माउस स्तन उपकला कोशिकाओं Lactogenic भेदभाव के दौरान Mammospheres फार्म
Summary
HC11 lactogenic भेदभाव गुंबददार mammospheres के रूप में संदर्भित संरचनाओं के गठन के द्वारा लक्षण वर्णन किया जा सकता है. lactogenic भेदभाव बढ़ाता में सहायता संरचनाओं चरण विपरीत माइक्रोस्कोपी द्वारा enumerated हो सकता है है.
Abstract
एक प्ररूपी सामान्यतः करने के लिए माउस स्तन उपकला सेल संस्कृतियों में lactogenic भेदभाव की डिग्री का निर्धारण किया जाता उपाय गुंबद के आकार सेल संरचनाओं के गठन mammospheres के रूप में संदर्भित है<sup> 1</sup>. HC11 सेल लाइन स्तन lactogenic भेदभाव दोनों के नियमन के अध्ययन के लिए एक मॉडल प्रणाली के रूप में कार्यरत किया गया है<em> इन विट्रो में</em> और<em> Vivo में</em<sup2></sup>. HC11 कोशिकाओं को अलग और lactogenic हार्मोन के साथ इलाज के लिए जवाब में दूध प्रोटीन synthesize. HC11 माउस संगम स्तन उपकला कोशिकाओं के विकास के बाद, lactogenic भेदभाव dexamethasone, इंसुलिन, प्रोलैक्टिन और सहित lactogenic हार्मोन का एक संयोजन के अलावा द्वारा प्रेरित किया गया था, डुबकी के रूप में संदर्भित किया जाता है. HC11 करने के लिए अंतर प्रेरित कोशिकाओं भेदभाव के 120 घंटे के बाद प्रेरण और mammospheres की संख्या कि प्रत्येक संस्कृति में था प्रगणित दिखाई करने के लिए समय पर फोटो खिंचवाने थे. व्यक्तिगत mammospheres के आकार भेदभाव की डिग्री के साथ संबद्ध है और यह फर्क कोशिकाओं की छवियों में दिखाया गया है.
Protocol
Discussion
इस तकनीक के लिए आदेश में सफल होने के लिए और अच्छी गुणवत्ता की, उपकला कोशिकाओं संगम पर रखा होना चाहिए पहले lactogenic हार्मोन के साथ प्रेरित किया जा रहा है. वहाँ स्थितियों जहाँ वहाँ कई mammospheres, जो मात्रा का ठहराव कठ…
Acknowledgements
Congressionally निर्देशित चिकित्सा अनुसंधान फंड अनुदान (DAMD17-01-0,264) से एमएल कटलर और संयुक्त राज्य अमेरिका सैन्य कैंसर एमएल कटलर संस्थान फंड काम का समर्थन किया.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| RPMI | Invitrogen | 21870076 | ||
| Fetal Bovine Serum | Atlanta Biologicals | S11550 | ||
| L-Glutamine | Gibco | 25030 | ||
| PenStrep | Gibco | 15140 | ||
| Hepes | Quality Biologicals | 118089060 | ||
| EGF | Sigma | E9644 | ||
| Insulin | Gibco | 12585-014 | ||
| Dexamethasone | Sigma | D1756 | ||
| Microscope | Olympus | IX71 | ||
| Digital Camera | QImaging | Retiga 2000RV Fast 1394 |
References
- Blatchford, D. R., Hendry, K. A., Turner, M. D., Burgoyne, R. D., Wilde, C. J. Vectorial secretion by constitutive and regulated secretory pathways in mammary epithelial cells. Epithelial Cell Biol. 4, 8-16 (1995).
- Wang, W. Glucocorticoid induced expression of connective tissue growth factor contributes to lactogenic differentiation of mouse mammary epithelial cells. J Cell Physiol. 214, 38-46 (2008).
