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Biology

Inducción quirúrgica de edema endolinfático por la obliteración del conducto endolinfático

Published: January 22, 2010 doi: 10.3791/1728

Summary

Este video muestra la forma de obstruir el conducto quirúrgicamente el conejillo de indias de endolinfático para producir edema endolinfático.

Abstract

Inducción quirúrgica del edema endolinfático (ELH) en el conejillo de indias por la obliteración y la obstrucción del conducto endolinfático es un modelo animal ampliamente aceptado de la enfermedad y una importante correlación entre la enfermedad humana de Meniere. En 1965, Robert Kimura y Schuknecht Harold describió por primera vez un enfoque intradural para la obstrucción del conducto endolinfático (Kimura 1965). Aunque eficaz, esta técnica, que requiere la penetración de la cubierta protectora del cerebro, incurrió en un nivel no deseado de la morbilidad y la mortalidad en las materias de origen animal. En consecuencia, Andrews y Bohmer desarrollado un enfoque extradural, que previsiblemente produce menos de las complicaciones asociadas con el sistema nervioso central (SNC) la penetración. (Andrews y Bohmer 1989)

El enfoque extradural se describe aquí primero requiere una incisión en la región del occipucio para exponer la capa muscular subyacente. Nosotros operamos sólo en el lado derecho. Después de la retracción adecuada del tejido que recubre, una incisión horizontal en la musculatura del occipital derecho a exponer el derecho temporo-occipital línea de sutura. El hueso inmediatamente inferio-lateral de la línea de sutura (Fig. 1) es perforado con un taladro otológico hasta el seno sigmoideo se hace visible. Retracción medial del seno sigmoideo revela el opérculo del conducto endolinfático, que alberga el saco endolinfático. Perforación por dentro de la opérculo en el área del saco endolinfático revela el conducto endolinfático, que luego se llena con cera de hueso para producir la obstrucción y ELH en última instancia.

En las semanas siguientes, el animal demostrará la pérdida progresiva, auditiva fluctuante y evidencia histológica de la ELH.

Protocol

Parte 1: Anestesia y preparación para la cirugía

  1. Un adulto, mujer Duncan-Hartley conejillo de Indias de Charles River Internacional Laboratories, Inc. (Wilmington, MA) es anestesiados con ketamina 60 mg / kg y xilacina 12 mg / kg por vía intramuscular.
  2. Lubricantes derivados del petróleo se aplica a los ojos para proteger al animal de lesión en la córnea debido a la desecación.
  3. El animal se afeita desde la parte superior de la cabeza a los hombros y entre las orejas.
  4. El área afeitada es preparado de una manera aséptica primero con el 7,5% de povidona yodada seguido de 70% de alcohol etílico.
  5. El animal se coloca sobre una mesa de operaciones con manta térmica y en una plataforma que eleva la cabeza y flexiona el cuello. La cabeza del animal se dirige fuera de su cirujano. Flexión adecuada del cuello se requiere a fin de exponer adecuadamente la cresta occipital.
  6. El animal se cubre de una manera aséptica.

2 Parte: La incisión y la exposición del occipucio ósea

  1. Epinefrina más bupivacaína (bupivacaína) 0,25% se aplica a lo largo del sitio de la incisión posibles (incisión media piel dorsal a lo largo de la protuberancia occipital). Esto provoca vasoconstricción local, lo que limita el sangrado, y proporciona duradera analgesia postoperatoria después de que el animal se despierta.
  2. Incisión de la línea media dorsal está hecha de piel en el cuero cabelludo a lo largo del occipucio.
    Figura 1
    Figura 1: La piel está formada incisión a lo largo de la línea media dorsal, como se muestra arriba.
  3. Para obtener una adecuada exposición, la piel se retrae lateralmente mediante la colocación de una pinza hemostática curva pequeñas a cada lado de la incisión.
  4. Una incisión horizontal a lo largo del músculo del cuello para exponer el occipucio ósea. En esta etapa, el animal puede contracción a pesar de la anestesia adecuada debido a la transección del nervio occipital mayor. Sección transversal de la médula espinal es un peligro con la incisión horizontal en la región suboccipital. Esta complicación se puede evitar asegurándose de que el hueso subyacente siempre se siente debajo de la hoja de bisturí.
  5. Con la musculatura suboccipital incisión hasta el hueso, una pinza hemostática tercero se utiliza para retraer el borde del músculo superior. Esta pinza de hemostasia se mantiene en su lugar por el ayudante de cirugía.
  6. Un elevador de periostio Lempert se utiliza para exponer la sutura temporo-occipital.

Parte 3: Perforación de la sutura temporo-occipital

  1. Tras la exposición de la sutura temporo-occipital (Figura 2), un taladro otológico con 1,5 mm fresa de diamante se utiliza para perforar inferio-lateralmente a la sutura.
  2. Debajo de la tabla externa del cráneo, la textura esponjosa del diploe (El hueso esponjoso entre las tablas que intervienen en el cráneo) se hará visible. Una vez que el diploe se ha perforado de distancia, la tabla interna del cráneo aparece, junto con un color azul pálido que es el seno sigmoideo.
  3. Los márgenes del seno sigmoideo se definen sin penetrar en el buque.
  4. Una vez que el hueso que cubre el seno sigmoideo ha sido lo suficientemente diluida, un aumento mayor y se utiliza una selección directa se utiliza para quitar con cuidado el hueso que cubre el seno sigmoideo.

