Summary
हम इस प्रोटोकॉल में प्रदर्शित कैसे बनाना और एक माइक्रो ड्राइव सरणी, जो चूहों में पुरानी electrophysiological रिकॉर्डिंग के लिए डिजाइन किया गया था के साथ उपयोग के लिए शर्त tetrodes. इसके अलावा, हम माइक्रो ड्राइव सरणी निर्माण, जो जमीन तारों और एक सुरक्षात्मक शंकु स्थापित शामिल की अंतिम चरण वर्णन.
Abstract
tetrode, चार इलेक्ट्रोड का एक बंडल, vivo में कई न्यूरॉन्स की एक साथ रिकॉर्डिंग के लिए एक महत्वपूर्ण उपकरण साबित हो गया है. tetrode के चैनलों पर कार्रवाई संभावित हस्ताक्षर के अंतर आयाम बहु इकाई संकेतों से एकल इकाई गतिविधि के अलगाव के लिए अनुमति देता है. ठीक stereotaxic स्थान और tetrode की गहराई को नियंत्रित करने की क्षमता मस्तिष्क क्षेत्रों के पार समन्वित तंत्रिका गतिविधि के अध्ययन के लिए महत्वपूर्ण है. एक माइक्रो ड्राइव सरणी के साथ संयोजन में, यह संभव है सटीक और सप्ताह के लिए दिनों के पाठ्यक्रम पर कई tetrodes के स्थिर नियंत्रण स्थान हासिल है. इस प्रोटोकॉल में, हम का प्रदर्शन कैसे बनाना और हालत tetrodes बुनियादी उपकरणों और सामग्री का उपयोग, एक बहु ड्राइव पुरानी tetrode सरणी में tetrodes स्थापित में vivo चूहे में रिकॉर्डिंग, माइक्रो - ड्राइव सरणी के लिए जमीन तार कनेक्शन बनाने, और माइक्रो ड्राइव सरणी पर एक सुरक्षात्मक शंकु देते हैं क्रम में करने के लिए पर्यावरण के साथ शारीरिक संपर्क से tetrodes की रक्षा.
Protocol
1. Tetrodes के निर्माण
- एक 50 सेमी लंबे समय प्राप्त करने के द्वारा एक tetrode का निर्माण शुरू polyimide अछूता, एक 12.5 माइक्रोन व्यास कोर के साथ तार नी क्रोम. आधे में तार मोड़ो. जोड़ी के साथ अपनी उंगलियों को चलाने के लिए उन्हें एक साथ रहना. सुनिश्चित करें कि तारों की जोड़ी को अपनी पूरी लंबाई भर में अच्छा संपर्क है.
- दोनों सिरों को एकजुट रखने के द्वारा जोड़ी फिर मोड़ो. लगता है कि एक छोर पर गठित पाश kinked नहीं है. ताकि चार युक्तियाँ गठबंधन कर रहे हैं गैर looped अंत पर चार तार कट.
- अगले कदम के लिए, आप एक संशोधित मगरमच्छ क्लिप, एक motorized मोड़ डिवाइस, और मोड़ डिवाइस के ऊपर एक क्षैतिज पट्टी की आवश्यकता होगी. मगरमच्छ क्लिप क्लिप के आधार पर एक प्लास्टिक की पट्टी gluing द्वारा संशोधित किया गया है. कहाँ तार सुझावों को उजागर कर रहे हैं, चार तारों को एक साथ दबाना संशोधित मगरमच्छ क्लिप के साथ. क्षैतिज पट्टी पर तारों के पाश रुको. Motorized चरण में मगरमच्छ क्लिप रखें.
- 80 घड़ी वार 40 काउंटर घड़ी तार बंडल करने के लिए लगभग तीन मिनट के पाठ्यक्रम पर वार twists के द्वारा पीछा किया twists लागू करें. इन मानकों को अपनी आवश्यकताओं के अनुसार अलग किया जा सकता है.
