Summary
Denne artikel skitserer en trinvis procedure til etablering af en musemodel med en oronasale fistel. Den oronasale fistel blev skabt ved at anvende opvarmet oftalmologisk cautery for at beskadige midterlinjedelen af den hårde gane, hvilket resulterede i dannelsen af en åbning mellem mund- og næsehulen.
Abstract
Denne undersøgelse præsenterer en metode, der anvender opvarmet oftalmologisk cautery til at udvikle en levedygtig model til undersøgelse af oranasale fistler. C57BL/6-mus blev brugt til at etablere oronasal fistel (ONF) -modellen. For at skabe ONF blev musene bedøvet, immobiliseret, og deres hårde ganer blev udsat. Under den kirurgiske procedure blev en 2,0 x 1,5 mm slimhindeskade i fuld tykkelse induceret i midterlinjen af den hårde gane ved hjælp af oftalmologisk cautery. Det var afgørende at kontrollere størrelsen af ONF og minimere blødning for at sikre eksperimentets succes. Verifikation af ONF-modellens effektivitet blev udført på den 7. dag efter operationen, der omfattede både anatomiske og funktionelle vurderinger. Tilstedeværelsen af næseseptumet i mundhulen og udstrømningen af sterilt vand fra næseborene ved injektion i mundhulen bekræftede den vellykkede etablering af ONF-modellen. Modellen demonstrerede en praktisk og vellykket oronasal fistel, kendetegnet ved en lav dødelighed, betydelige vægtændringer og minimal variation i ONF-størrelse. Fremtidige undersøgelser kan overveje at vedtage denne metode til at belyse mekanismerne for gane sårheling og udforske nye behandlinger for oronasale fistler.
Introduction
Oronasale fistel (ONF), en unormal åbning mellem mund- og næsehulen, manifesterer sig klinisk som en defekt i et strukturelt område fra den alveolære proces til uvulaen, som almindeligvis forekommer som en komplikation efter ganespaltereparation1. Patienter med ONF oplever mad refluks, artikulationsforstyrrelser og nedsat velopharyngeal funktion, hvilket påvirker deres livskvalitetbetydeligt 2,3,4. Hastigheden af postoperativ ONF varierer fra 2,4% til 55% på grund af faktorer som kløftbredde, Veau-type og kirurgisk metode 5,6,7,8. Derudover er gentagelsesraten efter ONF-reparation høj, lige fra 0% til 43%9.
Flere nye behandlinger har for nylig vist løfte inden for ONF, herunder forskellige materialer, lægemidler og nye teknikker 10,11,12,13,14,15,16,17. Nøjagtig evaluering af terapeutiske virkninger er afgørende, da det danner grundlag for udvælgelse og videreudvikling af ONF-behandlinger. Det er imidlertid udfordrende at opnå en gyldig vurdering på kort sigt for andre terapeutiske virkninger end kirurgi, da egenskaberne ved ONF'er varierer mellem forskellige patienter. Derfor er det nødvendigt at etablere en ONF-sygdomsmodel for at verificere effektiviteten af disse behandlingsmetoder.
I flere årtier har forskere genereret oronasal fistel (ONF) -modellen i forskellige dyrearter, herunder rotter18,19, smågrise 20,21, minigrise22 og hunde 23, da disse arter har en betydelig hård gane, der er egnet til kirurgisk manipulation. Imidlertid har mus en genetisk sekvens og hele genomet, der ligner menneskers, hvilket gør dem til en vigtig model til forskning og udvikling af nye lægemidler24,25,26. Desuden tilbyder mus lidt variation fra batch til batch, hvilket gør dem til et gunstigt valg til etablering af ONF-modellen12,13,27.
