נהלי טיפול בסיסיים

דיור/הזדקנות

עכברים וחולדות שוכנים בעיקר בסימון מסוג קופסת נעליים עם תחתית מוצקה המכילה חומר מצעים. כלוב העכברים הטיפוסי של קופסת הנעליים מספק 75 אינצ'ים רבועים של שטח רצפה, אשר מתאים לכל היותר חמישה עכברים בוגרים. עם זאת, העיצוב הניסיוני עשוי לקרוא לקבוצות של ארבעה עכברים. במקרה זה, העכברים צריכים להיות שוכנים עם קבלת בקבוצות של ארבעה, כדי למנוע את ההפרעה של קבוצות חברתיות כאשר הניסוי מתחיל. באופן כללי, ציות עכברושים מאפשר מקסימום של שני בעלי חיים בוגרים בוגרים. אם החולדות ישכנו לטווח ארוך, הם צריכים להיות הוקמו בדיור זוג.

הכלובים יכולים להיות סטטיים או מאווררים בנפרד (IVC). כלובים סטטיים מכוסים במכסה מוט תיל או מיושבים על מתלה מתחת למדף שהוא אז החלק העליון של הכלוב. חומר המסנן נוסף מעל החלק העליון של הכלוב כמצנפת מעל מכסה מוט התיל, או כגיליון נייר סינון מעל מדפי המדף. IVCs מוגדרים ככלוב, מכסה מוט תיל ומצנפת המונחים על מתלה המספק זרימת אוויר לכלוב. השימוש IVCs מבטל את הצורך לשנות את הכלוב לעתים קרובות כמו כלובים סטטיים משתנים.

מערכות כלוב סטנדרטיות מספקות מקור מים ואזור לחלוקת מזון. מים יכולים להיות מסופקים באמצעות בקבוק מים להציב על החלק העליון של הכלוב או באמצעות צינור לגימה כי הוא מרכיב מובנה של כלוב בעלי חיים. כאשר הכלוב עוסק על מתלה, מים מועברים לתוך צינור הלגימה עבור מערכת השקיה אוטומטית שנועדה לענות על הצרכים של החיה ברחבי מתקן בעלי החיים. הזדקנות חייבת להיות מוכנה כראוי כדי לספק טיפול נאות לבעלי החיים. ישנם גם מאכילים להציב בתוך כלוב בעלי חיים, או קטע של מכסה מוט תיל משמש לאחסון מזון. מזון חייב להיות ממוקם כך שהוא לא מלוכלך על ידי בעלי החיים.

המדריך לטיפול ושימוש בחיות מעבדה² ("המדריך") קובע כי יש לחטא את כל כלי ההשמדה לפחות כל שבועיים. כמה כלובים ואביזרים ייתכן שיהיה צורך לשנות לעתים קרובות יותר כפי שהוכתב על ידי רמת הריח והאמוניה במתחם. באופן כללי, IVCs מתוכננים להשתנות כל שבועיים אלא אם כן יש ארבעה זכרים או יותר או נקבה עם המלטה; מארזים אלה עשויים לדרוש שינוי שבועי. כמו שינוי כלוב היא הזדמנות עבור העכברים להיחשף פתוגנים, שינוי של caging עבור עכברים לקויים במערכת החיסון צריך להיעשות לעתים רחוקות ככל האפשר.

דיאטה

ישנם קומפוזיציות רבות של דיאטות זמין עם וריאציות חלבון, פחמימות, ורמות השומן. בדרך כלל, הזנות צריך להיות מורכב 15-19% חלבון, 44% פחמימות, ו 4-9% שומן. מזון עם תכולת שומן מוגברת משמש לעתים קרובות עבור רבייה מושבות כדי לשפר את הרבייה. כמו המזון יכול להיות מקור של זיהום עבור עכברים immunocompromised, זה חייב להיות גם מעוקר קיטור או מוקרן. מזון הכפוף לתהליך השעבוד האוטומטי חייב להיות מנוסח במיוחד כדי לעמוד בתהליך. עם זאת, תהליך ההקרנה אינו משנה את תכולת המזון.