Figura 2
Figura 2 El área a ser perforados en parte se superpone a la sutura temporo-occipital.

Parte 4: La obstrucción del conducto

  1. El seno sigmoideo esqueleto se retrae medialmente para revelar el opérculo.
  2. Un diamante de 0,5 mm de fresa se utiliza para perforar por dentro de la opérculo y en el saco endolinfático y el conducto.
  3. El conducto endolinfático es después cubierta con cera de hueso con un pico recto.
  4. El defecto del cráneo se refuerza entonces con Gelfoam (Pfizer, Nueva York, NY).
  5. 4-0 Polysorb (United States Surgical, Norwalk, CT) de sutura se utiliza para poner los músculos en conjunto. Hay entonces una transición sin problemas a una técnica de sutura subcutánea para el cierre de la incisión de la piel. Con este cierre no hay necesidad de retirar las suturas después y no hay riesgo de que el animal garra en el lugar y sacar una sutura.

Parte 5: cuidado post-operatorio

El cuy es colocado en una incubadora para mantener la temperatura corporal y se revisa a intervalos de 30 minutos hasta que despierta y capaz de mantener una posición esternal. El animal es inspeccionado por la respiración y el color de la carrocería. Este centro utiliza la enrofloxacina (0,2 ml a 22,7 mg / ml, vía subcutánea) y la buprenorfina (0,05 ml a 0.3mg/mL, por vía subcutánea) para la profilaxis de la infección post-operatoria y el control del dolor, respectivamente. Analgésico se administra una vez en el día de la cirugía y dos veces en el post-operatorio día uno y dos. Aunque los antibióticos no son necesarios para Su asépticargery, uno de cinco días, dos veces al día un curso de antibióticos profilácticos pueden ser givenonce en el post-operatorio de tres días.

Complicaciones y Gestión

  1. La depresión respiratoria, el cirujano debe estar siempre al tanto de respiración del animal s. Si la respiración se hace más lento o se detiene, suspender la cirugía y una inspección visual para el movimiento torácico. Si el animal está experimentando dificultad respiratoria o dificultad para respirar, compruebe que la boca y las vías respiratorias no están ocluidas.
  2. La penetración del seno sigmoideo Gelfoam uso y compresión a lo largo de la punta de succión hasta que el sangrado se detiene.
  3. Penetración dural cubrir el defecto con Gelfoam.
  4. Daño vestibular No perforar más de 1 mm lateral al seno sigmoideo. Si lo hace, los riesgos de dañar el conducto semicircular posterior, lo que invalida todos los datos para el conejillo de indias.

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Discussion

En las semanas siguientes a la obstrucción quirúrgica del conducto endolinfático, el tema animal experimenta pérdida de audición neurosensorial fluctuante, medida por la respuesta de tronco cerebral evocados auditivos. Una muestra de la respuesta auditiva del tronco cerebral (ABR) la grabación se muestra en la Figura 3. La oreja izquierda sirve como un control no operado.
Figura 3
Figura 3: Niveles de ABR umbral a partir del 16 kHz de un conejillo de Indias 28 semanas después de la cirugía. El umbral para la izquierda (no operado) del oído es de 30 dB SPL y el derecho (operado del oído) es cerca de 70 dB.

El examen histológico de la cóclea también muestra la distensión de la membrana de Reissner (Figura 4).
Figura 4
Figura 4: Distensión de la membrana de Reissner s es un hallazgo típico en ELH. Distensión medibles de la membrana basilar puede o no estar presente.

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Disclosures

Los experimentos con animales se realizaron de acuerdo con las directrices y normas establecidas por el Cuidado de Animales institucional y el empleo de la Case Western Reserve University.

Acknowledgments

Este trabajo fue apoyado en parte por una beca de la Sociedad Americana otológico a CAM y por una beca de la Universidad de casos del Centro Médico de los Hospitales de KNA y CAM. Nos gustaría agradecer a Jeff Churney en Focus Medical Group, Inc. (Hinckley, OH) para que nos proporciona una cámara de microscopio. Servicios de producción de video cortesía de Fusión Creativa Marketing, Inc. (Valdosta, GA) Damos las gracias a Jonathan Frankel y Alex Levitt en CWRU por sus comentarios durante la preparación del vídeo.

References

  1. Andrews, J. C., Bohmer, A. The surgical approach to the endolymphatic sac and the cochlear aqueduct in the guinea pig. Am J Otolaryngol. 10, 61-66 (1989).
  2. Kimura, R., Schuknecht, H. Membranous hydrops in the inner ear of the guinea pig after obliteration of the endolymphatic sac. Pract Otolaryngol. , (1965).

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Medicina Número 35 Guinea Pig hidrops endolinfático enfermedad de Meniere la inducción quirúrgica del conducto endolinfático
Inducción quirúrgica de edema endolinfático por la obliteración del conducto endolinfático
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Megerian, C. A., Heddon, C., Melki,More

Megerian, C. A., Heddon, C., Melki, S., Momin, S., Paulsey, J., Obokhare, J., Alagramam, K. Surgical Induction of Endolymphatic Hydrops by Obliteration of the Endolymphatic Duct. J. Vis. Exp. (35), e1728, doi:10.3791/1728 (2010).

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