De detaljerede trin til oprettelse af ONF blev imidlertid ikke beskrevet, og stabiliteten af ONF-størrelsen blev ikke taget i betragtning. Derudover var verifikationen af ONF-dannelse udelukkende baseret på observation28 uden at sikre direkte kommunikation mellem mund- og næsehulen. Det blev ikke påvist på andre måder, såsom musens tab af kropsvægt på grund af vanskeligheder med at spise forårsaget af ONF. Desuden blev normal variation i sårstørrelse ikke overvejet, hvilket er afgørende for undersøgelser af lægemidler eller materialer, der fremmer eller hæmmer sårheling. Der er derfor et stort behov for at etablere en stabil og valideret ONF-model.
Formålet med denne undersøgelse var at udvikle en praktisk ONF-model, der adresserer de ovennævnte spørgsmål med håb om, at denne protokol vil tjene som grundlag for fremtidig forskning i mekanismerne for palatal sårheling og nye behandlinger for ONF.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle dyreforsøg i denne undersøgelse blev gennemgået og godkendt af den etiske komité for West China School of Stomatology, Sichuan University. Voksne C57BL/6-mus (hunmus) blev anvendt til nærværende undersøgelse.
1. Kirurgisk forberedelse
- Saml de nødvendige kirurgiske instrumenter til proceduren: germinator, oftalmologisk cautery, mikrokirurgisk saks, mikrokirurgisk pincet, sprøjter og nåle (26 g x 0,63 tommer) (figur 1A, B) (se materialetabel).
BEMÆRK: Før det kirurgiske indgreb autoklaves de kirurgiske instrumenter, herunder oftalmologisk kauteri, mikrokirurgisk pincet og mikrokirurgisk saks, ved 102,9 kPa (1,05 kg /cm 2) og 121 ° C i 20 minutter. - Saml de nødvendige kirurgiske forsyninger: kirurgiske gardiner, latexhandsker, steril bomuld, sterile plader, steril metalfolie, skumplade som kirurgisk platform, elastikker (som kan opnås ved at rive en medicinsk latexhandske) og tape (figur 1C) (se materialetabel).
BEMÆRK: Brug et separat sæt forsyninger til hver mus, herunder sprøjter og sterile ark til det kirurgiske felt. - Rengør det kirurgiske område og apparatet (lyskilde, skumplade og temperaturvedligeholdelsesanordning, se materialetabel) med spritservietter. Dæk knapper og håndtag på instrumenter, der kan være nødvendige under proceduren, med steril metalfolie.
- Åbn de enkelte instrumenter aseptisk, og placer dem forsigtigt i det kirurgiske område. Aktivér spireapparatet (se materialetabellen) og lysene til brug under proceduren. Det oftalmologiske kauteri anbringes i kimmaskinen, og det opvarmes til 250 °C i 20 minutter.
2. Kirurgisk procedure
- Udfør fiksering af musen og åbn mundhulen ved at følge nedenstående trin.
- Vælg en C57BL/6J-hunmus, der vejer 20-25 g og er 8-12 uger gammel. Opbevar musen i 7 dage, før du udfører procedurer.
- Bedøv musen ved intraperitoneal injektion af Zoletil50 (80 mg/kg) og xylazin (5 mg/kg) (se materialetabel). Påfør oftalmisk øjensalve på musens øje. Vent, indtil der ikke er noget tåklemningssvar.
BEMÆRK: Musen er klar til proceduren, når den ikke er i stand til at vende uafhængigt. - Fastgør musen til et skumbræt foret med sterile plader. Brug tape til at binde musen til den kirurgiske platform i liggende stilling (figur 2A).
- Åbn musens mundhule. Placer to nåle (26 g x 0,63 tommer) foran orbitaløreplanet og to mere bag det. Placer et gummibånd rundt om nålene og kryds fortænderne for at holde munden åben. Brug mikrokirurgisk pincet til at åbne mundvigene (figur 2B).
BEMÆRK: Sørg for, at den hårde gane er tydeligt eksponeret. Fastgør tungen under gummibåndet for at forhindre obstruktion af synsfeltet og brænding under efterfølgende forsøg.
- Opret oronasale fistel (ONF) på den hårde gane (figur 3A-F).