- Tetrode घुमा के बाद पूरा हो गया है, तारों के साथ हीटिंग द्वारा एक गर्मी बंदूक (420 डिग्री सेल्सियस या 790 ° एफ) के साथ तीन अलग अलग कोणों से, फ्यूज मध्यम कम प्रवाह का उपयोग कर. प्रत्येक कोण के लिए, 1-2 सेमी नीचे तार बंडल जहां विभाजन शुरू, गर्मी बंदूक नीचे चलाने और एक 2 सेमी की दूरी पर के बारे में 5 सेकंड के लिए तारों से. सावधानी के रूप में उच्च तापमान पूरी तरह इन्सुलेशन पिघल और शॉर्ट सर्किट के लिए नेतृत्व का प्रयोग करें.
- अब जब कि तार आपस में जुड़े हुए है, घुमा तंत्र से धीरे मगरमच्छ क्लिप उठाने tetrode पर तनाव को राहत देने के द्वारा tetrode, हटाने और मगरमच्छ क्लिप के निकट tetrode में कटौती. अन्य अंत में, ऐसी है कि वहाँ समान लंबाई के तार के चार गैर बंधुआ किस्में हैं पाश में कटौती.
- अगले, धीरे से एक नरम इत्तला दे दी चिमटी से नोचना के साथ तार को झुकने से शीर्ष पर अलग - अलग किस्में अलग.
- tetrode अब माइक्रो - ड्राइव सरणी में लोड करने के लिए तैयार है. 21 से 25 अधिक tetrodes बनाओ और उन्हें एक धूल मुक्त बॉक्स में दुकान जब तक यह tetrode लदान प्रक्रिया के लिए समय है.
2. माइक्रो ड्राइव सरणी में tetrodes लोड हो रहा है और जमीन तार
- आगे बढ़ना करने के लिए, आप एक पूरी सरणी सूक्ष्म ड्राइव की आवश्यकता होगी. अगर आप अभी तक एक नहीं बनाया है, 'में vivo पुरानी रिकॉर्डिंग के लिए लघु ड्राइव सरणी ड्राइव निर्माण:' वीडियो के लिए उल्लेख हमारे डिजाइन की योजना में, tetrode एक संबंधक हार्डवेयर के अंत में संलग्न किया जाएगा, और के माध्यम से चलेंगे ऐसी है कि इलेक्ट्रोड सुझावों माइक्रो ड्राइव सरणी के आधार से नीचे विस्तार माइक्रो ड्राइव में वाहक ट्यूब polyimide.
- शुरुआत से पहले, कि संबंधक बोर्ड के एक छोर पर संलग्न किया जा सकता है, और दूसरे छोर पर, एक panavise द्वारा clamped किया जा सकता है एक ड्राइव धारक का निर्माण. इस उदाहरण में, ड्राइव धारक मिल अधिकतम एक एक्स - acto चाकू हैंडल (चित्रा -1 सी) के एक छोर से चिपके संबंधक है.
- नरम इत्तला दे दी चिमटी के साथ tetrode होल्डिंग और एक त्रिविमेक्ष का उपयोग करने में tetrode की नोक धक्का एक सूक्ष्म ड्राइव के वाहक ट्यूब polyimide. ट्यूब में tetrode पुश जब तक व्यक्तिगत इलेक्ट्रोड तारों ड्राइव सरणी के शीर्ष पर संबंधक बोर्ड के करीब हैं. गुत्थी या तार मोड़ के रूप में है कि tetrode कारण सीधा बजाय एक कोण, पर मस्तिष्क में प्रवेश करेगा, और tetrode की अखंडता को कमजोर होगी सावधान रहें.
