Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Oronazal Fistül Fare Modelinin Oluşturulması

Published: September 8, 2023 doi: 10.3791/65578

Summary

Bu makale, oronazal fistüllü bir fare modeli oluşturmak için adım adım bir prosedürü özetlemektedir. Oronazal fistül, sert damağın orta hat kısmına zarar vermek için ısıtılmış oftalmolojik koter kullanılarak oluşturulmuştur ve bu da ağız ve burun boşlukları arasında bir açıklık oluşmasına neden olur.

Abstract

Bu çalışmada oronazal fistüllerin araştırılmasında uygulanabilir bir model geliştirmek için ısıtılmış oftalmolojik koter kullanılan bir yöntem sunulmuştur. Oronazal fistül (ONF) modelini oluşturmak için C57BL/6 fareler kullanıldı. ONF'yi oluşturmak için fareler uyuşturuldu, hareketsiz hale getirildi ve sert damakları açığa çıkarıldı. Cerrahi işlem sırasında oftalmolojik koter kullanılarak sert damak orta hattında 2.0 x 1.5 mm boyutlarında tam kat mukozal yaralanma indüklendi. Deneyin başarısını sağlamak için ONF'nin boyutunu kontrol etmek ve kanamayı en aza indirmek çok önemliydi. ONF modelinin etkinliğinin doğrulanması, hem anatomik hem de fonksiyonel değerlendirmeleri kapsayacak şekilde ameliyattan sonraki 7. günde gerçekleştirildi. Oral kavite içinde nazal septumun varlığı ve oral kaviteye enjeksiyon üzerine burun deliklerinden steril su çıkışı, ONF modelinin başarılı bir şekilde kurulduğunu doğruladı. Model, düşük mortalite oranı, önemli ağırlık değişiklikleri ve ONF boyutunda minimal varyasyon ile karakterize pratik ve başarılı bir oronazal fistül gösterdi. Gelecekteki çalışmalar, damak yara iyileşmesinin mekanizmalarını aydınlatmak ve oronazal fistüller için yeni tedavileri keşfetmek için bu metodolojiyi benimsemeyi düşünebilir.

Introduction

Oral ve nazal boşluklar arasında anormal bir açıklık olan oronazal fistül (ONF), klinik olarak alveoler süreçten uvulaya kadar olan yapısal bir alanda defekt olarak kendini gösterir ve genellikle yarık damak onarımını takiben bir komplikasyon olarak ortaya çıkar1. ONF'li hastalar gıda reflüsü, artikülasyon bozuklukları ve bozulmuş velofaringeal fonksiyon yaşarlarve bu da yaşam kalitelerini önemli ölçüde etkiler 2,3,4. Yarık genişliği, Veau tipi, cerrahi yöntem 5,6,7,8 gibi faktörlere bağlı olarak postoperatif ONF oranı %2,4 ile %55 arasında değişmektedir. Ek olarak, ONF onarımı sonrası nüks oranı yüksektir ve %0 ile %43 arasında değişmektedir9.

Son zamanlarda ONF alanında farklı materyaller, ilaçlar ve yeni tekniklerdahil olmak üzere birçok yeni tedavi umut vaat etmektedir 10,11,12,13,14,15,16,17. Terapötik etkilerin doğru değerlendirilmesi, ONF tedavilerinin seçilmesi ve daha da geliştirilmesi için temel oluşturduğu için esastır. Bununla birlikte, ONF'lerin özellikleri farklı hastalar arasında farklılık gösterdiğinden, ameliyat dışındaki terapötik etkiler için kısa vadede geçerli bir değerlendirme elde etmek zordur. Bu nedenle, bu tedavi yöntemlerinin etkinliğini doğrulamak için bir ONF hastalığı modeli oluşturmak gereklidir.