- Udtag det oftalmologiske kauteri, som har været opvarmet til 250 °C i 20 minutter. Placer cautery tip 1 mm væk fra skæringspunktet mellem ganens midterlinje og linjen af den første premolar, hvilket skaber en slimhindeskade i fuld tykkelse på den hårde gane i midterlinjen.
BEMÆRK: Undgå at skolde musens tunge. - Efter et par sekunder fjernes den oftalmologiske cautery, når slimhinden omkring cautery-spidsen bliver hvid.
- Anbring det oftalmologiske kauteri i kimmaskinen, og opvarm det til 250 °C i 10 minutter. Gentag det forrige trin for at forstørre såret rundt om kanterne, indtil det når en længde på 2,0 mm og en bredde på 1,5 mm.
BEMÆRK: Hver forlængelse skal følge kanten af den sidste skade. Brug en vernier caliper til at måle længden og bredden af skaden. Skaden skal dække 10% af ganen. - Brug mikrokirurgisk saks til at fjerne overskydende denatureret blødt væv omkring såret. Brug steril bomuld til at stoppe blødning og forhindre indånding, kvælning af musen. Mål såret for at sikre, at det danner en slimhindeskade i fuld tykkelse, der måler 2,0 x 1,5 mm i midterlinjen.
- Udtag det oftalmologiske kauteri, som har været opvarmet til 250 °C i 20 minutter. Placer cautery tip 1 mm væk fra skæringspunktet mellem ganens midterlinje og linjen af den første premolar, hvilket skaber en slimhindeskade i fuld tykkelse på den hårde gane i midterlinjen.
3. Postoperativ pleje
- Meloxicam administreres til musen på tidspunktet for postoperativ opvågning i en dosis på 5 mg/kg/d i 3 dage, subkutant29.
- Placer musen på en temperaturvedligeholdelsesenhed, indtil den genvinder bevidstheden helt.
BEMÆRK: Sørg for, at musen er placeret på en måde, der letter vejrtrækningen. Drej musene hvert 10.-15. minut for at forhindre blodophobning eller kollaps af lungelapper. Når musen er varmet op, skal du returnere den til sit bur. Sørg for steril gelé og bestrålet foder i bunden af buret, som musene kan forbruge.
4. Verifikation af dannelsen af oronasale fistler
BEMÆRK: Succesen med oronasal fistel (ONF) skabelse vurderes på den 7. dag efter den kirurgiske procedure.
- Forbered de nødvendige kirurgiske forsyninger: gummibånd, tape, sprøjter, kirurgiske gardiner, latexhandsker, sterile plader, steril metalfolie og skumplade.
- Brug kirurgiske gardiner og sterile handsker for at opretholde aseptiske forhold. Desinficer skumpladen, lyskilden og temperaturvedligeholdelsesanordningen med alkohol.
- Inducer generel anæstesi ved intraperitoneal injektion af Zoletil50 (80 mg / kg). Vent, indtil der ikke er noget tåklemningssvar. Brug samme metode som beskrevet i trin 2.1.3 og 2.1.4 til at immobilisere musen og udsætte den hårde gane.
- Udfør anatomisk strukturel verifikation ved at sikre, at septum stadig er synligt på sårstedet, hvilket indikerer vellykket ONF-dannelse (figur 4A, B).
- Udfør funktionel verifikation: Luk musens mundhule og injicer sterilt vand i mundhulen ved hjælp af en steril sprøjte. Den vellykkede oprettelse af ONF bekræftes, når væske strømmer fra musens næsebor.
- Placer musen på temperaturvedligeholdelsesanordningen (37 °C), indtil den genvinder bevidstheden helt. Drej musene hvert 10.-15. minut for at forhindre blodophobning eller kollaps af lungelapper.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
For at vurdere gennemførligheden og stabiliteten af denne eksperimentelle metode blev den samme procedure udført på ti mus, og der blev foretaget observationer vedrørende dødelighed, ændringer i sårstørrelse, kropsvægt og histologisk analyse. Musene blev aflivet på dag 7.