- धीरे उनके संबंधित छेद में इलेक्ट्रोड इंटरफ़ेस नरम इत्तला दे दी चिमटी का उपयोग कर बोर्ड में चार तारों के दूसरे छोर फ़ीड. फिर, तारों kinking या झुकने से बचें. जगह में सभी चार तारों के साथ, चिमटा है कि एक छोटा निचले जबड़े की एक जोड़ी के साथ उनके छेद में सोने की पिन धक्का. जब पिन छेद में धकेल रहे हैं, वे तार इन्सुलेशन पट्टी और एक विद्युत कनेक्शन बनाने जाएगा.
- बाद में संदर्भ के लिए, माइक्रो ड्राइव और इलेक्ट्रोड अंतरफलक बोर्ड पर पिन की स्थिति के बीच मैपिंग का ट्रैक रखने के.
- 18 tetrodes की कुल लोड हो रहा है जारी रखें. तीन सरणी पर शेष माइक्रो ड्राइव संदर्भ इलेक्ट्रोड घर के लिए इस्तेमाल किया जाएगा. प्रत्येक संदर्भ इलेक्ट्रोड एक tetrode है कि केवल चार unbonded तार समाप्त होता है में से एक का उपयोग करता है से बना है. संदर्भ इलेक्ट्रोड देते हैं, लोड हो रहा है प्रक्रिया का पालन करें, लेकिन संबंधित संदर्भ इलेक्ट्रोड पिन संबंधक बोर्ड पर केवल चार इलेक्ट्रोड की एक देते हैं.
- यदि आप बहु साइट रिकॉर्डिंग की योजना बना रहे हैं, यह बाहर tetrodes से समय के आगे संबंधक बोर्ड कनेक्शन की योजना सार्थक हो सकता है. यह प्रयोगों के दौरान गलत tetrode समायोजन की संभावना को कम करना चाहिए.
- एक बार tetrode लोड हो रहा है पूरा हो गया है, दो जमीन तार, पशुओं के लिए और एक सुरक्षात्मक शंकु के लिए बनाते हैं. एक 6 'लंबे अछूता इस्पात तार (पाठ: 0.005' व्यास) काटें और इन्सुलेशन के 3 मिमी निकालने के लिए, धातु चिमटी का उपयोग कर तार के प्रत्येक के अंत से. फिर एक 4 में कटौती'लंबे समय से अछूता इस्पात तार (पाठ: 0.005' व्यास). इन्सुलेशन के एक छोर और दूसरे छोर पर 1 सेमी में 3 मिमी निकालें.
- 6 'जमीन तार का ड्राइव माइक्रो सरणी के किनारे पर छेद के माध्यम से और ऊपर अंतरफलक बोर्ड की ओर. इलेक्ट्रोड अंतरफलक बोर्ड के लिए नामित जमीन छेद पर एक सोने की पिन के साथ उजागर तार कनेक्ट. यह तार जानवर की खोपड़ी से कनेक्ट करेगा.
- मार्ग 4 'जमीन तार पहले से स्थापित जमीन तार करने के लिए समानांतर. 3 मिमी छीन इलेक्ट्रोड इंटरफ़ेस दूसरे नामित जमीन छेद पर एक सोने की पिन का उपयोग कर बोर्ड अंत कनेक्ट. इस तार के बाद एक सुरक्षात्मक कोन है, जो एक छोटे फैराडे पिंजरे के रूप में कार्य करने के लिए शोर बटोरना कम हो जाएगा करने के लिए जोड़ा जाएगा. अब हम जोड़ने के तारों को समाप्त कर रहे हैं और हमारे tetrodes शोधन के साथ आगे बढ़ सकते हैं.
3. Tetrodes की लंबाई निर्धारित
- इस प्रक्रिया में हमारा लक्ष्य इतना है कि वे अब थोड़ा लक्ष्य मस्तिष्क संरचना का गहराई से सभी tetrodes में कटौती है. हमारे उदाहरण में, माइक्रो ड्राइव 5-6 मिमी, कई neocortical क्षेत्रों और एक वयस्क चूहे के पृष्ठीय हिप्पोकैम्पस तक पहुँचने के लिए पर्याप्त की एक अधिकतम यात्रा के लिए डिजाइन किए हैं. सबसे पहले, सभी सूक्ष्म ड्राइव ताकि tetrodes ज़्यादा से ज़्यादा उजागर कर रहे हैं कम है. इसके साथ ही लंबाई है कि लगभग 5 मिमी वांछित अंतिम तेज ठीक कैंची की एक जोड़ी का उपयोग लंबाई की तुलना में अब कर रहे हैं के लिए सभी tetrodes कटौती.