Birkaç on yıl boyunca, araştırmacılar sıçanlar18,19, domuz yavruları20,21, mini domuzlar 22 ve köpekler23 dahil olmak üzere çeşitli hayvan türlerinde oronazal fistül (ONF) modelini oluşturdular, çünkü bu türler cerrahi manipülasyon için uygun önemli bir sert damağa sahiptir. Bununla birlikte, fareler, insanlarınkine benzer bir genetik diziye ve tüm genoma sahiptir, bu da onları yeni ilaçların araştırılması ve geliştirilmesi için önemli bir model haline getirir24,25,26. Ayrıca, fareler partiden partiye çok az varyasyon sunar, bu da onları ONF modeli 12,13,27'yi oluşturmak için uygun bir seçim haline getirir.

Bununla birlikte, ONF oluşturmak için ayrıntılı adımlar açıklanmadı ve ONF boyutunun kararlılığı dikkate alınmadı. Ek olarak, ONF oluşumunun doğrulanması, ağız ve burun boşlukları arasında doğrudan iletişim sağlamadan yalnızca gözlem28'e dayanıyordu. ONF'nin neden olduğu yeme güçlüğü nedeniyle farenin vücut ağırlığını kaybetmesi gibi başka yollarla gösterilmedi. Ayrıca, yara iyileşmesini destekleyen veya engelleyen ilaçlar veya materyaller üzerinde yapılan çalışmalar için çok önemli olan yara boyutundaki normal varyasyon dikkate alınmamıştır. Bu nedenle, kararlı ve doğrulanmış bir ONF modeli oluşturmaya güçlü bir ihtiyaç vardır.

Bu çalışmanın amacı, bu protokolün damak yara iyileşmesi mekanizmaları ve ONF için yeni tedaviler üzerine gelecekteki araştırmalar için temel oluşturacağı umuduyla, yukarıda belirtilen sorunları ele alan pratik bir ONF modeli geliştirmekti.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Bu çalışmadaki tüm hayvan prosedürleri, Sichuan Üniversitesi Batı Çin Stomatoloji Okulu Etik Komitesi tarafından gözden geçirildi ve onaylandı. Bu çalışma için yetişkin C57BL/6 fareler (dişi) kullanıldı.

1. Cerrahi hazırlık

  1. Prosedür için gerekli cerrahi aletleri toplayın: germinatör, oftalmolojik koter, mikrocerrahi makas, mikrocerrahi cımbız, şırınga ve iğneler (26 g x 0.63 inç) (Şekil 1A, B) (bkz.
    NOT: Cerrahi işlemden önce, oftalmolojik koter, mikrocerrahi cımbız ve mikrocerrahi makas dahil olmak üzere cerrahi aletleri 102.9 kPa (1.05 kg/cm2) ve 121 °C'de 20 dakika otoklavlayın.
  2. Gerekli cerrahi malzemeleri toplayın: cerrahi örtüler, lateks eldivenler, steril pamuk, steril çarşaflar, steril metal folyo, cerrahi platform olarak köpük levha, lastik bantlar (tıbbi lateks eldivenin yırtılmasıyla elde edilebilir) ve bant (Şekil 1C) (bkz.
    NOT: Cerrahi alan için şırıngalar ve steril çarşaflar dahil olmak üzere her fare için ayrı bir malzeme seti kullanın.
  3. Cerrahi alanı ve aparatı (ışık kaynağı, köpük levha ve sıcaklık bakım cihazı, bkz. Malzeme Tablosu) alkollü mendiller kullanarak temizleyin. İşlem sırasında gerekli olabilecek aletlerin topuzlarını ve kollarını steril metal folyo ile kapatın.
  4. Tek tek aletleri aseptik olarak açın ve cerrahi alana dikkatlice yerleştirin. Prosedür sırasında kullanılacak germinatörü ( Malzeme Tablosuna bakın) ve ışıkları etkinleştirin. Oftalmolojik koteri germinatöre yerleştirin ve 20 dakika boyunca 250 °C'ye ısıtın.