מים הם מקור פוטנציאלי נוסף לזיהום עבור בעלי החיים המחסור במערכת החיסון. מים צריכים להיות מעובדים באמצעות סינון אוטומטי או סינון הכולל את המים העוברים דרך מסנן UV. כדי לחטא מים באוטוקלבה, בקבוקי מים בודדים מכוסים בנייר אלומיניום. מכסי בקבוק עם צינורות לגימה מעוקרים בנפרד בשקית אוטומטית. החמצת המים ל- pH של 2.5-3 מסייעת לשלוט באורגניזמים חיידקיים הצמיחה בבקבוקי המים. מים חומציים על ידי הוספת שתי טיפות של 12 מול (M) חומצה הידרוכלורית (HCl) לשמונה ליטרים של אוסמולליות הפוכה (RO). ניתן להשתמש במערכות השקיה אוטומטיות עם סדרה של סינון בכל המערכת הכוללת מסנני חלקיקים ומסנן אור אולטרה סגול.

סביבה

יש לשלוט היטב בתנאים הסביבתיים בתוך מתקן לטיפול בבעלי חיים. תקנות והנחיות פדרליות קבעו את הסטנדרטים לטיפול וטיפול בבעלי חיים נפוצים. תאורה, טמפרטורת הסביבה, לחות וזרימת אוויר מסופקים כדי לענות על הצרכים הפיזיולוגיים של בעלי החיים. למעט הצורך בטמפרטורת חדר מעט מוגברת, הפרמטרים עבור בעלי החיים האימונו-תימוצריים זהים לאלה של בעלי חיים קונבנציונליים. חיות העירום האתימיות דורשות גם מצעים נוספים וחומרי קינון מסוג נייר גרוסים בכלובים שלהם כדי לסייע בתרמו-ספיגה.

יש לשמור על חדרי בעלי חיים בטמפרטורה שבין 68-72 מעלות פרנהייט עם רמת לחות של 40-60%. ² רמות לחות מתחת ל -40% יכולות לגרום לזנב הטבעת של עכברים וחולדות, מצב שגורם לעור הזנב להתייבש עד כדי כך שהוא מכווץ סביב הזנב, מה שעלול להוביל לזנב מתנודד. מחזורי תאורה יש להגדיר כדי למנוע לחצים לבעלי החיים הנגרמים על ידי photoperiods לא הולם או עוצמת אור. בדרך כלל, הצילומים הם 12 שעות ו-12 שעות חופש. עוצמת התאורה צריכה להשתנות בהתאם לפעילות בחדר. כאשר טכנאים עובדים בחדר החיות, ניתן להשתמש ברמות תאורה גבוהות יותר. עם זאת, יש להוריד את התאורה לכ-325 לוקס לאחר סיום כל הפעילות. ² האורות צריכים להיות על שעון הים והמחזורים מאומתים באמצעות מערכות ניטור. על פי הוראות המדריך, חדרי בעלי חיים חייבים לכוון לפחות 10-15 שינויי אוויר של 100% אוויר צח לשעה. ² שינויי אוויר מפחיתים חיידקים וריחות בחדר החיות. בחדרי בעלי חיים צפופי אוכלוסין, ייתכן שיהיה צורך להגדיל את מספר שינויי האוויר לשעה.

גורמים סביבתיים ברמת הכלוב כוללים את סוג ההחלפה, המצע המשמש בתוך הכלוב, מערכת אספקת המים והתזונה. דיור חברתי הוא חובה אלא אם כן מוצדק מבחינה מדעית, או בעל חיים אינו עולה בקנה אחד עם כל האחרים. הוראות העשרה סביבתית, כגון בקתות נייר וחומרי קינון, מאפשרות לבעלי החיים להפגין התנהגויות ספציפיות למינים, אשר בתורן מקטין את רמת הלחץ ומגביר את הרווחה הכללית של בעלי החיים. חומרי קינון מספקים גם אזור שינה רווי בפרומונים מרגיעים המסייעים בדיור של עכברים זכרים מרובים באותו כלוב. אזור הקינון מועבר לכלוב הנקי עם שינוי הכלוב כדי לסייע במניעת תוקפנות אצל הזכרים כשהם נכנסים לסביבה חדשה. ³

1. טיפול בעכברים חיסוניים (קונבנציונליים)

הוכח כי הפרעות חיסוניות של עכברים דומות מאוד לאלה בבני אדם. ² מכיוון שלבעלי חיים אלה יכולות אימונולוגיות מוגבלות, נהלים בטיפול ובטיפול בבעלי חיים אלה נועדו למזער את הסיכון למחלות זיהומיות באמצעות בקרות הנדסיות, ציוד מגן אישי לצוות הטיפול בבעלי חיים, והליכי הפעלה סטנדרטיים; אלה מפחיתים את הזיהום של הזדקנות וציוד אחר שבו בעלי החיים נמצאים במגע.