- अंतिम कटौती के लिए, एक panavise में दाँतेदार कैंची की एक जोड़ी तैयार. एक मामूली कोण नीचे के साथ और ऊपर का सामना करना पड़ रहा serrations के साथ एक संभाल दबाना, जबकि अन्य झूलने संभाल छोड़ने.
- अब पूरी तरह से सूक्ष्म ड्राइव बदल द्वारा अपने गाइड प्रवेशनी में सभी tetrodes वापस लेने.
- एक त्रिविमेक्ष का प्रयोग है, पूरी तरह से अपने प्रवेशनी से एक tetrode बाहर का विस्तार. गाइड प्रवेशनी से वांछित दूरी पर एक शासक, स्थिति दाँतेदार कैंची का उपयोग करना. धीरे धीरे और धीरे से एक चिकनी आंदोलन के साथ tetrode काटा. इस tetrode कटौती के बाद किया गया है, 3-4mm द्वारा माइक्रो ड्राइव वापस ले लें. प्रत्येक tetrode के लिए इस प्रक्रिया को दोहराएँ जब तक सभी कट गया है. इस बिंदु पर आप चढ़ाना सोने के लिए तैयार हैं.
4. Tetrodes और गुणवत्ता की जांच के गोल्ड चढ़ाना
गोल्ड nichrome tetrode तार चढ़ाना दीर्घकालिक स्थिर रिकॉर्डिंग के लिए महत्वपूर्ण है. यह जंग और biocompatibility में सुधार रोकता है.
- बाहरी मोड में प्रतिबाधा मीटर और ऑडियो आउटपुट (चित्रा 1 दिन) के साथ डीसी चेक मोड में वर्तमान जनरेटर सेटअप. प्रत्येक tetrode भीतर चैनलों के छह संभव जोड़े वर्तमान जनरेटर के दो सुराग, टच और ऑडियो प्रतिक्रिया का उपयोग यह निर्धारित करने के लिए अगर शॉर्ट्स जोड़े के बीच मौजूद हैं. यदि एक छोटी मौजूद है, दाँतेदार कैंची और परीक्षण के साथ tetrode फिर से फिर से कटौती. यदि समस्या बनी रहती है, tetrode त्यागें और इसे बदलने के.
- जब कोई शॉर्ट्स सभी tetrodes के भीतर मौजूद सभी माइक्रो ड्राइव नीचे जाने के सभी tetrodes के रूप में बाहर तक के रूप में संभव विस्तार.
- इलेक्ट्रोड प्रतिबाधा (चित्रा 1e) की जाँच के लिए उपकरण विन्यास संशोधित करें. अब मानक सोना चढ़ाना समाधान के एक स्नान में सभी tetrodes के सुझावों डुबकी. सोने स्नान विद्युत प्रतिबाधा मीटर की सकारात्मक नेतृत्व करने के लिए जुड़ा हुआ है. संबंधक बोर्ड पर संगत पिन प्रतिबाधा मीटर के नकारात्मक नेतृत्व छू द्वारा इलेक्ट्रोड के प्रतिबाधा की जाँच करें.
- उपाय और सूक्ष्म ड्राइव सरणी पर हर तार के प्रतिबाधा रिकॉर्ड. सामान्य मूल्यों MOhm 1-3 से लेकर.
