هذه التقنية تتيح استخدام السحر زاوية عالية الدقة الغزل بروتون MR الطيفي (HRMAS 1H – MRS) لتوصيف الجزيئي للعيش<em> ذبابة الفاكهة السوداء البطن</em> مع مطياف التقليدية تسلا 14.1 مجهزة HRMAS التحقيق.
عالية الدقة ماجيك زاوية الغزل (HRMAS) بروتون التحليل الطيفي بالرنين المغناطيسي (<sup> 1</sup> H – MRS) هي رواية غير المدمرة تقنية الذي يحسن الخط الطيفي ويسمح بعرض عالية الدقة الأطياف التي يمكن الحصول عليها من مقتطفات ، وخلايا سليمة والثقافات الخلية ، والأنسجة سليمة أكثر أهمية للتحقيق في العلاقات بين والعمليات الأيضية الخلوية.<em> في الجسم الحي</em> HRMAS<sup> 1</sup> H – MRS الدراسات حتى الآن لم يتم الإبلاغ في ذبابة الفاكهة العيش<em> ذبابة الفاكهة السوداء البطن.</em><em> ذبابة الفاكهة ،</em> كما كائن أبسط الوراثية ، ويسمح للفحص وظائف متعددة البيولوجي ومختلف مسارات إشارات الحفاظ تطويريا على مستوى الحي كله وانها نموذجا مفيدا للتحقيق في علم الوراثة والفيزيولوجيا. تحقيقا لهذه الغاية ، قمنا بتطوير ونفذت<em> في الجسم الحي</em> HRMAS<sup> 1</sup> H – MRS طريقة لتحقيق العيش<em> ذبابة الفاكهة</em> 14،1 في T. هنا ، ونحن الملامح الأساسية لHRMAS<sup> 1</sup> H – MRS بروتوكول لالتوصيف الجزيئي لل<em> ذبابة الفاكهة</em> مع مطياف MR تقليدية مجهزة HRMAS التحقيق. هذا الأسلوب هو الرواية ،<em> في الجسم الحي ،</em> غير مدمرة<em> ذبابة الفاكهة</emقد> نهج القياس المستقلب ، التي تتيح تحديد المؤشرات الحيوية المرض ، وبالتالي المساهمة في التنمية العلاجية الرواية.
مع استثناء من التقرير الأخير للجدوى في التصوير بالرنين المغناطيسي المجراة في ذبابة الفاكهة 6 ، في الدراسات المجراة في ذبابة الفاكهة MRS لم يتم الإبلاغ عنها. في هذا البروتوكول ، ونحن تصف تنفيذ رواية في HRMAS فيفو نهج H – 1 MRS للكشف عن …
The authors have nothing to disclose.
وأيد هذا العمل في جزء من المعاهد الوطنية للصحة (NIH) منحة لورانس G. AI063433 رحمة ، معهد المعاهد الوطنية للصحة (NIH) مركز غرانت (P50GM021700) لرونالد تومبكينس G. (A. الأغنية Tzika ، مدير جوهر الرنين المغناطيسي) ، ومستشفى للأطفال في Shriner منحة بحثية (# 8893) إلى ألف الأغنية Tzika. نشكر Dionyssios Mintzopoulos دكتوراه للحصول على المساعدة في المراحل الأولى من تطوير هذا البروتوكول وأوفيديو جيم دكتوراه Andronesi للحصول على المساعدة مع تسلسل نبض TOBSY.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Deuterium oxide | Reagent | Sigma-Aldrich | 7789-20-0 | |
3-(trimethylsilyl)propionic-2,2,3,3-d4 acid | Reagent | Sigma-Aldrich | 24493-21-8 | |
agar, sucrose, yeast, cornmeal | Food | Genesee Scientific Corporation | http://www.flystuff.com/ | |
Oregon RS or Canton-S flies | Adult fly lines | Bloomington Stock Center | http://flystocks.bio.indiana.edu/ | |
Paintbrush | Equipment | (size 0) | ||
2ml tubes | Equipment | Fisher Scientific | K749521-1590 | |
Fly incubators | Equipment | high humidity capacity (60-75%), adjustable temperature, and a 12 h:12 h light: dark cycle. | ||
Bruker Bio-Spin Avance NMR spectrometer (600.13 MHz) 4mm triple resonance (1H, 13C, 2H) HRMAS probe | Equipment | Bruker Bio-Spin | ||
BTO-2000 unit in combination with a MAS pneumatic unit | Equipment | Bruker Bio-Spin | ||
4mm zirconium oxide rotor (capacity 50 ul) | Equipment | Bruker Bio-Spin | B3829 (Bruker store) | |
MestReC (Mestrelab Research) | Software | 1D NMR spectra analysis http://mestrelab.com/ |
||
SPARKY 3, USCF | Software | 2D NMR spectra
analysis
http://www.cgl.ucsf.edu/home/sparky/ |