3 水のボトルの細菌の成長を制御します。酸性水は、逆浸透 (RO) 水 8 リットルに 12 モル (M) 塩酸 (HCl) の 2 滴を追加することによって。濾過粒子フィルターと紫外線の光フィルターを含むシステム全体のシリーズで自動散水システムを使用できます

環境

の動物医療施設内環境を厳密に制御する必要があります。連邦政府の規制とガイドラインは、ケアの基準を確立している、動物を使用一般の処理します。照明、温度、湿度、空気の流れは、動物の生理学的ニーズを満たすために提供されます。室温をわずかに増加の必要性を除いて免疫不全動物のパラメーター、従来の動物のものと同じです。無胸腺裸の動物も追加寝具および体温調節を支援する檻の中で細切りの紙タイプ ネスティング材料を必要とします

間 68-72 ° F 40-60% の湿度と温度で飼育室を維持しなければなりません。2 湿度 40% 以下はマウスやラット、収縮尾、尾の脱落につながることができるの周りのポイントを乾燥する尻尾の皮を引き起こす条件リングテールにつながります。照明サイクルは、不適切な日長または光強度によって引き起こされる動物にストレスを避けるために設定する必要があります。通常、日長が 12 時間と 12 時間外です。照明の強度は、部屋での活動に従って変わる必要があります。技術者が動物の部屋で作業しているときは、高い照明レベルを使用できます。ただし、すべての活動が終了したら照明を約 325 ルクスに低下する必要があります。2 ライトはタイマーで監視システムを通じて検証サイクルする必要があります。ガイドの指示に従って、飼育室は時速 100% 新鮮な空気の 10-15 空気変更の最小必要があります。2 空気変更微生物や動物の部屋の臭いを減少させます。密集飼育室で 1 時間あたりの空気変更の数が増加する必要があります

ケージ レベルで環境要因は、ケージ型、ケージ、水供給システム、国会内で使用される基板。社会的なハウジングは科学的に正当化される場合を除き、必須または動物が他のすべてと互換性がありません。紙小屋およびネスティング材料などの環境エンリッチメントの規定は種特異的な行動を展示する動物を許可する順番のストレス レベルを減少させ、動物の全面的な福利を増加します。ネスティング材料を同じケージで複数の男性マウスの住宅補助鎮静フェロモンの飽和は、スリーピング エリアがあります。営巣地は、新しい環境に導入されている、男性の侵略を防ぐために変更するケージにきれいなケージに移動されます。3

Procedure

1 です免疫 (従来の) マウスを処理

マウスの免疫疾患は人間に似て非常にそれが実証されています。 。2 プロシージャの処理で、これらの動物の世話がエンジニア リング コントロール、個人保護装置を使用して伝染病のリスクを最小限に設計されているこれらの動物には、免疫機能が限られていると、動物の世話係と標準業務手順書;これらは、動物の接触がケージやその他の機器の汚染を軽減する

  1. 出荷容器から開梱: 動物の施設内で既に収容動物にリスクを他の機関または動物のベンダーから動物を受け取るします。、転送中に動物の輸送箱は病原体と接触して来ることができます。したがって、出荷コンテナーを開梱するときは、適切な手順を実行する必要があります。
    1. 動物を取り扱うときは最小限個人保護装置 (PPE) 要件、手袋、きれいな白衣またはボディス クラブ、微粒子マスク、安全メガネ
    2. は、ワイヤ バー蓋とバリアの上部などを含む、適切なケージを選択します。ケージは、適切な寝具とネスト材料供給べきであります。準備し、動物の到着前に受信エリアは、すべてケージングする必要があります
    3. 到着後、輸送箱は安全に配置され、温度制御ルーム。損傷のコンテナーを調べます
    4. は、任意の有害な病原体を破壊するコリン酸化製品、輸送用コンテナーの外側表面を消毒します。消毒液がメーカーの推奨事項に従ってボックスと接触して通常 15-30 分であることを確認してください
    5. は、動物を転送駅 (ATS) のコンテナーを配置します。ATS は、ユーザーおよび作業領域間真空空気の障壁を作成することによりアレルゲンの保護を提供するフード内の気流の HEPA フィルターを提供します。これは動物の毛/フケ、ケージの寝具材料の最小限の露出を保証します。一方向の空気も汚染の可能性を最小限に抑え周囲の部屋の空気から動物を保護します
    6. 出荷用コンテナーが開かれた後は、動物の全体的なヘルスを評価します。怪我や病気の動物のメモしておいてください
    7. は、適切なグループのサイズで組み立てられたケージに動物を配置します。グループ スペース規制と割り当てが実験的プロトコルに従ってする必要があります
    8. カバー ワイヤー バーふた付きケージです。ワイヤーのバーふたを蓋の上の 2 つの領域を作成する分周器をセキュリティで保護します
    9. は、適切な食品を選択し、線バー蓋の片側に食品を配置します。良い空気の循環を許可する 2 番目の側を空けてです
    10. 水は、水のボトルや自動散水システムを介して提供されます。水のボトルは、最近引き離されたマウスの彼ら、その水和のレベルを維持することができる使用されます。IVC のラックに配置される前に散水チューブを充電自動給水、ケージングします
    11. ラックのケージの場所。IVCs を使用して、ケージは、ラックの上に完全に従事していることと、シッパー チューブが給水システムに固定されているを確認します
  2. ケージは、従来のマウスを変更する
    1. ATS でケージを変更しました。各セッションの終わりに ATS を消毒します
    2. では一度に 1 つだけケージを開くことができます
    3. Caging は適切な寝具を用意し、動物の部屋に持って来られる材料を入れ子します。ATS にケージの数が少ない設定されます
    4. IVC ケージ内部のシッパー チューブとする必要がありますのシッパー チューブ内空気のデッド スペースを削除するシッパーに水を強制的に課金されます。正しく充電されている場合、マウスはそれから空気を削除するシッパー チューブに十分な圧力を提供することができない場合があります
    5. 動物を取り扱うときは最小限個人保護装置 (PPE) 要件、手袋、きれいな白衣またはボディス クラブ、微粒子マスク、安全メガネ
    6. 新しいケージに放置、ATS に変更する動物のケージを配置します
    7. 動物は、手で、パッド入りの鉗子の使用いずれか転送されます。手袋には、ケージの間またはマウスのグループ間が変更されます。ケージ間化学無毒で、手袋を消毒もできます
    8. は、特に男性のグループは建物のためのきれいなケージへの移行支援きれいなケージにマウスの営巣地を転送することが実証されています。その他の充実のアイテムにも新しいケージに転送します
    9. 新しいケージ ケージ上部またはフィーダーを配置すると、食品が追加されます
    10. バリア上部が新しいケージに配置され、ケージ、ラックに返されます
    11. IVC ケージはラックが空気と水のバルブが従事していることを確認するに正しくドッキングされている必要があります