Proceduren udviste en lav dødelighed. Den oftalmologiske kauteri og germinator, afbildet i figur 1A-C, var de vigtigste instrumenter, der blev brugt i dette eksperiment. ONF-modellen blev oprettet i henhold til den medfølgende protokol. Blandt de ti mus, der blev opereret, udløb kun en på den 7. dag efter operationen. Den samlede dødelighed gennem hele eksperimentet var ca. 10%.
Resultaterne afslørede bemærkelsesværdig variation i størrelsen af ONF genereret ved hjælp af den beskrevne metode. På operationsdagen udviste alle mus ovale sår, der målte 2,0 mm i længden og 1,5 mm i bredden. Ved vurdering af ONF-dannelse på 7. dagen efter operationen blev der observeret en signifikant variation i ONF-størrelse (P = 0,0085) (figur 5A,B).
Tilstedeværelsen af ONF kan resultere i komplikationer såsom mad refluks og spisevanskeligheder, hvilket potentielt kan føre til ændringer i vægt. Derfor blev musenes kropsvægt også taget i betragtning. Musene blev vejet på operationsdagen (dag 1) og på den 7. dag (dag 7), hvor ONF-dannelsen blev undersøgt. Der blev observeret en signifikant reduktion i vægt på dag 7 sammenlignet med dag 1 (P < 0,001) (figur 6A,B). Tabet af deres kropsvægt var 25,16%.
Til histologisk analyse blev både såret og normalt væv høstet fra musene på dag 7. Isolerede ganer blev anvendt som prøver til histologisektionering. De blev anbragt i vævsindlejringskasser og fastgjort ved hjælp af 4% paraformaldehyd og 10% myresyreafkalkningsreagens. Vævene blev derefter indlejret i paraffin, skåret i 7 μm skiver langs koronale planer og farvet med hæmatoxylin og eosin (H & E). Histologisk analyse af ONF afslørede tab af hård ganeslimhinde, denuderet knogle og ONF-dannelse (figur 7). Histologi af lungerne blev udført, og der blev ikke påvist abnormiteter mellem normale mus og ONF-mus.
Figur 1: Kirurgiske instrumenter og forsyninger . (A) Den germinator, der anvendes til opvarmning af oftalmologisk kauteri. (B) Kirurgiske instrumenter: oftalmologisk kauteri, mikrokirurgisk saks, mikrokirurgisk pincet, sprøjter og nåle (26 g x 0,63 tommer). (C) Kirurgisk udstyr: kirurgiske gardiner, sterile handsker, steril bomuld, sterile plader, steril metalfolie, skumplade, elastikker og tape. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 2: Fastgørelse af musen og åbning af mundhulen . (A) Musens forben blev tapet for at sikre den. (B) Sprøjtekanyler blev indsat i skumpladen, og et elastik blev anbragt over nålene. Musens mundhule blev åbnet ved hjælp af et gummibånd og mikrokirurgisk pincet. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 3: Dannelse af den oronasale fistel . (A) Eksponering af mundhulen. (B) Anbringelse af spidsen af det oftalmologiske kauteri på midterlinjen af den hårde gane. (C) Fjernelse af oftalmologisk kauteri. (D) Fjernelse af overskydende blødt væv omkring såret ved hjælp af mikrokirurgisk saks. (E) Stop blødning ved hjælp af steril bomuld. (F) Endelig dannet palatal sår. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 4: Undersøgelse af palatalsåret på 7. dagen efter operationen . (A) Palatal sår på dag 1. (B) Palatal sår på dag 7. Hvide pile angiver oronasale fistel (ONF). Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 5: Størrelsen af det palatale sår på dag 1 og dag 7. (A) Middelværdier for mus på dag 1 og 7. (B) Signifikant forskel verificeret ved hjælp af parrede prøver t-test. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 6: Musenes vægt på dag 1 og dag 7. (A) Middelværdier for mus på dag 1 og dag 7. (B) Signifikant forskel verificeret ved hjælp af parrede prøver t-test. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 7: Histologisk observation. Histologisk analyse af ONF viser tab af hård ganeslimhinde, denuded knogle og ONF dannelse. (A) Oranasale fistel på dag 7, forstørrelse: 4x. (B) Oranasale fistel på dag 7, forstørrelse: 10x. (C) Ingen skadekontrol, forstørrelse: 4x. (D) Ingen skadekontrol, forstørrelse: 10x. Sort pil viser placeringen af ONF. Skalastænger: A,C = 200 μm; B,D = 100 μm. Klik her for at se en større version af dette tal.