- वर्तमान जनरेटर पर, 1-3 μA के बीच मौजूदा सेट. अगला, सुरक्षित संबंधक बोर्ड पर पिन करने के लिए प्रतिबाधा मीटर के नकारात्मक नेतृत्व देते हैं. विद्युत विन्यास (चित्रा 1f) में उपकरण रखें. प्रतिबाधा मीटर में, जल्दी से सामान्य मोड से स्विच करने के लिए, मोड बाईपास के लिए, और वापस. बाईपास मोड में हालांकि, वर्तमान tetrode और सोने के समाधान के माध्यम से गुजरती हैं, और सोने इलेक्ट्रोड टिप पर चढ़ाया जाएगा. चढ़ाना के प्रत्येक दौर के बाद प्रतिबाधा पहले से कम किया जाना चाहिए. वर्तमान पल्स दोहराएँ अगर प्रतिबाधा 1 MOhm से नीचे छोड़ नहीं किया. स्वीकार्य impedances के एक रूढ़िवादी रेंज 350 kOhm के लिए 250kOhm हैं. यदि प्रतिबाधा 200 kOhm नीचे चला जाता है, यह एक शॉर्ट सर्किट का संकेत हो सकता है.
- यदि दोहराया दालों के बाद प्रतिबाधा पर्याप्त नहीं छोड़ करता है, इलेक्ट्रोड टिप बाधित हो सकता है. Tetrode पुनः कटौती, शॉर्ट्स की जांच करने के लिए, और सोने चढ़ाना प्रक्रिया को दोहराएँ. यदि फिर काटने में मदद नहीं करता, tetrode जगह और फिर से शुरू.
- सभी tetrodes चढ़ाना के बाद, tetrode सुझावों संक्षेप में इथेनॉल में, डुबकी और उन्हें 3 से 5 मिनट के लिए सूखी.
- Tetrodes tetrode हवा के संपर्क में सुझावों के साथ वर्तमान जनरेटर का उपयोग कर के भीतर शॉर्ट सर्किट के लिए टेस्ट. यदि एक डीसी कनेक्शन tetrode के दो या दो से अधिक इलेक्ट्रोड के बीच मौजूद है, सोने से tetrode, और थाली फिर कटौती.
- सभी tetrodes सोना चढ़ाना के बाद पूरा हो गया है, प्रत्येक tetrod के बीच इंटरफेस करने के लिए मध्यम मोटाई cyano-acrylate गोंद की एक बूंद जोड़नेई और उसके टयूबिंग polyimide. यह अपने ड्राइव माइक्रो tetrode सुरक्षित और tetrode की लंबाई को बनाए रखना होगा.
- एक अंतिम कदम के रूप में, ड्राइव में सभी शिकंजा मोड़ द्वारा सभी tetrodes चाल.
5. सुरक्षात्मक शंकु संलग्न
सुरक्षात्मक कोन प्रयोजन के लिए पर्यावरण से सूक्ष्म ड्राइव और उजागर tetrode तार ढाल है. यह भी एक प्रयोग के दौरान निपटने के लिए समर्थन प्रदान करता है और बिजली के शोर कम कर देता है. हम एक 3 डी मुद्रित प्लास्टिक कोन (: ड्राइव निर्माण संदर्भ भाग मैं) का उपयोग करें. हालांकि, यह संभव है अन्य सामग्री से सोडा के एक तुला टुकड़ा कर सकते हैं जैसे शंकु, कर.
- प्लास्टिक कोन लो और आंतरिक या बाहरी सतह के लिए कुछ एल्यूमीनियम पन्नी टेप तय है.
- अगला, शंकु के माध्यम से एक छोटा सा छेद ड्रिल (व्यास में 1.5 मिमी) और शिथिल वॉशर और शंकु के अंदर अखरोट के साथ एक पेंच देते हैं. यह जमीन तार के लिए एक बिजली के मार्ग रूप में काम करेगा. हम एक 0-80 आकार पेंच और वॉशर संयोजन का उपयोग करने की सलाह देते हैं.