2。免疫不全マウスを処理

    1. Immunocompromised 動物輸送コンテナーから開梱が無菌条件下でアンパックする必要があります。免疫欠損マウスを処理するすべての個人は、蒸気滅菌ガウン、マスク、髪ボンネット、滅菌手袋を着用しなければなりません。無菌テクニックを使用して、すべての回は、これらの動物を渡すでください
    2. すべての機器とケージングする必要がありますされて蒸気、紫外線で殺菌か殺菌滅菌ケージングの 2 つのオプションがあります、少なくとも 30 分間 70% エタノールに浸漬して化学的に: 標準、ラップされたケージングし蒸気滅菌、またはケージング照射により殺菌通常である-ベンダーによって。これらのケージは、使い捨てのユニットの 1 つ使用します
    3. 。 層流フード、フードの下でマウスを操作する前に
    4. は、送風機の営業と 70% エタノール散布されています。フードの送風機は、無菌の環境を維持するためにすべての回でに残しておきます。各使用後フードを消毒剤でスプレーしすべての残骸の一掃して再び 70% エタノールを噴霧します
    5. 最適な二人が免疫不全マウスの適切な受信に必要な: 無菌技術 (生殖不能の技術) を使用して動物を処理する 1 つと 1 つの汚染された項目 (非滅菌の技術者) を処理します。非滅菌の人がきれいな、長袖ガウン; を着用してください。白衣やスモック。マスク;ボンネット。フードに到達する必要滅菌室内の汚染を防ぐために滅菌手袋・
    6. は、前述したように層流フードを準備します。免疫不全動物専用フードを持っていることをお勧めします。そのフードは、紫外線 (UV) 殺菌灯使用のフードの内部を滅菌するために使用できますが装備されることをお勧めします。タイマーを利用してフードの表面が紫外線に十分な露出を持っているを確認する
    7. ボンネットに配置されているすべての供給の外観は外側の包装を含む 70% アルコールで噴霧されている食糧、水およびケージングの
    8. 輸送コンテナーは、フードに置かれる前に塩素二酸化溶液を吹き付けています。彼らは 15-30 分のため未開封のまま、フードに置かれ、一度します
    9. 指定された動物ハンドラーを滅菌食品とフードの下で水を開きます
    10. 非滅菌の技術者は、フードの下で出荷ボックスを開きます。フードと輸送用の箱の内側の内面との接触を避けるために非滅菌の技術者によって注意する必要があります
    11. 動物のハンドラーが滅菌のケージを開き、食料とケージの上に水を置くことによってケージを準備します。マウス出荷ボックスから削除し、無菌のケージに配置します
    12. 動物の条件は無菌動物のハンドラーで示されて。病気や、明らかな怪我を持っている動物が分離されます。動物の獣医の注意を必要とするとマークされたすべてのケージが be が他の動物の潜在的な汚染を減らすために最後に、処理、ケージを変更する、実験的操作を配置します
    13. 非滅菌の人はフードから住まれたケージが削除されます。ケージは、静的のケージとして標準的なラックや IVCs として換気ラック上に配置できます。IVCs でマウスは、温度調節を支援する追加のネスト材料が提供されなければならない
    14. 動物ハンドラーは、動物のグループの可能な交差汚染を避けるために各出荷コンテナーの後、手袋を変更ください。病気が発生した場合、動物の起源を追跡するケージのカードの出荷コンテナー番号が記録されます
    15. 未使用の消耗品は、元のコンテナーを密封することができます提供、将来使用するため保存できます。未使用の食糧は、ルームから削除されます
    16. マウスの実験的使用前に最低一週間順応期間を受ける必要があります
  1. ケージの免疫不全マウスの変更
    1. 、少なくとも毎週 1 回、またはより頻繁に必要と認められる場合にマウス ケージが変更されます
    2. フードの準備のための手順は準備、ケージし、人事 PPE は、動物の展開処理と同じです
    3. 動物は、手で、パッド入りの鉗子の使用いずれか転送されます。手袋が破れていたり、汚染されている場合、または動物がイリノイ州を表示されます、指定動物のハンドラーする必要がありますすべて 5-10 ケージ後 reglove
    4. 現れる病気の動物のケージは健康な動物の病原体や汚染物質に露出を避けるために順序を変更するケージの端に配置されます
    5. 食品や水は、次のスケジュールされたケージの変更前にケージに追加する必要がある場合に、行う必要があります無菌準備のフードの下に