1. הוצאה ממכולות: קבלת בעלי חיים ממוסדות אחרים או מוכרי בעלי חיים מהווה סיכון לבעלי החיים שכבר שוכנו במתקן בעלי החיים. במהלך המעבר, תיבות הובלת בעלי החיים יכולות לבוא במגע עם סוכנים פתוגניים. לכן, יש לבצע הליך תקין בעת פרקת המכולות.
   1. דרישות ציוד מגן אישי מינימלי (PPE) הן כפפות, חלוק מעבדה נקי או סקראבס, מסכת חלקיקים ומשקפי בטיחות בעת הטיפול בבעלי החיים.
   2. בחר את הכלוב המתאים, כולל מכסה מוט התיל ואת החלק העליון של המחסום. הכלוב צריך להיות מרוהט עם מצעים מתאימים וחומרי קינון. יש להכין את כל ההסתה ולהניח אותה באזור המקבל לפני הגעת בעלי החיים.
   3. עם ההגעה, תיבות התחבורה ממוקמות בחדר מאובטח ומבוקר בטמפרטורה. לאחר מכן, בדוק את המיכל לנזק.
   4. לחטא את המשטחים החיצוניים של מיכל המשלוח עם מוצר כולין דו חמצני להרוס כל פתוגנים מזיקים. ודא כי חומר החיטוי נמצא במגע עם התיבה בהתאם להמלצות היצרנים, בדרך כלל 15-30 דקות.
   5. מניחים את המיכל בתחנת העברת בעלי חיים (ATS). ה- ATS מספק זרימת אוויר מסוננת HEPA בתוך מכסה המנוע המספקת הגנה מפני אלרגנים על ידי יצירת מחסום אוויר ואקום בין המשתמש לאזור העבודה. זה מבטיח חשיפה מינימלית לשיער /קשקשים של בעלי חיים וחומר מצעים בכלוב. האוויר החד-כיווני מגן גם על בעלי החיים מפני אוויר החדר שמסביב, וממזער את הסיכוי לזיהום.
   6. לאחר פתיחת המכולה, להעריך את הבריאות הכללית של בעלי החיים. תרשמו שימו לב לכל החיות הפצועות או החולות.
   7. מניחים את החיות בכלובים שהורכבו בגדלים הקבוצתיים הנכונים. התקבצות צריכה להיות בהתאם לתקנות החלל, והפרוטוקול הניסיוני שאליו יוקצו.
   8. כסו את הכלוב עם מכסה מוט התיל. אבטחו את המחולק על מכסה התיל כדי ליצור שני אזורים במכסה.
   9. בחר את האוכל המתאים והניח את האוכל בצד אחד של מכסה מוט התיל. השאר את הצד השני פתוח כדי לאפשר זרימת אוויר טובה יותר.
   10. מים יסופקו באמצעות בקבוקי מים או מערכת השקיה אוטומטית. בקבוקי מים משמשים לעכברים שננגמו לאחרונה כדי להבטיח שהם יוכלו לשמור על רמות ההידרציה שלהם. עבור IVC caging עם השקיה אוטומטית, לטעון את צינור השקיה לפני הנחת אותו על המדף.
   11. הנח את הכלוב על מתלה. אם אתם משתמשים בהפריה 40, בדקו שהכלוב מעורב באופן מלא על המדף, ושצינור הלגימה מאובטח למערכת השקיה.
2. כלוב שינוי עכברים קונבנציונליים
   1. כלובי בעלי חיים מוחלפים ב-ATS. ATS מחוטא בסוף כל מפגש.
   2. ניתן לפתוח רק כלוב אחד בכל פעם.
   3. החלפה מוכנה עם המצעים המתאימים וחומרי הקינון מובאת לחדר החיות. מספר קטן של כלובים ממוקמים ב- ATS.
   4. כלובי IVC עם צינורות לגימה פנימיים חייבים להיות מחויבים כדי לכפות מים לתוך הלגימה כדי להסיר את החלל המת של האוויר בצינור הלגימה. אם לא טעון כראוי, העכברים לא יוכלו לספק מספיק לחץ על צינור הלגימה כדי להסיר את האוויר ממנו.
   5. דרישות ציוד מגן אישי מינימלי (PPE) הן כפפות, חלוק מעבדה נקי או סקראבס, מסכת חלקיקים ומשקפי בטיחות בעת הטיפול בבעלי החיים.
   6. כלוב של בעלי חיים שיש לשנות ממוקם בכלוב חדש, ולאחר מכן ב- ATS.
   7. בעלי חיים מועברים ביד או באמצעות מלקחיים מרופדים. כפפות משתנות בין כלובים או בין קבוצות של עכברים. כפפות יכולות גם להיות מחוטאות עם כימיקל לא רעיל בין כלובים.
   8. הוכח כי העברת אזור הקינון של העכברים לכלוב נקי מסייעת במעבר לכלוב הנקי, במיוחד עבור זכרים ששוכנים בקבוצה. פריטי העשרה אחרים מועברים גם הם לכלוב החדש.
   9. לאחר החלק העליון של הכלוב או המאכיל ממוקם בכלוב החדש, מזון מתווסף.
   10. החלק העליון של המחסום ממוקם על הכלוב החדש וכלוב מוחזר למדף.
   11. כלובי IVC חייבים להיות מעוגנים כראוי לתוך המדף כדי להבטיח כי שסתומי האוויר והמים עוסקים.