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Forskere har udforsket forskellige materialer, lægemidler og nye teknikker til behandling af ONF 10,11,12,13,14,15,16,17. Med fremskridt inden for kirurgiske procedurer er forekomsten og gentagelsen af ONF blevet reduceret. På grund af sygdommens unikke egenskaber er antallet af ONF-patienter i klinikken imidlertid begrænset, hvilket nødvendiggør en standardiseret model til undersøgelse af potentielle behandlinger. Mens flere metoder til oprettelse af ONF-modeller er blevet beskrevet 18,19,20,21,22,23, var de ofte korte og manglede detaljeret diskussion af den eksperimentelle metode. Dannelsen af ONF er blevet verificeret gennem mikroskopiske og histologiske undersøgelser, der beskriver de histopatologiske træk12,13,27. Denne protokol havde til formål at etablere en reproducerbar musemodel af ONF for at lette forskningen.
Det var en udfordring at opnå ensartet oprettelse af ONF. For at sikre reproducerbarhed var det afgørende at beskadige musenes ganer ensartet. Kontrol af diameteren på ONF, minimering af sårheling og effektiv stop af blødning var vigtige trin i skabelsen af ONF. Mikrokirurgisk saks blev brugt til at fjerne overskydende blødt væv omkring såret efter brug af oftalmologisk kauteri, hvorved ændringer i sårdiameter minimeres under helingsfasen. Brug af mikrokirurgisk saks til at fjerne overskydende væv medførte imidlertid risikoen for betydelig blødning og endda død af musene, hvilket bidrog til højere dødelighed observeret i andre eksperimenter12,13,27. I denne protokol blev kombinationen af mikrokirurgisk saks og en hæmostatisk oftalmisk cautery anvendt til at denaturere og fjerne overskydende væv, mens steril bomuld blev brugt til at kontrollere blødning. Denne metode reducerede signifikant blødning eller opnåede endda fuldstændig hæmostase på grund af den cauterizing virkning af det opvarmede oftalmiske cautery.
En alternativ metode til oprettelse af ONF-modellen i mus er blevet rapporteret, der involverer brugen af en biopsistans 13,27. Mens denne metode gav bedre kontrol over sårdiameteren på grund af stansens ensartede størrelse, havde den en høj fejlrate og udgjorde udfordringer med at styre den krævede kraft, hvilket potentielt kunne føre til musenes død. Det var vanskeligt at kontrollere dybden og styrken af ONF-skabelsen med denne metode, og det var udfordrende at afgøre, om næseskillevæggen var nået. Derudover var det problematisk at kontrollere blødningen, og mus var i fare for kvælning på grund af alvorlig blødning under eksperimentet.
Der er dog begrænsninger for denne eksperimentelle metode. For det første kan sårets størrelse ikke styres af den samme fistelstørrelse i hver mus sammenlignet med en biopsistans med en fast diameterstørrelse. Og måleværktøjer skal bruges til at maksimere størrelsen på hver fistel. Størrelsen af det palatale sår er afgørende for eksperimentet, da forsinket heling af såret er centralt for ONF-dannelse. Derfor er det vigtigt at bestemme en passende størrelse for palatalsåret. Hvis såret er for lille, kan det helbrede hurtigt og ikke opfylde tidskravene til efterfølgende forsøg. Omvendt, hvis det er for stort, kan mus dø af overdreven blodtab under operationen eller opleve vanskeligheder med at spise efter operationen, hvilket fører til sult. Derfor er det berettiget at udforske den optimale størrelse af palatalsåret. Ikke desto mindre blev den størrelse (2,0 mm x 1,5 mm), der blev anvendt i det nuværende eksperiment, anset for passende. I denne protokol bruger vi kun hunmus, men enten hun- eller hanmus kan vælges i henhold til studiets design.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har intet at afsløre.