マウスおよびラットを適切な世話これらの生物、生物医学研究に使用される動物の 90% 以上を占めていますので、実験の結果に重要な。ケア手順のすぐ出荷容器は、適切な住宅の条件を維持し、適切な食事を提供する適切な環境の確保、ケージを変更するから動物を解凍して起動。免疫不全など、いくつかの動物が実験目的のためにそれらを維持するために追加注意を必要とが、マウスおよび実験室のラットの大半に適用される一般的な手順があります

このビデオは標準と免疫と免疫不全動物の本質的なケア手順を説明します。そして最後に、異なる研究目的のため、科学者がこの知識を使用する方法を示すいくつかの例の実験を紹介します

病原体と接触して来ることができる輸送箱、移動中、すでに施設内収容動物にリスクをもたらす他の機関から動物を受け取るします。そのため、出荷コンテナーを開梱するとき、適切な手順を採用すべき

任意の動物を処理する前に適切な保護具や PPE を着用することが重要です。最小の PPE を着用する、白衣、手袋、安全メガネ、ほこりやアレルゲンへの暴露を減らす手術型マスク。次のステップは、着信の動物を適切なケージを選択することです。その後、適切な寝具材料を入れ子とケージを供給します。動物の到着する前に転送の準備ができているので、温度制御の受信ルームに準備されたケージを取る

発送到着時に受音室の安全な場所に輸送箱を配置。損害のコンテナーを確認し、すべての有害な病原体を破壊する外側の表面を消毒します。消毒液が製造元の推奨事項に従って、少なくとも 15-30 分、ボックスとの接触が確認します。その後、動物の転送駅、または ATS に容器を置きます。この駅では、高効率微粒子空気、または、HEPA フィルター、フード内の気流を提供しています。HEPA はアレルゲンからユーザーを保護し、汚染の可能性を最小限に抑え周囲の部屋の空気から動物を盾します。次に、出荷用コンテナーを開き、齧歯動物の全体的なヘルスを評価します。怪我や病気のように見える動物のメモしておきます。その後、適切なグループのサイズですでに組み立てられて檻に置いて、ワイヤー バーふた付きケージのカバー、2 つの領域を作成する分周器を確保します。適切な食品を選択し 1 つの側面に配置し、2 番目の面を良い空気の循環を可能にする開いたまま。最後に、動物はない自動給水ラックに置かれている場合、は、十分な水の供給を確保するための水のボトルを追加します。覚えて、ATS は、各セッションの終わりに消毒、消毒時に送風機がオフでなければなりません

ケージを変更する、適切な寝具の素材と新鮮なケージ ケージを 2 つの場所し、ATS を動物で使用されるケージします。手でまたはパッドの鉗子を使って動物を古いケージから新しいケージ 1 つ転送できます。両方これらのメソッドは、このコレクションの別のビデオで説明されています。動物のケージを 1 つだけを一度に開くことができますを覚えています。雄マウスのくずを持つ女性、転移と動物をアシストきれいなケージにマウスの営巣地を転送することが実証されています。ケージ上部を新しいケージに配置すると、一度は、新しいトップ古いケージの上から食品を転送し、必要に応じてより多くの食糧を追加します。バリア上部ラックにケージを返却して次に、します。手袋ケージ間やグループ間を変更することをお勧めします

ものを滅菌する必要がありますように免疫不全動物のため開梱手順は少し異なります。フード内部の送風機を使用する前に、少なくとも 24 時間にすることをお勧めします。Immunocompenent 動物の発送到着時にスプレー容器受音室の消毒液と 15-30 分のため未開封のままにしておきますが好きです。免疫不全マウス用に指定された ATS で 70% エタノールで 30 分動物を操作する前に層流フードをスプレーします。この展開活動に参加 2 人を持つことが理想的だ--一人無菌技術を使用して動物を扱う蒸気滅菌ガウンと滅菌手袋の二重のペアを着て滅菌技術者になるし、もう一方は非滅菌、技術者は汚染されたアイテムを処理するきれいな分離のガウンと手袋を身に着けています。両方を着用する必要があります、マスク、髪ボンネットおよび安全メガネ。

フード内側出荷コンテナーを開く前にすべての供給の場所しこれらのケージングとアルコールとの彼らの外観をスプレーします。貨物到着時に受信したアニマの場所とl は、フードにし、70% エタノールにもスプレーします。ベンダーによって照射による滅菌がされて使い捨てのユニットや蒸気滅菌、包まれている滅菌ケージング、いずれかの標準ケージングの 2 つのオプションがあります

滅菌食品、続いて輸送ボックスの開口部を開くことによって開梱手順を開始します。この時点で、ハンドラーは、滅菌手袋の最初のペアを破棄する必要があります。次に、非滅菌人滅菌ケージのラップを解除し、無菌ボンネットとワイヤー バーふたを削除し、フード逆さまに配置できます動物のハンドラーに渡します。その後、ケージの上のシッパー チューブは、ボンネットにある駅で水でいっぱいです。最後の動物のハンドラーでは、ケージに動物を配置、ワイヤ バーふた付き固定および食品を追加します、場所でボンネットを設定します。フード送風機は無菌の環境を維持するためにすべての回で、する必要がありますに注意してください。最後に、非滅菌の人はフードから住まれたケージを削除し、適切なラックの上に配置します。グループ間の相互汚染を防止する動物のハンドラーは、各出荷コンテナーの後手袋を変更する必要があります