2. Cerrahi prosedür

  1. Farenin fiksasyonunu gerçekleştirin ve aşağıdaki adımları izleyerek ağız boşluğunu açın.
    1. 20-25 g ağırlığında ve 8-12 haftalık bir dişi C57BL/6J fare seçin. Herhangi bir işlem yapmadan önce fareyi 7 gün boyunca tutun.
    2. Fareyi intraperitoneal Zoletil50 (80 mg / kg) ve Xylazine (5 mg / kg) enjeksiyonu ile uyuşturun (bkz. Farenin gözüne oftalmik göz merhemi sürün. Ayak parmağını kıstırma tepkisi kalmayana kadar bekleyin.
      NOT: Fare, bağımsız olarak dönemediğinde prosedür için hazırdır.
    3. Fareyi steril çarşaflarla kaplı bir köpük levhaya sabitleyin. Fareyi sırtüstü pozisyonda cerrahi platforma bağlamak için bant kullanın (Şekil 2A).
    4. Farenin ağız boşluğunu açın. Yörünge kulak düzleminin önüne iki iğne (26 g x 0.63 inç) ve arkasına iki iğne daha yerleştirin. İğnelerin etrafına bir lastik bant yerleştirin ve ağzı açık tutmak için kesici dişleri çaprazlayın. Ağzın köşelerini açmak için mikrocerrahi cımbız kullanın (Şekil 2B).
      NOT: Sert damağın net bir şekilde açıkta olduğundan emin olun. Sonraki deneyler sırasında görüş alanının engellenmesini ve yanmasını önlemek için dili lastik bandın altına sabitleyin.
  2. Sert damakta oronazal fistül (ONF) oluşturun (Şekil 3A-F).
    1. 20 dakika boyunca 250 ° C'ye ısıtılmış oftalmolojik koterleri alın. Koter ucunu, damağın orta hattı ile birinci premolar hattının kesişme noktasından 1 mm uzağa yerleştirin ve orta hatta sert damakta tam kalınlıkta bir mukozal yaralanma oluşturun.
      NOT: Farenin dilini haşlamaktan kaçının.
    2. Birkaç saniye sonra, koter ucunun etrafındaki mukoza beyazlaştığında oftalmolojik koteri çıkarın.
    3. Oftalmolojik koteri germinatöre yerleştirin ve 10 dakika boyunca 250 °C'ye ısıtmaya devam edin. Yarayı 2,0 mm uzunluğa ve 1,5 mm genişliğe ulaşana kadar kenarlarda büyütmek için önceki adımı tekrarlayın.
      NOT: Her uzatma, son yaralanmanın kenarını takip etmelidir. Yaralanmanın uzunluğunu ve genişliğini ölçmek için sürmeli bir kumpas kullanın. Yaralanma damağın %10'unu kaplamalıdır.
    4. Yaranın etrafındaki fazla denatüre yumuşak dokuyu çıkarmak için mikrocerrahi makas kullanın. Kanamayı durdurmak ve farenin solunmasını önlemek için steril pamuk kullanın. Orta hatta 2.0 x 1.5 mm ölçülerinde tam kalınlıkta sert damak mukozal yaralanması oluşturduğundan emin olmak için yarayı ölçün.

3. Ameliyat sonrası bakım

  1. Ameliyat sonrası uyanma sırasında fareye Meloksikam'ı 3 gün boyunca 5 mg / kg / gün dozunda, deri altındanuygulayın 29.
  2. Fareyi, bilincini tamamen geri kazanana kadar bir sıcaklık bakım cihazına yerleştirin.
    NOT: Farenin nefes almayı kolaylaştıracak şekilde yerleştirildiğinden emin olun. Kan birikmesini veya akciğer loblarının çökmesini önlemek için fareleri her 10-15 dakikada bir döndürün. Fare ısındıktan sonra kafesine geri koyun. Farelerin tüketmesi için kafesin dibinde steril jöle ve ışınlanmış yem sağlayın.