- पहले सम्मिलित करते हैं, और आंशिक रूप से शंकु के पक्ष में तीन 1-72 आकार शिकंजा (लंबाई में 3 / 16 इंच) की बारी है. साथ ड्राइव सरणी निलंबित, ड्राइव पर कोन सम्मिलित करें. सुनिश्चित करें कि दोनों जमीन तार ड्राइव सरणी के नीचे से विस्तार. 1-72 शिकंजा कई बार के चारों ओर 4 'जमीन तार के संपर्क में भाग लपेटें और पेंच कस जकड़ना. ड्राइव आधार शेष दो शंकु शिकंजा कस द्वारा शंकु सुरक्षित.
- अन्त में, एक कम जमीन तार के अंत सेमी छीन ले और यह पेंच के आसपास पन्नी टेप और वॉशर के बीच में, हवा. पेंच कस द्वारा जमीन सुरक्षित. अब हम एक सूक्ष्म ड्राइव सरणी है कि पिछले शल्य आरोपण के लिए तैयार है.
6. प्रतिनिधि परिणाम
- माइक्रो ड्राइव सरणी का उत्पादन अब पूरा हो गया है. आपकी सूक्ष्म ड्राइव सरणी 18 tetrodes और 3 संदर्भ चैनलों के साथ भरी हुई है. यह एक सुरक्षा और स्थायित्व के लिए कोन टोपी में encased है. सुरक्षात्मक शंकु के साथ समाप्त माइक्रो ड्राइव सरणी औसत पर 25g के लिए 20g वजन का होता है.
- समाप्त ड्राइव सरणी मानक शल्य प्रक्रिया का उपयोग कर प्रत्यारोपित किया जाता है. जैसा कि आप देख सकते हैं, एक preamplifier चिप और तारों का एक बंडल है कि डाटा अधिग्रहण हार्डवेयर और सॉफ्टवेयर के लिए संकेत ले ड्राइव से जुड़ा हुआ है.
चित्रा 1: tetrode घुमा विन्यास के एक योजनाबद्ध). स्वचालित tetrode घुमा डिवाइस के ऊपर एक क्षैतिज पट्टी tetrode unbonded इलेक्ट्रोड तारों निलंबित बी. Tetrode प्रतिबाधा माप और इलेक्ट्रोड चढ़ाना के लिए) सेटअप. जब शॉर्ट सर्किट के लिए जाँच, सर्किट अलग है: काली तार संबंधक बोर्ड पर एक और इलेक्ट्रोड चैनल से जुड़ा हुआ है सी) क्लौज़अप एक कस्टम के एक सूक्ष्म ड्राइव सरणी धारक उपकरण बनाया. बेलनाकार बार एक एक्स - acto चाकू संभाल है. संबंधक एक 26 पिन, डबल पंक्ति मिल अधिकतम संबंधक है. दो टुकड़ों को एक साथ बंधुआ रहे हैं दंत ऐक्रेलिक का उपयोग. डी संक्षिप्त जाँच के लिए ) विन्यास. चैनल एक्स और चैनल वाई चार tetrode चैनलों के किसी भी दो अलग अलग चैनलों कर रहे हैं ई.) इलेक्ट्रोड प्रतिबाधा को मापने के लिए विन्यास. वर्तमान स्रोत 'बंद' है. प्रतिबाधा मीटर 'पर' और 'परीक्षण' के लिए सेट कर दिया जाता है एफ.) इलेक्ट्रोड सुझावों का सोना चढ़ाना के लिए विन्यास. वर्तमान स्रोत के लिए 'पर', ऑडियो 'चालू' है सेट कर दिया जाता है, मोड 'एकध्रुवीय' है, डीसी टेस्ट 'चालू' है, 2 microamps के लिए मौजूदा सेट कर दिया जाता है.