免疫不全動物のケージを変更する、フード、ケージと PPE の準備は、これらの動物の解凍と同じ。転写法は同じ、無菌条件の下ではなく免疫動物

今の本質的なケアを提供する別の重要な側面である、動物のための適切な住宅事情を説明しましょう。マウスおよびラットは、主に靴箱タイプの寝具材料を含む固体底部でケージングで収容されます。典型的なマウスのケージは、75 平方インチは最大 5 大人のマウスのための十分なフロア スペースを提供します。その一方で、ラットのおりは 142 平方インチの面積、2 ラットには適して。静的なケージは通常ワイヤー バーふたで覆われる、フィルター材料は、ボンネットとしてケージの上に追加されます。個別換気ケージ、または, もワイヤー バー蓋とボンネットがケージに気流を提供するラックに配置されます。免疫不全動物に有益であるかもしれない静的ケージとして頻繁にケージを変更する必要がある

すべてのケージ システム食糧および給水のための規定があります。食品貯蔵用ワイヤー バーふたのセクションを使用またはいずれかのフィーダーを動物のケージ内に配置があります。食品は、動物によって汚ないように配置しなければなりません。水は水のボトル、ケージの上に配置を介して供給される通常自動水まき飲酒バルブを介してされるまたは内蔵動物ケージのコンポーネントです。バルブ オプションを飲み、ケージ、ラックに従事している水は動物動物の施設全体のニーズを満たすために設計されている自動散水システムのチューブに運ばれた

ケアおよび実験動物の使用のためのガイド の状態はすべてケージ実装は少なくとも 2 週間ごとを消毒する必要があります。いくつかのケージやアクセサリーは、臭気とエンクロージャ内アンモニアのレベルによって決まるより頻繁に変更する必要があります

今適切な食品と免疫と免疫不全動物の水の供給についてお話しましょう。変数のタンパク質、炭水化物、および脂肪組成と多くの市販のフィードがあります。理想的には、フィードでは、15-19% のタンパク質、44% の炭水化物、および 4-9% の脂肪を含むべきであります。免疫不全動物フィードが滅菌されていることを確認してください

水道水または RO 水は、逆浸透膜は、免疫動物の使用できますが、免疫不全の動物、水汚染のソースすることができるため、滅菌する必要。無菌水では pH は 2.5-3 の細菌の増殖を制限するために水を酸性、RO 水 8 リットル 12 モル塩酸 2 滴を追加することによって維持されます。個々 のボトルに水を注ぎ、アルミ箔でそれらをカバーします。オートクレーブ袋のシッパー チューブとボトルの蓋を別々 に配置し、蒸気滅菌用オートクレーブにすべてを置く

今動物のケアに欠かせない標準的な環境条件を説明しましょう

科学的に正当化される場合を除き、または動物が他のすべてと互換性がある場合はケージ レベルで社会的なハウジングは必須。紙小屋と環境を豊かにし材料を入れ子建物と穴を掘る、入れ子のような種固有の行動を展示する動物を順番ストレス レベルが減少し、動物の全面的な福利を増加可能します。ネスティング材料を同じケージで複数の男性マウスの住宅補助鎮静フェロモンの飽和は、スリーピング エリアがあります。前述のように、ケージを変更する時にきれいなケージに営巣地を移動を防ぎます侵略、特に男性、動物が新しい環境に導入されるよう。無胸腺裸の動物 1 つ追加寝具を提供することを検討してくださいし、体温調節を支援する用紙の種類入れ子の檻の中で材料を千切り

部屋レベルでマウスおよびラットの温度は 68 と 79 ° f. の間でなければなりません低レベルはリングテールと呼ばれる状態になることが部屋の湿度レベル 30 から 70 パーセント、必要があります。3 番目の部屋パラメーターは照明です。これには、光の強さとサイクルが含まれます。通常、動物の部屋は、12 時間ライト 12 時間暗い周期に設定されます。照明の強度は、部屋での活動に従って変わる必要があります。技術者が作業しているときは、高い照明レベルを使用できます。ただし、すべての活動が終了したら約 325 ルクスに低下する必要があります。最後に、部屋の中で空気の流れの制御が慎重にする必要がありますも。100% 新鮮な空気の 10-15 の空気の変化の最小値は、1 時間ごとを実行する必要があります。これは微生物や動物の部屋の臭いを減らす

最後に、研究者、住宅、食事や環境設定の実験で実験動物についてのこの知識を使用してどのように見てみましょう

前述したよう、実験動物は一般的にストレスを軽減、巣作り行動を展示し、研究者は、動物福祉の指標としてこのを使用しています。この実験では、科学者を開発、公平な巣を獲得するシステムを内蔵し、それに巣作り行動に関する研究外気温度の影響を使用します。温度の上昇が周囲温度動物福祉の役割を強調表示、スコアの大幅な低下を引き起こされるあなたが見ることができる

は、マウスおよびラット愛炭水化物、研究者が別のフィードを使用していることを考える動物の運動機能をテストするのには図形します。これは異なる種類の食品の取扱いタスク中に器用さを分析し、次の外科的または薬理学的介入に達する動作を調べることが含まれます

知られてマウスおよびラットが夜間、ライトアップ エリアを好むはありません最後に。科学者たちは、これらの種の不安を勉強するのに環境を構築するのにこの知識を使用します。たとえば、ここで研究単純なオープン フィールドに移入動物と野生型によって費やされる時間を勉強し、ノックアウト マウスの内側と外側に提出不安様行動の効果遺伝子の打撃を分析するためのゾーン

マウスおよびラットの必須ケア手順をゼウスの導入を見ただけ。今メジャーの理解が必要s 環境およびこれらの動物の処理は動物の健康に害を発生しません、また研究することができます異なる科学的な目標を達成するためにこれらのパラメーターを変更する方法を知っておくべきことを確認してください。いつも、見てくれてありがとうとして!