2. טיפול בעכברים אימונו-קום-מובטחים

1. פרק ממכולות משלוח
   1. יש לפרוק בעלי חיים אימונוקום בתנאים סטריליים. כל האנשים המטפלים בעכברים לקויי מערכת החיסון חייבים ללבוש שמלת אדים מעוקרת, מסכה, מצנפת שיער וכפפות סטריליות. טכניקה אספטית יש להשתמש בכל עת בעת מסירת בעלי חיים אלה.
   2. כל הציוד וההערכה היו צריכים להיות מעוקרים על ידי קיטור, קרינת UV, או מעוקר כימית עם טבילה ב 70% אתנול במשך 30 דקות לפחות יש שתי אפשרויות לעריקור סטרילי: החלפה סטנדרטית כי כבר עטוף קיטור מעוקר, או החלפה כי הוא מעוקר - בדרך כלל באמצעות הקרנה - על ידי הספק. הכלובים האלה הם שימוש אחד, יחידות חד פעמיות.
   3. לפני מניפולציה עכברים מתחת מכסה המנוע זרימה למינאר, מכסה המנוע מרוסס עם 70% אתנול עם המפוח פועל. מפוח מכסה המנוע צריך להישאר על כל עת כדי לשמור על הסביבה סטרילית. לאחר כל שימוש, מכסה המנוע מרוסס בחומר חיטוי וננגב מכל הפסולת ושוב מרוסס ב-70% אתנול.
   4. באופן אופטימלי, שני אנשים נדרשים לקבלתם התקינה של העכברים האימונוקוםיים: אחד לטיפול בבעלי החיים בטכניקות אספטיות (הטכנאי הסטרילי), ואחד שיטפל בפריטים מזוהמים (הטכנאי הלא סטרילי). האדם הלא סטרילי עדיין צריך ללבוש שמלה נקייה עם שרוולים ארוכים; חלוק מעבדה או חלוק; מסכה; מצנפת; וכפפות סטריליות כדי למנוע זיהום של הפנים סטרילי אם הם צריכים להגיע לתוך מכסה המנוע.
   5. הכן מכסה מנוע זרימה למינאר כפי שתואר בעבר. עדיף שיהיה ברדס המוקדש לבעלי חיים אימונוקומוניים. מומלץ כי מכסה המנוע להיות מצויד באורות עיקור אולטרה סגולים (UV) שניתן להשתמש בהם כדי לחטא את פנים מכסה המנוע בין שימושים. שעון הים מנוצל כדי להבטיח כי פני השטח של מכסה המנוע יש חשיפה נאותה לקרני UV.
   6. החלק החיצוני של כל האספקה המונחת במכסה המנוע מרוסס ב-70% אלכוהול, כולל האריזה החיצונית של מזון, מים והזדקנות.
   7. מכולות מרוססות בתמיסת כלור דו-חמצני לפני שהן ממוקמות במכסה המנוע. לאחר שהונחו במכסה המנוע, הם יישארו פתוחים במשך 15-30 דקות.
   8. המטפל המיועד לבעלי חיים פותח את המזון והמים הסטריליים מתחת למכסה המנוע.
   9. הטכנאי הלא סטרילי פותח את תיבת המשלוח מתחת למכסה המנוע. יש להקפיד על ידי הטכנאי הלא סטרילי כדי להימנע ממגע עם המשטחים הפנימיים של מכסה המנוע ובפנים של תיבת המשלוח.