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Discussion
इस प्रोटोकॉल एक दो भाग प्रोटोकॉल की दूसरी किस्त है: माइक्रो ड्राइव सरणी और tetrode का संयोजन एक जाग में कई न्यूरॉन्स की एक साथ रिकॉर्डिंग प्राप्त करने के लिए एक शक्तिशाली उपकरण है, "में vivo रिकॉर्डिंग जीर्ण के लिए लघु ड्राइव सरणी." जानवरों की तैयारी बर्ताव. उम्मीद है, हम आप सभी आवश्यक जानकारी के साथ प्रदान की है के लिए आप शुरू करने के लिए या अपनी खुद की प्रयोगशाला में electrophysiological रिकॉर्डिंग में सुधार की आवश्यकता होगी.
motorized tetrode भांजनेवाला युक्ति कस्टम डिजाइन किया गया था और गढ़े. हम एक विक्रेता और भाग संख्या है कि आप इसी तरह की कार्यक्षमता के साथ एक डिवाइस के आदेश करने की अनुमति देगा प्रदान की है. वैकल्पिक रूप से, बस एक चुम्बकीय सरगर्मी छड़ी है कि एक मगरमच्छ क्लिप करने के लिए जुड़ा हुआ है के साथ एक motorized घूर्णन चुंबक के संयोजन के द्वारा एक motorized मोड़ डिवाइस में घर का निर्माण किया जा सकता है, इस विन्यास सबसे अधिक संभावना rotations, रोटेशन दिशा के मैनुअल उत्क्रमण की गिनती पुस्तिका की आवश्यकता होगी, और मैन्युअल शुरू / रोक.
कुछ इलेक्ट्रोड अंतरफलक बोर्डों पिन और छेद तंत्र बिजली तार को जोड़ने के लिए नहीं है. इसके बजाय, आप धातु पिन संबंधक बोर्ड से बाहर विस्तार है कि एक अंतरफलक बोर्ड प्राप्त हो सकता है, जैसे धातु पिन अक्सर मानक इलेक्ट्रॉनिक उपकरणों पर पाया उन लोगों के लिए समान हैं. हम संक्षेप में धातु पिन tetrode चैनलों को जोड़ने के लिए एक पद्धति रूपरेखा. सबसे पहले, प्रत्येक tetrode के चार इलेक्ट्रोड तारों के सुझावों पर इन्सुलेशन हटा दें. यह प्रत्येक इलेक्ट्रोड की टिप करने के लिए एक हाथ ब्यूटेन मशाल का उपयोग कर के रूप में संभव के रूप में संक्षेप में एक लौ को लागू करने के द्वारा पूरा किया है. प्राप्त हटना लपेटो है कि आसानी से धातु पिन पर फिट होगा, और पिन कस निचोड़ के बाद हटना लपेटो गरम किया गया है. कट हटना लपेटो धातु पिन की लंबाई के लिए टयूबिंग. केशिका कार्रवाई का उपयोग करने के लिए चांदी के रंग के साथ हटना लपेटो को भरने. हटना लपेटो में एक इलेक्ट्रोड के तार के संपर्क में टिप डालें. धीरे ऐसी है कि बिजली तार पिन और हटना लपेटो की दीवार के बीच धातु पिन पर हटना लपेटो स्लाइड. शेष तीन tetrode के इलेक्ट्रोड चैनलों के लिए इन चरणों को दोहराएँ. अंत में, एक गर्मी बंदूक के एक प्रस्ताव के पक्ष साइड के साथ, गर्मी चार पिन हटना लपेटो में कवर (हटना लपेटो अंदर इलेक्ट्रोड तारों के साथ). इस बिंदु पर, आप tetrode और संबंधक बोर्ड के बीच स्थिर और विश्वसनीय कनेक्शन होना चाहिए.