Summary

適切なケアと生物医学研究で使用される動物の処理実験の結果なのです。規制と確立されたガイドラインは、使用するプラクティスの多くを決定します。ただし、付加的な手段はマウスおよびラット日和見病原体への偶発的な暴露を軽減するために免疫不全症を持つために必要。とき健康設立の手続きに準拠して実践と実験動物の福祉を強化すると、およびより良い実験結果を達成した

References

  1. Belizário J.E. 2009. Immunodeficient Mouse Models: An Overview. The Open Immunology Journal. 2. 79-85.
  2. Institute for the Laboratory Animal Research. 2011. Guide for the care and use of laboratory animals, 8th ed. Washington (DC): National Academies Press.
  3. Van Loo, P. 2001. Modulation of aggression in male mice: influence of cage cleaning regime and scent marks. In Male Management: Coping with Aggression Problems in Male Laboratory Mice. Surrey: UK.

1 です免疫 (従来の) マウスを処理

マウスの免疫疾患は人間に似て非常にそれが実証されています。 。2 プロシージャの処理で、これらの動物の世話がエンジニア リング コントロール、個人保護装置を使用して伝染病のリスクを最小限に設計されているこれらの動物には、免疫機能が限られていると、動物の世話係と標準業務手順書;これらは、動物の接触がケージやその他の機器の汚染を軽減する

  1. 出荷容器から開梱: 動物の施設内で既に収容動物にリスクを他の機関または動物のベンダーから動物を受け取るします。、転送中に動物の輸送箱は病原体と接触して来ることができます。したがって、出荷コンテナーを開梱するときは、適切な手順を実行する必要があります。
    1. 動物を取り扱うときは最小限個人保護装置 (PPE) 要件、手袋、きれいな白衣またはボディス クラブ、微粒子マスク、安全メガネ
    2. は、ワイヤ バー蓋とバリアの上部などを含む、適切なケージを選択します。ケージは、適切な寝具とネスト材料供給べきであります。準備し、動物の到着前に受信エリアは、すべてケージングする必要があります
    3. 到着後、輸送箱は安全に配置され、温度制御ルーム。損傷のコンテナーを調べます
    4. は、任意の有害な病原体を破壊するコリン酸化製品、輸送用コンテナーの外側表面を消毒します。消毒液がメーカーの推奨事項に従ってボックスと接触して通常 15-30 分であることを確認してください
    5. は、動物を転送駅 (ATS) のコンテナーを配置します。ATS は、ユーザーおよび作業領域間真空空気の障壁を作成することによりアレルゲンの保護を提供するフード内の気流の HEPA フィルターを提供します。これは動物の毛/フケ、ケージの寝具材料の最小限の露出を保証します。一方向の空気も汚染の可能性を最小限に抑え周囲の部屋の空気から動物を保護します
    6. 出荷用コンテナーが開かれた後は、動物の全体的なヘルスを評価します。怪我や病気の動物のメモしておいてください
    7. は、適切なグループのサイズで組み立てられたケージに動物を配置します。グループ スペース規制と割り当てが実験的プロトコルに従ってする必要があります
    8. カバー ワイヤー バーふた付きケージです。ワイヤーのバーふたを蓋の上の 2 つの領域を作成する分周器をセキュリティで保護します
    9. は、適切な食品を選択し、線バー蓋の片側に食品を配置します。良い空気の循環を許可する 2 番目の側を空けてです
    10. 水は、水のボトルや自動散水システムを介して提供されます。水のボトルは、最近引き離されたマウスの彼ら、その水和のレベルを維持することができる使用されます。IVC のラックに配置される前に散水チューブを充電自動給水、ケージングします
    11. ラックのケージの場所。IVCs を使用して、ケージは、ラックの上に完全に従事していることと、シッパー チューブが給水システムに固定されているを確認します
  2. ケージは、従来のマウスを変更する
    1. ATS でケージを変更しました。各セッションの終わりに ATS を消毒します
    2. では一度に 1 つだけケージを開くことができます
    3. Caging は適切な寝具を用意し、動物の部屋に持って来られる材料を入れ子します。ATS にケージの数が少ない設定されます
    4. IVC ケージ内部のシッパー チューブとする必要がありますのシッパー チューブ内空気のデッド スペースを削除するシッパーに水を強制的に課金されます。正しく充電されている場合、マウスはそれから空気を削除するシッパー チューブに十分な圧力を提供することができない場合があります
    5. 動物を取り扱うときは最小限個人保護装置 (PPE) 要件、手袋、きれいな白衣またはボディス クラブ、微粒子マスク、安全メガネ
    6. 新しいケージに放置、ATS に変更する動物のケージを配置します
    7. 動物は、手で、パッド入りの鉗子の使用いずれか転送されます。手袋には、ケージの間またはマウスのグループ間が変更されます。ケージ間化学無毒で、手袋を消毒もできます
    8. は、特に男性のグループは建物のためのきれいなケージへの移行支援きれいなケージにマウスの営巣地を転送することが実証されています。その他の充実のアイテムにも新しいケージに転送します
    9. 新しいケージ ケージ上部またはフィーダーを配置すると、食品が追加されます
    10. バリア上部が新しいケージに配置され、ケージ、ラックに返されます
    11. IVC ケージはラックが空気と水のバルブが従事していることを確認するに正しくドッキングされている必要があります

