開発中に遺伝子の役割を調査するための不可欠なツールには、遺伝子ノックダウン、過剰発現、およびmisexpressionの研究を実行する機能です。ゼブラフィッシュの(<em>ゼブラフィッシュ</em>)、胚にRNA、DNA、タンパク質、アンチセンスオリゴヌクレオチドおよび他の小分子のマイクロインジェクションは、研究者に遺伝子機能を探索するための迅速かつ堅牢なアッセイを提供する<em> in vivoで</em>。このビデオの記事では、我々は準備して顕微注入する方法を紹介します<em> in vitroで</em>合成されたEGFPのmRNAと翻訳ノンブロッキングモルホリノオリゴに対する<em> PKD2</em>、1細胞期のゼブラフィッシュの胚への常染色体優性多発性嚢胞腎疾患(ADPKD)、に関連する遺伝子。私たちは、その後、GFPの発現と表現型の解析を検証することによってmRNAおよびモルホリノmicroinjectionsの成功を分析する。この技術の広範なアプリケーションが生成するトランスジェニック動物および生殖系列キメラ、細胞運命のマッピングおよび遺伝子のスクリーニングが含まれています。ここに我々は、EGFPとノックダウンのの過剰発現のためのプロトコルを記述する<em> PKD2</em> mRNAとモルフォリノオリゴヌクレオチドを注入して。
Yuan, S., Sun, Z. Microinjection of mRNA and Morpholino Antisense Oligonucleotides in Zebrafish Embryos.. J. Vis. Exp. (27), e1113, doi:10.3791/1113 (2009).