4. Oronazal fistül oluşumunun doğrulanması

NOT: Oronazal fistül (ONF) oluşturma başarısı cerrahi işlemi takip eden 7. günde değerlendirilir.

  1. Gerekli cerrahi malzemeleri hazırlayın: lastik bant, bant, şırıngalar, cerrahi örtüler, lateks eldivenler, steril çarşaflar, steril metal folyo ve köpük levha.
  2. Aseptik koşulları korumak için cerrahi örtüler ve steril eldivenler giyin. Köpük levhayı, ışık kaynağını ve sıcaklık bakım cihazını alkolle dezenfekte edin.
  3. Zoletil50'nin (80 mg / kg) intraperitoneal enjeksiyonu ile genel anesteziyi indükleyin. Ayak parmağını kıstırma tepkisi kalmayana kadar bekleyin. Fareyi hareketsiz hale getirmek ve sert damağı ortaya çıkarmak için adım 2.1.3 ve 2.1.4'te açıklanan yöntemin aynısını kullanın.
  4. Septumun yara bölgesinde hala görünür olduğundan emin olarak anatomik yapısal doğrulama yapın, bu da başarılı ONF oluşumunu gösterir (Şekil 4A, B).
  5. İşlevsel doğrulama yapın: farenin ağız boşluğunu kapatın ve steril bir şırınga kullanarak ağız boşluğuna steril su enjekte edin. ONF'nin başarılı bir şekilde oluşturulması, farenin burun deliklerinden sıvı aktığında doğrulanır.
  6. Fareyi, bilinci tamamen yerine gelene kadar sıcaklık bakım cihazına (37 °C) yerleştirin. Kan birikmesini veya akciğer loblarının çökmesini önlemek için fareleri her 10-15 dakikada bir döndürün.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Bu deneysel yöntemin fizibilitesini ve stabilitesini değerlendirmek için on fare üzerinde aynı prosedür uygulandı ve mortalite, yara boyutundaki değişiklikler, vücut ağırlığı ve histolojik analiz ile ilgili gözlemler yapıldı. Farelere 7. günde ötenazi uygulandı.

Prosedür düşük bir mortalite oranı sergiledi. Şekil 1A-C'de gösterilen oftalmolojik koter ve germinatör, bu deneyde kullanılan anahtar araçlardı. ONF modeli, sağlanan protokole göre oluşturulmuştur. Ameliyat edilen on fareden sadece birinin süresi ameliyattan sonraki 7. günde sona erdi. Deney boyunca genel ölüm oranı yaklaşık% 10 idi.

Sonuçlar, açıklanan yöntem kullanılarak oluşturulan ONF'nin boyutunda kayda değer bir değişkenlik olduğunu ortaya koydu. Ameliyat gününde, tüm fareler 2.0 mm uzunluğunda ve 1.5 mm genişliğinde oval şekilli yaralar sergiledi. Ameliyat sonrası 7. günde ONF oluşumu değerlendirildiğinde, ONF boyutunda anlamlı bir varyasyon gözlendi (P = 0.0085) (Şekil 5A,B).

ONF'nin varlığı, gıda reflüsü ve yeme güçlüğü gibi komplikasyonlara neden olabilir ve potansiyel olarak kilo değişikliklerine yol açabilir. Bu nedenle, farelerin vücut ağırlığı da dikkate alındı. Fareler ameliyat günü (1. gün) ve ONF oluşumunun incelendiği 7. günde (7. gün) tartıldı. 7. günde 1. güne göre ağırlıkta önemli bir azalma gözlendi (P < 0.001) (Şekil 6A, B). Vücut ağırlığı kaybı %25.16 idi.