Acknowledgments
Dette arbejde blev støttet af forsknings- og udviklingsprogrammet, West China Hospital of Stomatology, Sichuan University (RD-02-202107), Sichuan Province Science and Technology Support Program (2022NSFSC0743) og Sichuan Postdoctoral Science Foundation (TB2022005) tilskud til H. Huang.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Germinator | Electron Microscopy Sciences | 66118-20 | Heating and disinfection equipment |
| Latex gloves | Allmed | or similar | |
| Lights | Olympus | A1813 | |
| Meloxicam | MedChemExpress | HY-B0261 | crushed; 5 mg/kg |
| Microsurgical instruments (scissors and tweezers) | Jiangsu Tonghui Medical Devices Co. | M-Y-0087 | Surgical instrument |
| Ophthalmologic cautery | Suqian Wenchong Medical Equipment Co. | 1.00234E+13 | Surgical instrument |
| Sterile cotton, | Yancheng Begu Technology Co. | or similar | |
| Sterile metal foil | Biosharp | or similar | |
| Sterile sheets | 3M | XH003801129 | or similar |
| Surgical drapes | Yancheng Begu Technology Co. | or similar | |
| Syringes | Yancheng Begu Technology Co. | S-015301 | or similar |
| Tape | Bkmamlab | or similar | |
| Temperature maintenance device | Harvard Apparatus | LE-13-2104 | |
| Zoletil50 | Virbac | 80 mg/kg |
References
- Alonso, V., et al. Three-layered repair with a collagen membrane and a mucosal rotational flap reinforced with fibrine for palatal fistula closure in children. International Journal of Pediatric Otorhinolaryngology. 127, 109679 (2019).
- Garg, R., Shah, S., Uppal, S., Mittal, R. K. A statistical analysis of incidence, etiology, and management of palatal fistula. National Journal of Maxillofacial Surgery. 10 (1), 43-46 (2019).
- Mahajan, R. K., Kaur, A., Singh, S. M., Kumar, P. A retrospective analysis of incidence and management of palatal fistula. Indian Journal of Plastic Surgery. 51 (3), 298-305 (2018).
- Huang, H., et al. Validation of the Chinese Velopharyngeal Insufficiency Effects on Life Outcomes Instrument. Laryngoscope. 129 (11), E395-E401 (2019).
- Sakran, K. A., et al. Evaluation of Postoperative Outcomes in Two Cleft Palate Repair Techniques without Relaxing Incisions. Plastic and Reconstructive Surgery. , (2023).
- Sakran, K. A., et al. Evaluation of late cleft palate repair by a modified technique without relaxing incisions. Journal of Stomatology, Oral and Maxillofacial Surgery. 124 (4), 101403 (2023).
- Sakran, K. A., et al. The Sommerlad-Furlow modified palatoplasty technique: postoperative complications and implicating factors. Laryngoscope. 133 (4), 822-829 (2023).
- Sakran, K. A., et al. Early cleft palate repair by a modified technique without relaxing incisions. The Cleft Palate-Craniofacial Journal. , (2022).
- Chen, J., Yang, R., Shi, B., Xu, Y., Huang, H. Obturator manufacturing for oronasal fistula after cleft palate repair: a review from handicraft to the application of digital techniques. Journal of Functional Biomaterials. 13 (4), 251 (2022).
- Yussif, N., Wagih, R., Selim, K. Propylene mesh versus acrylic resin stent for palatal wound protection following free gingival graft harvesting: a short-term pilot randomized clinical trial. BMC Oral Health. 21 (1), 208 (2021).