2。免疫不全マウスを処理

    1. Immunocompromised 動物輸送コンテナーから開梱が無菌条件下でアンパックする必要があります。免疫欠損マウスを処理するすべての個人は、蒸気滅菌ガウン、マスク、髪ボンネット、滅菌手袋を着用しなければなりません。無菌テクニックを使用して、すべての回は、これらの動物を渡すでください
    2. すべての機器とケージングする必要がありますされて蒸気、紫外線で殺菌か殺菌滅菌ケージングの 2 つのオプションがあります、少なくとも 30 分間 70% エタノールに浸漬して化学的に: 標準、ラップされたケージングし蒸気滅菌、またはケージング照射により殺菌通常である-ベンダーによって。これらのケージは、使い捨てのユニットの 1 つ使用します
    3. 。 層流フード、フードの下でマウスを操作する前に
    4. は、送風機の営業と 70% エタノール散布されています。フードの送風機は、無菌の環境を維持するためにすべての回でに残しておきます。各使用後フードを消毒剤でスプレーしすべての残骸の一掃して再び 70% エタノールを噴霧します
    5. 最適な二人が免疫不全マウスの適切な受信に必要な: 無菌技術 (生殖不能の技術) を使用して動物を処理する 1 つと 1 つの汚染された項目 (非滅菌の技術者) を処理します。非滅菌の人がきれいな、長袖ガウン; を着用してください。白衣やスモック。マスク;ボンネット。フードに到達する必要滅菌室内の汚染を防ぐために滅菌手袋・
    6. は、前述したように層流フードを準備します。免疫不全動物専用フードを持っていることをお勧めします。そのフードは、紫外線 (UV) 殺菌灯使用のフードの内部を滅菌するために使用できますが装備されることをお勧めします。タイマーを利用してフードの表面が紫外線に十分な露出を持っているを確認する
    7. ボンネットに配置されているすべての供給の外観は外側の包装を含む 70% アルコールで噴霧されている食糧、水およびケージングの
    8. 輸送コンテナーは、フードに置かれる前に塩素二酸化溶液を吹き付けています。彼らは 15-30 分のため未開封のまま、フードに置かれ、一度します
    9. 指定された動物ハンドラーを滅菌食品とフードの下で水を開きます
    10. 非滅菌の技術者は、フードの下で出荷ボックスを開きます。フードと輸送用の箱の内側の内面との接触を避けるために非滅菌の技術者によって注意する必要があります
    11. 動物のハンドラーが滅菌のケージを開き、食料とケージの上に水を置くことによってケージを準備します。マウス出荷ボックスから削除し、無菌のケージに配置します
    12. 動物の条件は無菌動物のハンドラーで示されて。病気や、明らかな怪我を持っている動物が分離されます。動物の獣医の注意を必要とするとマークされたすべてのケージが be が他の動物の潜在的な汚染を減らすために最後に、処理、ケージを変更する、実験的操作を配置します
    13. 非滅菌の人はフードから住まれたケージが削除されます。ケージは、静的のケージとして標準的なラックや IVCs として換気ラック上に配置できます。IVCs でマウスは、温度調節を支援する追加のネスト材料が提供されなければならない
    14. 動物ハンドラーは、動物のグループの可能な交差汚染を避けるために各出荷コンテナーの後、手袋を変更ください。病気が発生した場合、動物の起源を追跡するケージのカードの出荷コンテナー番号が記録されます
    15. 未使用の消耗品は、元のコンテナーを密封することができます提供、将来使用するため保存できます。未使用の食糧は、ルームから削除されます
    16. マウスの実験的使用前に最低一週間順応期間を受ける必要があります
  1. ケージの免疫不全マウスの変更
    1. 、少なくとも毎週 1 回、またはより頻繁に必要と認められる場合にマウス ケージが変更されます
    2. フードの準備のための手順は準備、ケージし、人事 PPE は、動物の展開処理と同じです
    3. 動物は、手で、パッド入りの鉗子の使用いずれか転送されます。手袋が破れていたり、汚染されている場合、または動物がイリノイ州を表示されます、指定動物のハンドラーする必要がありますすべて 5-10 ケージ後 reglove
    4. 現れる病気の動物のケージは健康な動物の病原体や汚染物質に露出を避けるために順序を変更するケージの端に配置されます
    5. 食品や水は、次のスケジュールされたケージの変更前にケージに追加する必要がある場合に、行う必要があります無菌準備のフードの下に

マウスおよびラットを適切な世話これらの生物、生物医学研究に使用される動物の 90% 以上を占めていますので、実験の結果に重要な。ケア手順のすぐ出荷容器は、適切な住宅の条件を維持し、適切な食事を提供する適切な環境の確保、ケージを変更するから動物を解凍して起動。免疫不全など、いくつかの動物が実験目的のためにそれらを維持するために追加注意を必要とが、マウスおよび実験室のラットの大半に適用される一般的な手順があります