Histolojik analiz için, 7. günde farelerden hem yara hem de normal doku toplandı. İzole damaklar histoloji kesiti için örnek olarak kullanıldı. Doku gömme kutularına yerleştirildiler ve %4 paraformaldehit ve %10 formik asit dekalsifikasyon reaktifi kullanılarak fikse edildiler. Dokular daha sonra parafine gömüldü, koronal düzlemler boyunca 7 μm'lik dilimler halinde bölündü ve hematoksilen ve eozin (H & E) ile boyandı. ONF'nin histolojik analizinde sert damak mukozasında kayıp, denude kemik ve ONF oluşumu saptandı (Şekil 7). Akciğerlerin histolojisi yapıldı ve normal ve ONF fareleri arasında herhangi bir anormallik tespit edilmedi.

Figure 1
Şekil 1: Cerrahi aletler ve malzemeler . (A) Oftalmolojik koteri ısıtmak için kullanılan germinatör. (B) Cerrahi aletler: oftalmolojik koter, mikrocerrahi makas, mikrocerrahi cımbız, şırınga ve iğneler (26 g x 0,63 inç). (C) Cerrahi malzemeler: cerrahi örtüler, steril eldivenler, steril pamuk, steril çarşaflar, steril metal folyo, köpük levha, lastik bantlar ve bant. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Figure 2
Şekil 2: Farenin sabitlenmesi ve ağız boşluğunun açılması. (A) Farenin ön ayakları sabitlemek için bantlanmıştır. (B) Şırınga iğneleri köpük levhaya sokuldu ve iğnelerin üzerine bir lastik bant yerleştirildi. Farenin ağız boşluğu lastik bant ve mikrocerrahi cımbız kullanılarak açıldı. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Figure 3
Şekil 3: Oronazal fistülün oluşturulması . (A) Ağız boşluğunu açığa çıkarmak. (B) Oftalmolojik koterin ucunun sert damağın orta hat kısmına yerleştirilmesi. (C) Oftalmolojik koterin çıkarılması. (D) Mikrocerrahi makas kullanarak yara çevresindeki fazla yumuşak dokunun çıkarılması. (E) Steril pamuk kullanarak kanamayı durdurmak. (F) Nihai oluşan damak yarası. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Figure 4
Şekil 4: Ameliyat sonrası 7. günde damak yarasının muayenesi. (A) 1. günde damak yarası. (B) 7. günde damak yarası. Beyaz oklar oronazal fistül (ONF) gösterir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Figure 5
Şekil 5: Damak yarasının 1. ve 7. gündeki boyutu . (A) 1. ve 7. günlerde fareler için ortalama değerler. (B) Eşleştirilmiş örnekler t-testi kullanılarak doğrulanan önemli fark. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Figure 6
Şekil 6: Farelerin 1. ve 7. gündeki ağırlığı . (A) Fareler için 1. ve 7. gündeki ortalama değerler. (B) Eşleştirilmiş örnekler t-testi kullanılarak doğrulanan önemli fark. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Figure 7
Şekil 7: Histolojik gözlem. ONF'nin histolojik analizi, sert damak mukozası, denuded kemik kaybı ve ONF oluşumunu gösterir. (A) 7. günde oronazal fistül, büyütme: 4x. (B) 7. günde oronazal fistül, büyütme: 10x. (C) Yaralanma yok kontrol, büyütme: 4x. (D) Yaralanma yok kontrol, büyütme: 10x. Siyah ok, ONF'nin konumunu gösterir. Ölçek çubukları: A,C = 200 μm; B,D = 100 μm. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Araştırmacılar, ONF 10,11,12,13,14,15,16,17'yi tedavi etmek için çeşitli materyaller, ilaçlar ve yeni teknikler araştırdılar. Cerrahi işlemlerdeki gelişmelerle ONF'nin insidansı ve nüksü azalmıştır. Bununla birlikte, hastalığın benzersiz özellikleri nedeniyle, klinikteki ONF hastalarının sayısı sınırlıdır ve potansiyel tedavileri incelemek için standart bir model gerektirir. ONF modelleri oluşturmak için çeşitli yöntemler 18,19,20,21,22,23 olarak tanımlanmış olsa da, bunlar genellikle kısaydı ve deneysel yöntemin ayrıntılı tartışmasından yoksundu. ONF oluşumu, histopatolojik özellikleri tanımlayan mikroskobik ve histolojik çalışmalarla doğrulanmıştır12,13,27. Bu protokol, araştırmayı kolaylaştırmak için ONF'nin tekrarlanabilir bir fare modelini oluşturmayı amaçladı.

