نموذج من تصلب الشرايين الناتج عن تدفق ديستيربد في الشريان السباتي الماوس بواسطة الربط الجزئي وطريقة بسيطة لعزل الحمض النووي الريبي من بطانة الشريان السباتي
Summary
هذا يصف جزئية جراحة ربط الشريان السباتي ، الذي يسبب تدفق الظروف المضطربة والتنمية اللاحقة تصلب الشرايين (في غضون أسبوعين) مع الأوعية الدموية الجديدة intraplaque (في أربعة أسابيع) في الشريان السباتي الماوس المشتركة. نحن أيضا وصف أسلوب الرواية من العزلة RNA من البطانية السباتي ، وتوفير RNA عالية النقاء البطانية.
Abstract
على الرغم من ارتباط وثيق معروفة ، وقد أدلة مباشرة تربط تدفق بالانزعاج لتصلب الشرايين مفتقدة. استخدمناها مؤخرا نسخة معدلة من أساليب الربط الجزئي السباتي [1،2] لإظهار أنه يحرض بشدة ظروف تدفق منخفض ومتذبذبة ، واثنين من الخصائص الرئيسية لتدفق مضطربا ، في الشريان السباتي الماوس المشتركة. باستخدام هذا النموذج ، وقدمنا الأدلة المباشرة التي تتدفق بالانزعاج بل يؤدي إلى تصلب الشرايين التنمية السريعة والقوية في الماوس ئي خروج المغلوب E [3]. نحن أيضا بتطوير طريقة التحضير RNA البطانية مع نقاء عالية من البطانية السباتي الماوس [3]. استخدام هذا النموذج من الفئران ، والأسلوب ، وجدنا أن ربط أسباب الخلل الجزئي البطانية في الأسبوع ، تلاه تشكيل عصيدة قوية وسريعة في غضون اسبوعين في hyperlipidemic نموذج الفأر مع ملامح تشكيل الآفة المعقدة مثل اتساع الأوعية الدموية intraplaque قبل أربعة أسابيع. هذا السريع<em> في الجسم الحي</emويمكن استخدام> النموذج وإعداد RNA طريقة البطانية لتحديد الآليات الجزيئية الكامنة وراء تدفق التي تعتمد على التنظيم البيولوجيا الوعائية والأمراض. أيضا ، يمكن استخدامها لاختبار التدخلات العلاجية المختلفة استهداف الخلل في بطانة الأوعية الدموية وتصلب الشرايين مدة الدراسة انخفاضا كبيرا.
Protocol
Discussion
في هذا الإجراء ، والتحديد السليم لفروع كل من الشريان السباتي المشترك بما في ذلك الشريان السباتي الخارجي ، السباتي الداخلي ، الشريان القذالي ومتفوقة شريان الغدة الدرقية أمر ضروري. من المهم أيضا للتحقق من نمط تدفق باستخدام الموجات فوق الصوتية كما هو موضح. في أيدي ذوي ا…
Acknowledgements
وأيد هذا العمل بتمويل من المعاهد الوطنية للصحة منح HL87012 (HJ) ، HL75209 (HJ) ، UO1HL80711 (DH ، DG ، HJ) ، ومشروع جامعة من الطراز العالمي (HJ) من وزارة العلوم والتكنولوجيا والتعليم في كوريا الجنوبية.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Normal Saline (0.9% sodium chloride) | Baxter | 2B1323 | ||
| Insulin syringe (3/10 ml 29g syringe) | Tyco Health care | 8881600145 | ||
| HBSS | Cellgro, Mediatech, Inc. | 21-023 | ||
| miRNeasy mini kit (including, QIAzol) | QIAGEN | 217004 | ||
| Vevo 770 High-Resolution Micro-Imaging System | Visualsonics | a.Visualsonics 770 system b.Imaging stage c.Vevo integrated rail system d.RMV scan head for mice |
or similar system | |
| 6-0 Silk Suture, sterile | Covidien | s-1172 c2 | ||
| Small scissors | Roboz | RS-5675 | or similar | |
| Dissecting Forceps | Roboz | RS-5005 | or similar | |
| Tissue Mend II | Webster Vet Supply | 07-856-7946 |
References
- Korshunov, V. A., Berk, B. C. Flow-induced vascular remodeling in the mouse: a model for carotid intima-media thickening. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 23 (12), 2185-2191 (2003).
- Sullivan, C. J., Hoying, J. B. Flow-dependent remodeling in the carotid artery of fibroblast growth factor-2 knockout mice. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 22 (7), 1100-1105 (2002).
- Nam, D. Partial carotid ligation is a model of acutely induced disturbed flow, leading to rapid endothelial dysfunction and atherosclerosis. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 297 (4), H1535-H1543 (2009).
