Este vídeo mostra como induzir aneurismas da aorta abdominal (AAA) em camundongos através de infusão intraluminal transitória da elastase pancreática suína no segmento de infra-renal da aorta abdominal. O modelo tem a capacidade de adicionar uma visão ampla para o pathobiology da AAA, devido ao surgimento de inúmeros transgênicos e camundongos knockout do gene.
Abstract
Infusão intraluminal transitória da elastase pancreática suína no segmento de infra-renal da aorta abdominal é o modelo animal mais usado do aneurisma de aorta abdominal (AAA) desde que foi descrita pela primeira vez em ratos por Anidjar e colegas. Lógica 1 A para o seu desenvolvimento foi baseado sobre a natureza perturbada de elastina observado em AAA. Este modelo de rato tenha sido modificado para produzir AAA na região da aorta infra-renal de ratos. 2 O modelo tem a capacidade de adicionar uma visão ampla para o pathobiology da AAA, devido ao surgimento de inúmeros transgênicos e camundongos knockout do gene. Além disso, é uma plataforma viável para testar potenciais agentes terapêuticos para AAA. Neste vídeo, demonstramos o processo de infusão elastase AAA utilizado em nosso laboratório.
Os ratos são anestesiados com isoflurano 2,5%, e uma laparotomia é realizada sob condições estéreis. O aortais abdominal isolada com o auxílio de um estereomicroscópio operacional (Leica). Depois de colocar ligaduras temporário em torno da aorta proximal e distal, um aortotomia é criado na bifurcação com a ponta de uma agulha de calibre 30. Um segmento de calor cônico da PE-10 tubos de polietileno é introduzido através da aortotomia e seguro. A luz aórtica é posteriormente perfundidos por 5-15 minutos a 100 mm Hg com o tipo contendo salina eu suína elastase pancreática (4,5 U / mL; Sigma Chemical Co.). Após a remoção do cateter de perfusão, o aortotomia é reparado sem constrição da luz.
Protocol
Os ratos são anestesiados com isoflurano inalado 2.0-3.0ml / L. O abdômen é raspado e limpo com álcool e betadine. O rato é colocado em posição supina sobre o campo operatório. Luvas estéreis são usadas pelo cirurgião, e os instrumentos utilizados foram esterilizados com esterilizador talão quente. A incisão mediana abdominal longa é feita. Conteúdo abdominal são retraídos fora do abdômen com gaze estéril para expor a aorta abdominal. A aorta abdominal é isolado a pa…
Discussion
Estudos anteriores observaram variação de lote para lote significativo no desenvolvimento de diferentes preparações AAA elastase comercial 3. Assim, é fundamental para monitorar lotes de produção, bem como ter grupos de controle apropriados a fim de documentar a capacidade da preparação para induzir AAA.
Curiosamente, a susceptibilidade para o desenvolvimento deste modelo AAA é dependente da cepa do mouse usado 3. O rato usado no vídeo atual é da cepa C57BL …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabalho foi apoiado a concessão SCCOR "Doença AAA: Mecanismos, estratificação e tratamento" (P50 HL083800-03) do National Institutes of Health
Azuma, J., Asagami, T., Dalman, R., Tsao, P. S. Creation of Murine Experimental Abdominal Aortic Aneurysms with Elastase . J. Vis. Exp. (29), e1280, doi:10.3791/1280 (2009).