- Miron, R. J., et al. Platelet-rich fibrin and soft tissue wound healing: a systematic review. Tissue Engineering Part B: Reviews. 23 (1), 83-99 (2017).
- Ballestas, S. A., et al. Improving hard palate wound healing using immune modulatory autotherapies. Acta Biomaterialia. 91, 209-219 (2019).
- Ferreira, C. L., et al. Electrical stimulation enhances early palatal wound healing in mice. Archives of Oral Biology. 122, 105028 (2021).
- Lindley, L. E., Stojadinovic, O., Pastar, I., Tomic-Canic, M. Biology and Biomarkers for Wound Healing. Plastic and Reconstructive Surgery. 138 (3 Suppl), 18s-28s (2016).
- Xu, Y., et al. Rapid Additive Manufacturing of a Superlight Obturator for Large Oronasal Fistula in Pediatric Patient. Laryngoscope. 133 (6), 1507-1512 (2022).
- Leenstra, T. S., Kuijpers-Jagtman, A. M., Maltha, J. C. The healing process of palatal tissues after palatal surgery with and without implantation of membranes: an experimental study in dogs. Journal of Materials Science: Materials in Medicine. 9 (5), 249-255 (1998).
- In de Braekt, M. M., van Alphen, F. A., Kuijpers-Jagtman, A. M., Maltha, J. C. Wound healing and wound contraction after palatal surgery and implantation of poly-(L-lactic) acid membranes in beagle dogs. Journal of Oral and Maxillofacial Surgery. 50 (4), 359-365 (1992).
- Suragimath, G., Krishnaprasad, K. R., Moogla, S., Sridhara, S. U., Raju, S. Effect of carbonated drink on excisional palatal wound healing: A study on Wistar rats. Indian Journal of Dental Research. 21 (3), 330-333 (2010).
- Zhu, T., Park, H. C., Son, K. M., Yang, H. -C. Effects of dimethyloxalylglycine on wound healing of palatal mucosa in a rat model. BMC Oral Health. 15 (1), 60 (2015).
- Kirschner, R. E., et al. Repair of oronasal fistulae with acellular dermal matrices. Plastic and Reconstructive Surgery. 118 (6), 1431-1440 (2006).
- Rohleder, N. H., et al. Repair of oronasal fistulae by interposition of multilayered amniotic membrane allograft. Plastic and Reconstructive Surgery. 132 (1), 172-181 (2013).
- Kesting, M. R., et al. Repair of oronasal fistulas with human amniotic membrane in minipigs. British Journal of Oral and Maxillofacial Surgery. 48 (2), 131-135 (2010).
- Ayvazyan, A., et al. Collagen-gelatin scaffold impregnated with bFGF accelerates palatal wound healing of palatal mucosa in dogs. Journal of Surgical Research. 171 (2), e247-e257 (2011).
- Takao, K., Miyakawa, T. Genomic responses in mouse models greatly mimic human inflammatory diseases. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 112 (4), 1167-1172 (2015).
- Rongvaux, A., et al. Development and function of human innate immune cells in a humanized mouse model. Nature Biotechnology. 32 (4), 364-372 (2014).
- Shan, L., Flavell, R. A., Herndler-Brandstetter, D. Development of humanized mouse models for studying human NK cells in health and disease. Methods in Molecular Biology. 2463, 53-66 (2022).
- Keswani, S. G., et al. Role of salivary vascular endothelial growth factor (VEGF) in palatal mucosal wound healing. Wound Repair and Regeneration. 21 (4), 554-562 (2013).
- Amanso, A. M., et al. Local delivery of FTY720 induces neutrophil activation through chemokine signaling in an oronasal fistula model. Regenerative Engineering and Translational Medicine. 7 (2), 160-174 (2021).
- Antiorio, A. T. F. B., et al. Administration of meloxicam to improve the welfare of mice in research: a systematic review (2000 - 2020). Veterinary Research Communications. 46 (1), 1-8 (2022).