इन निर्माण के दौरान प्रक्रियाओं देखभाल के साथ इलेक्ट्रोड तारों संभाल के रूप में बहुत कम बल उन्हें क्षति के लिए आवश्यक है. वहाँ tetrode और सूक्ष्म ड्राइव सरणी प्रक्रिया में कई कदम उठाए हैं और हर कदम के रूप में उच्च गुणवत्ता वाले डेटा प्राप्त करने के लिए दूसरों के रूप में महत्वपूर्ण है. यहाँ वर्णित प्रोटोकॉल अच्छी तरह से हमारी प्रयोगशाला उपलब्ध उपकरणों पर विचार करने के लिए काम किया है. अपनी खुद की प्रयोगशाला में संसाधनों अलग हो सकता है, इसलिए, हर कदम सावधानी से विचार और संकोच के लिए प्रोटोकॉल को बदलने के लिए अपनी खुद की आवश्यकताओं और बाधाओं को पूरा क्रम में अनुकूलतम प्रदर्शन को प्राप्त करने के नहीं.
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Acknowledgments
हम अपने डिजाइन और स्वत:, motorized tetrode भांजनेवाला वीडियो में चित्रित डिवाइस के निर्माण के लिए जून यामामोटो स्वीकार करते हैं करना चाहते हैं. इसके अलावा, हम माइक्रो ड्राइव और tetrode प्रयोगशाला में प्रौद्योगिकी विकास के लिए उनके योगदान के लिए सब अतीत और वर्तमान विल्सन लैब के सदस्यों को स्वीकार करना चाहते हैं.
Materials
| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| Panavise | Tool | Panavise | Model 301 | Holds either micro-drive array or serrated scissors |
| Modified Xcelite 378M Pliers | Tool | Newark Inc | 96F8903 | For inserting connector board pins. To make, remove 2mm from one tip of the pliers. |
| Slow Cure Glue | Material | Great Planes (Champaign, IL) | GPMR6015 | To glue the tetrode to the micro-drive |
| Gold Plating Solution | Material | Neuralynx Inc. | Sifco Selectron Gold NC | Contains gold particles for electroplating |
| Current Generator | Tool | World Precision Instruments, Inc. | A365D-B | A.K.A. Stimulus Isolator. Used to electroplate gold solution onto electrode tips. |
| Impedance Meter | Tool | BAK Electronics | IMP-1 / 6662 / 2788 | To check impedance of electrodes |
| Hot Air Gun | Tool | Steinel (Germany) | HG 3002 LCD | To fuse electrodes together to make tetrode |
| Accu-Tek Carbofib Tip Tweezers | Tool | Aven | 18768 (Pattern 304) | For handling tetrodes |
| Alligator Clip | Tool | Fine Science Tools | 18050-35 | A.K.A. Bulldog serrefine. To clip the tetrodes together during twisting |
| Micro Dissecting Scissors | Tool | Biomedical Research Instruments | 25-1000 | For general cutting of tetrode/electrode wire |
| Iris Toughcut Serrated Scissors | Tool | Fine Science Tools | 14058-09 | For final cut of tetrodes |
| Teflon Coated Stainless Steel Wire | Material | A-M Systems | 790500 | Ground wire |
| 12.5 micron nichrome wire | Material | Kanthal Palm Coast | Rediohm-800 1/4 HARD PAC COATING | Polyimide coated micro-wire for making tetrodes. |
| Tetrode Twister | Tool | Neuralynx Inc. | Tetrode Assembly Station | Increases the speed and consistency of tetrode fabrication. |
| Silver Paint | Material | GC International | 22-023 | For connecting the micro-electrode wires of the tetrode to the connector pins (see Discussion) |
| X-Acto Knife Handle | Material | MSC Direct | X3001 | For constructing a micro-drive holding device. |
| 26 Pin, 2 Row Connector | Material | Mill-Max | 852-10-026-30-001000 | For constructing a micro-drive holding device. |
References
- Gray, C. M., Maldonado, P. E., Wilson, M., McNaughton, B. Tetrodes markedly improve the reliability and yield of multiple single-unit isolation from multi-unit recordings in cat striate cortex. J. Neurosci. Methods. 63 (1-2), 43-54 (1995).