   10. המטפל בבעלי החיים פותח את הכלוב הסטרילי, ומכין את הכלוב על ידי הנחת מזון ומים על ראש הכלוב. העכברים מוסרים מקופסת המשלוח ומונחים בכלוב הסטרילי.
   11. מצב בעלי החיים הוא ציין על ידי המטפל בבעלי חיים סטריליים. כל בעלי חיים שנראים חולים או שיש להם פציעות ברורות יופרדו. כל הכלובים המסומנים בבעלי חיים הזקוקים לתשומת לב וטרינרית יוצבו לטיפול, שינוי כלוב או מניפולציה ניסיונית אחרונה, כדי להפחית את הזיהום הפוטנציאלי של בעלי חיים אחרים.
   12. האדם הלא סטרילי יסיר את הכלוב המאוכלס מהשכונה. ניתן להניח כלובים על מתלה סטנדרטי ככלובים סטטיים, או על מתלה מאוורר כמו IVCs. בעירוי, העכברים צריכים להיות מסופקים עם חומרי קינון נוספים כדי לסייע בוויסות תרמי.
   13. המטפל בבעלי חיים צריך להחליף כפפות לאחר כל מכולה כדי למנוע זיהום צולב אפשרי של קבוצות של בעלי חיים. מספר המכולה של המשלוח נרשם בכרטיס הכלוב כדי לעקוב אחר מקור בעלי החיים במקרה של מחלה.
   14. ניתן לשמור חומרים מתכלים שאינם בשימוש לשימוש עתידי בתנאי שניתן יהיה לאטום מחדש את הגורם המכיל המקורי. מזון שאינו בשימוש מוסר מהחדר.
   15. עכברים צריכים לעבור תקופת התאקלות של שבוע לפחות לפני השימוש הניסיוני.
2. החלפת כלוב לעכברים אימונוקום
   1. כלובי העכבר משתנים לפחות פעם בשבוע, או לעתים קרובות יותר אם יש צורך בכך.
   2. צעדים להכנת מכסה המנוע, הכנת כלוב, PPE כוח אדם זהים עבור פרקת בעלי החיים.
   3. בעלי חיים מועברים ביד או באמצעות מלקחיים מרופדים. המטפל המיועד בבעלי חיים צריך reglove לאחר כל 5-10 כלובים, אם הכפפות קרועות או מזוהמות, או אם בעל חיים נראה חולה.
   4. כל כלובים עם בעלי חיים שנראים חולים יוצבו בסוף הסדר המשתנה של הכלוב, כדי למנוע חשיפה אפשרית של בעלי חיים בריאים לפתוגנים או מזהמים.
   5. אם יש להוסיף מזון ו/או מים לכלוב לפני שינוי הכלוב המתוכנן הבא, יש לעשות זאת באופן טפיטי מתחת למכסה המנוע המוכן.

הטיפול והטיפול הנכון בבעלי חיים המשמשים במחקר ביו-רפואי חיוניים לתוצאות הניסויים. תקנות והנחיות שנקבעו מכתיבות רבות מהפרקטיקות שבהן נעשה שימוש. עם זאת, נדרשים אמצעים נוספים לעכברים וחולדות שיש להם ליקויים במערכת החיסון כדי למתן חשיפה מקרית לפתוגנים אופורטוניסטיים. כאשר פרקטיקות לדבוק נהלים שנקבעו, הבריאות והרווחה של בעלי החיים הניסיוניים משופרת, וכתוצאה מכך ניסיוני טוב יותר מושגים.