호르세쇼 크랩을 사용하여, Limulus Polyphemus 비전 연구
Summary
이 비디오에서 우리는 미국 말굽 꽃게와 electroretinogram 녹음, 시신경 녹음 및 intraretinal 녹음을 수행<em> Limulus Polyphemus</em>. 이러한 electrophysiological 패러다임은 연구 또는 교육 실습실에서 비전의 신경 기초를 조사 사용할 수 있습니다.
Abstract
미국 말굽 게, Limulus Polyphemus이 지구상에서 가장 오래된 생물 중 하나이며, 동물은 생명 의학 연구에 필수적인 역할을하고 있습니다. 뿐만 아니라 그들의 혈액은 과학자들이 우리의 의약품에 bacteriotoxins을 감지하기 위해 사용하는 특별한 세포를 포함하고 있지만, 그들의 눈을 또한 가벼운 적응 및 측면 억제와 같은 우리의 시각 시스템에서 운영 생리적 과정에 대한 많은 통찰력을 제공하고 있습니다 신경 네트워크를 포함 않습니다. 말굽 게이 동물이 대형 무척추 동물에 대한 하디이기 때문에, 그 망막 뉴런이 크고 쉽게 액세스할 수있는 비전 연구를위한 매력적인 모델 남아의 시각 시스템은 콤팩트하고 광범위하게 공부하고, 그 시각적 동작이 잘 정의됩니다. 또한, 내 눈을의 구조와 기능은 동물의 두뇌에 circadian 시계에 의해 매일 변조된 수 있습니다. 요컨대, 말굽 모양의 게를의 시각 시스템은 아직 흥미있을 정도로 복잡한 이해 정도로 간단하다.
이 비디오에서 우리는 Limulus와 생체내으로 수행할 수 있습니다 비전의 신경 기초를 조사 세 electrophysiological 패러다임을 제시한다. 그들은 electroretinogram 녹음, 시신경 녹음 및 녹화 intraretinal 있습니다. 표면 Electroretinogram (에르그) 레코딩 측정은 빛의 섬광에 눈의 모든 세포의 표현 전기 응답을 전극. 그들은 시간의 연장 기간 동안 안구의 전반적인 감도를 모니터링하는 데 사용할 수 있습니다. 시신경 레코딩은 세포 microsuction 전극과 하나의 신경 섬유의 급상승 활동을 측정합니다. 그들은 눈의 두뇌뿐 아니라 두뇌에서 눈에 다시 먹이 circadian – 시계 메시지 전달 시각적 메시지를 연구하는 데 사용할 수 있습니다. 세포내 microelectrode과 Intraretinal 레코딩 측정은 전압 변동은 눈의 개별 세포에 의해 빛을 유도. 그들은 망막 세포 처리 메커니즘을 명료하게하다하는 데 사용할 수 있습니다.
Protocol
Discussion
우리는 에르그 녹음, 시신경 녹음 및 생체내의 말굽 게에 intraretinal 레코딩을 수행하는 방법을 보여주고있다. 녹음 기술 각각 비전의 신경 기초로 다른 통찰력을 제공하고, 그들은 모든 게의 눈은 크고 어려운 등딱지 사는 동물 감사 망막의 기능을 연구하는 데 사용할 수 있습니다. 시신경의 활동도 자유롭게 전극의 적절한 건설 (4) 바다에서 동물 행동에서 기록하실 수 있습니다. 이러한 기술은 또…
Acknowledgements
저자는이 비디오 기사를 생산 그녀 도움 박사 Birgit 베르너을 인정하고 싶습니다. 이 연구는 NSF 경력 수상에 의해 투자되었다.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| LED | Light source | Newark Inc | 33C1292 | |
| Suction electrode | Electrode | A-M Systems, Inc | 573000 | |
| XCell 3*4-Channel Extracellular Amplifier | Amplifier | FHC Inc. | 40-40-8B | |
| Intracellular Recording | Amplifier | Cygnus | IR-283A | |
| APM | Neural Spike Discriminator | FHC Inc. | APM | |
| Bits++ | Video Board | Cambridge Research Systems Inc | Bits++ | |
| Piezopatch Manipulator | Micropositioner | WPI Inc | PPM5000 | |
| Square Pulse Stimulator | Nerve Stimulator | Grass Instrument Division, Astro-Med, Inc. | Model S48 | |
| P-97 | Micropipette Puller | Sutter Instruments | Model P-97 | |
| Borosilicate Glass Capillary | Electrode glass | WPI Inc | 1B150-4 | |
| Horseshoe crab (Limulus polyphemus) | Animal | Marine Biological Laboratories | ||
| Micropipette Puller | Glass Puller | Sutter Instruments | P-97 | |
| Zoom Stereoscope | Microscope | Jed Pella Inc. | SMZ-168 |
References
- Barlow, R. B. Circadian rhythms in the Limulus visual system. J. Neurosci. 3, 856-870 (1983).
- Passaglia, C. L., Dodge, F. A., Barlow, R. B. Cell based model of the Limulus lateral eye. J. Neurophysiol. 80, 1800-1815 (1998).
- Snodderly, D. M. Processing of visual inputs by the brain of Limulus. J. Neurophysiol. 34, 588-611 (1971).
- Passaglia, C., Dodge, F., Herzog, E., Jackson, S., Barlow, R. Deciphering a neural code for vision. Proc. Natl. Acad. Sci. 94, 12649-12654 (1997).
- Barlow, R. B., Kaplan, E. Limulus lateral eye: properties of receptor units in the unexcised eye. Science. 174, 1027-1029 (1971).
- Bolbecker, A. R., Lewis, A. R., Swan, A. A., Carlson, K., Fleet, J. R., Beck, K. E., Wasserman, G. S. Stable Bellows Cup Electrode Demonstrates Low-frequency Properties of Long-term Electroretinographic Recordings in the Limulus Lateral Eye. J. Neurosci. Meth. 159, 252-260 (2007).