このビデオは標準と免疫と免疫不全動物の本質的なケア手順を説明します。そして最後に、異なる研究目的のため、科学者がこの知識を使用する方法を示すいくつかの例の実験を紹介します

病原体と接触して来ることができる輸送箱、移動中、すでに施設内収容動物にリスクをもたらす他の機関から動物を受け取るします。そのため、出荷コンテナーを開梱するとき、適切な手順を採用すべき

任意の動物を処理する前に適切な保護具や PPE を着用することが重要です。最小の PPE を着用する、白衣、手袋、安全メガネ、ほこりやアレルゲンへの暴露を減らす手術型マスク。次のステップは、着信の動物を適切なケージを選択することです。その後、適切な寝具材料を入れ子とケージを供給します。動物の到着する前に転送の準備ができているので、温度制御の受信ルームに準備されたケージを取る

発送到着時に受音室の安全な場所に輸送箱を配置。損害のコンテナーを確認し、すべての有害な病原体を破壊する外側の表面を消毒します。消毒液が製造元の推奨事項に従って、少なくとも 15-30 分、ボックスとの接触が確認します。その後、動物の転送駅、または ATS に容器を置きます。この駅では、高効率微粒子空気、または、HEPA フィルター、フード内の気流を提供しています。HEPA はアレルゲンからユーザーを保護し、汚染の可能性を最小限に抑え周囲の部屋の空気から動物を盾します。次に、出荷用コンテナーを開き、齧歯動物の全体的なヘルスを評価します。怪我や病気のように見える動物のメモしておきます。その後、適切なグループのサイズですでに組み立てられて檻に置いて、ワイヤー バーふた付きケージのカバー、2 つの領域を作成する分周器を確保します。適切な食品を選択し 1 つの側面に配置し、2 番目の面を良い空気の循環を可能にする開いたまま。最後に、動物はない自動給水ラックに置かれている場合、は、十分な水の供給を確保するための水のボトルを追加します。覚えて、ATS は、各セッションの終わりに消毒、消毒時に送風機がオフでなければなりません

ケージを変更する、適切な寝具の素材と新鮮なケージ ケージを 2 つの場所し、ATS を動物で使用されるケージします。手でまたはパッドの鉗子を使って動物を古いケージから新しいケージ 1 つ転送できます。両方これらのメソッドは、このコレクションの別のビデオで説明されています。動物のケージを 1 つだけを一度に開くことができますを覚えています。雄マウスのくずを持つ女性、転移と動物をアシストきれいなケージにマウスの営巣地を転送することが実証されています。ケージ上部を新しいケージに配置すると、一度は、新しいトップ古いケージの上から食品を転送し、必要に応じてより多くの食糧を追加します。バリア上部ラックにケージを返却して次に、します。手袋ケージ間やグループ間を変更することをお勧めします

ものを滅菌する必要がありますように免疫不全動物のため開梱手順は少し異なります。フード内部の送風機を使用する前に、少なくとも 24 時間にすることをお勧めします。Immunocompenent 動物の発送到着時にスプレー容器受音室の消毒液と 15-30 分のため未開封のままにしておきますが好きです。免疫不全マウス用に指定された ATS で 70% エタノールで 30 分動物を操作する前に層流フードをスプレーします。この展開活動に参加 2 人を持つことが理想的だ--一人無菌技術を使用して動物を扱う蒸気滅菌ガウンと滅菌手袋の二重のペアを着て滅菌技術者になるし、もう一方は非滅菌、技術者は汚染されたアイテムを処理するきれいな分離のガウンと手袋を身に着けています。両方を着用する必要があります、マスク、髪ボンネットおよび安全メガネ。

フード内側出荷コンテナーを開く前にすべての供給の場所しこれらのケージングとアルコールとの彼らの外観をスプレーします。貨物到着時に受信したアニマの場所とl は、フードにし、70% エタノールにもスプレーします。ベンダーによって照射による滅菌がされて使い捨てのユニットや蒸気滅菌、包まれている滅菌ケージング、いずれかの標準ケージングの 2 つのオプションがあります

滅菌食品、続いて輸送ボックスの開口部を開くことによって開梱手順を開始します。この時点で、ハンドラーは、滅菌手袋の最初のペアを破棄する必要があります。次に、非滅菌人滅菌ケージのラップを解除し、無菌ボンネットとワイヤー バーふたを削除し、フード逆さまに配置できます動物のハンドラーに渡します。その後、ケージの上のシッパー チューブは、ボンネットにある駅で水でいっぱいです。最後の動物のハンドラーでは、ケージに動物を配置、ワイヤ バーふた付き固定および食品を追加します、場所でボンネットを設定します。フード送風機は無菌の環境を維持するためにすべての回で、する必要がありますに注意してください。最後に、非滅菌の人はフードから住まれたケージを削除し、適切なラックの上に配置します。グループ間の相互汚染を防止する動物のハンドラーは、各出荷コンテナーの後手袋を変更する必要があります

免疫不全動物のケージを変更する、フード、ケージと PPE の準備は、これらの動物の解凍と同じ。転写法は同じ、無菌条件の下ではなく免疫動物

今の本質的なケアを提供する別の重要な側面である、動物のための適切な住宅事情を説明しましょう。マウスおよびラットは、主に靴箱タイプの寝具材料を含む固体底部でケージングで収容されます。典型的なマウスのケージは、75 平方インチは最大 5 大人のマウスのための十分なフロア スペースを提供します。その一方で、ラットのおりは 142 平方インチの面積、2 ラットには適して。静的なケージは通常ワイヤー バーふたで覆われる、フィルター材料は、ボンネットとしてケージの上に追加されます。個別換気ケージ、または, もワイヤー バー蓋とボンネットがケージに気流を提供するラックに配置されます。免疫不全動物に有益であるかもしれない静的ケージとして頻繁にケージを変更する必要がある

すべてのケージ システム食糧および給水のための規定があります。食品貯蔵用ワイヤー バーふたのセクションを使用またはいずれかのフィーダーを動物のケージ内に配置があります。食品は、動物によって汚ないように配置しなければなりません。水は水のボトル、ケージの上に配置を介して供給される通常自動水まき飲酒バルブを介してされるまたは内蔵動物ケージのコンポーネントです。バルブ オプションを飲み、ケージ、ラックに従事している水は動物動物の施設全体のニーズを満たすために設計されている自動散水システムのチューブに運ばれた

ケアおよび実験動物の使用のためのガイド の状態はすべてケージ実装は少なくとも 2 週間ごとを消毒する必要があります。いくつかのケージやアクセサリーは、臭気とエンクロージャ内アンモニアのレベルによって決まるより頻繁に変更する必要があります

今適切な食品と免疫と免疫不全動物の水の供給についてお話しましょう。変数のタンパク質、炭水化物、および脂肪組成と多くの市販のフィードがあります。理想的には、フィードでは、15-19% のタンパク質、44% の炭水化物、および 4-9% の脂肪を含むべきであります。免疫不全動物フィードが滅菌されていることを確認してください

水道水または RO 水は、逆浸透膜は、免疫動物の使用できますが、免疫不全の動物、水汚染のソースすることができるため、滅菌する必要。無菌水では pH は 2.5-3 の細菌の増殖を制限するために水を酸性、RO 水 8 リットル 12 モル塩酸 2 滴を追加することによって維持されます。個々 のボトルに水を注ぎ、アルミ箔でそれらをカバーします。オートクレーブ袋のシッパー チューブとボトルの蓋を別々 に配置し、蒸気滅菌用オートクレーブにすべてを置く

今動物のケアに欠かせない標準的な環境条件を説明しましょう

科学的に正当化される場合を除き、または動物が他のすべてと互換性がある場合はケージ レベルで社会的なハウジングは必須。紙小屋と環境を豊かにし材料を入れ子建物と穴を掘る、入れ子のような種固有の行動を展示する動物を順番ストレス レベルが減少し、動物の全面的な福利を増加可能します。ネスティング材料を同じケージで複数の男性マウスの住宅補助鎮静フェロモンの飽和は、スリーピング エリアがあります。前述のように、ケージを変更する時にきれいなケージに営巣地を移動を防ぎます侵略、特に男性、動物が新しい環境に導入されるよう。無胸腺裸の動物 1 つ追加寝具を提供することを検討してくださいし、体温調節を支援する用紙の種類入れ子の檻の中で材料を千切り

部屋レベルでマウスおよびラットの温度は 68 と 79 ° f. の間でなければなりません低レベルはリングテールと呼ばれる状態になることが部屋の湿度レベル 30 から 70 パーセント、必要があります。3 番目の部屋パラメーターは照明です。これには、光の強さとサイクルが含まれます。通常、動物の部屋は、12 時間ライト 12 時間暗い周期に設定されます。照明の強度は、部屋での活動に従って変わる必要があります。技術者が作業しているときは、高い照明レベルを使用できます。ただし、すべての活動が終了したら約 325 ルクスに低下する必要があります。最後に、部屋の中で空気の流れの制御が慎重にする必要がありますも。100% 新鮮な空気の 10-15 の空気の変化の最小値は、1 時間ごとを実行する必要があります。これは微生物や動物の部屋の臭いを減らす

最後に、研究者、住宅、食事や環境設定の実験で実験動物についてのこの知識を使用してどのように見てみましょう

前述したよう、実験動物は一般的にストレスを軽減、巣作り行動を展示し、研究者は、動物福祉の指標としてこのを使用しています。この実験では、科学者を開発、公平な巣を獲得するシステムを内蔵し、それに巣作り行動に関する研究外気温度の影響を使用します。温度の上昇が周囲温度動物福祉の役割を強調表示、スコアの大幅な低下を引き起こされるあなたが見ることができる

は、マウスおよびラット愛炭水化物、研究者が別のフィードを使用していることを考える動物の運動機能をテストするのには図形します。これは異なる種類の食品の取扱いタスク中に器用さを分析し、次の外科的または薬理学的介入に達する動作を調べることが含まれます

知られてマウスおよびラットが夜間、ライトアップ エリアを好むはありません最後に。科学者たちは、これらの種の不安を勉強するのに環境を構築するのにこの知識を使用します。たとえば、ここで研究単純なオープン フィールドに移入動物と野生型によって費やされる時間を勉強し、ノックアウト マウスの内側と外側に提出不安様行動の効果遺伝子の打撃を分析するためのゾーン

マウスおよびラットの必須ケア手順をゼウスの導入を見ただけ。今メジャーの理解が必要s 環境およびこれらの動物の処理は動物の健康に害を発生しません、また研究することができます異なる科学的な目標を達成するためにこれらのパラメーターを変更する方法を知っておくべきことを確認してください。いつも、見てくれてありがとうとして!

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