Tek tip ONF oluşturmayı başarmak bir zorluk teşkil ediyordu. Tekrarlanabilirliği sağlamak için, farelerin damaklarına eşit şekilde zarar vermek çok önemliydi. ONF'nin çapını kontrol etmek, yara iyileşmesini en aza indirmek ve kanamayı etkili bir şekilde durdurmak, ONF'nin oluşturulmasında kilit adımlardı. Oftalmolojik koter kullanıldıktan sonra yara çevresindeki fazla yumuşak dokuyu çıkarmak için mikrocerrahi makaslar kullanıldı, böylece iyileşme aşamasında yara çapındaki değişiklikler en aza indirildi. Bununla birlikte, fazla dokuyu çıkarmak için mikrocerrahi makas kullanmak, farelerin önemli ölçüde kanama ve hatta ölüm riskini taşıdı ve diğer deneylerde gözlemlenen daha yüksek ölüm oranlarına katkıda bulundu12,13,27. Bu protokolde, fazla dokuyu denatüre etmek ve çıkarmak için mikrocerrahi makas ve hemostatik oftalmik koter kombinasyonu kullanılırken, kanamayı kontrol etmek için steril pamuk kullanıldı. Bu yöntem, ısıtılmış oftalmik koterin koterize edici etkisi nedeniyle kanamayı önemli ölçüde azalttı ve hatta tam hemostaz sağladı.

Farelerde ONF modelini oluşturmak için biyopsi zımbası13,27 kullanımını içeren alternatif bir yöntem bildirilmiştir. Bu yöntem, zımbanın tutarlı boyutu nedeniyle yara çapı üzerinde daha iyi kontrol sağlarken, yüksek bir başarısızlık oranına sahipti ve gerekli kuvvetin yönetiminde zorluklar yaratarak potansiyel olarak farelerin ölümüne yol açtı. Bu yöntemle ONF oluşumunun derinliğini ve gücünü kontrol etmek zordu ve nazal septuma ulaşılıp ulaşılmadığını belirlemek zordu. Ek olarak, kanamayı kontrol etmek sorunluydu ve fareler deney sırasında şiddetli kanama nedeniyle boğulma riski altındaydı.

Ancak, bu deneysel yöntemin sınırlamaları vardır. İlk olarak, yaranın boyutu, sabit çaplı bir biyopsi zımbasına kıyasla her farede aynı fistül boyutuyla kontrol edilemez. Ve her bir fistülün boyutunu en üst düzeye çıkarmak için ölçüm araçları kullanılmalıdır. Damak yarasının boyutu deney için kritik öneme sahiptir, çünkü yaranın gecikmiş iyileşmesi ONF oluşumunun merkezinde yer alır. Bu nedenle damak yarası için uygun bir boyut belirlenmesi önemlidir. Yara çok küçükse, sonraki deneyler için zaman gereksinimlerini karşılamadan hızlı bir şekilde iyileşebilir. Tersine, çok büyükse, fareler ameliyat sırasında aşırı kan kaybından ölebilir veya ameliyat sonrası yemek yemede zorluk çekerek açlığa neden olabilir. Bu nedenle, damak yarasının optimal boyutunun araştırılması garanti edilir. Bununla birlikte, mevcut deneyde kullanılan boyut (2.0 mm x 1.5 mm) uygun görülmüştür. Bu protokolde sadece dişi fareler kullanıyoruz, ancak çalışmanın tasarımına göre dişi veya erkek fareler seçilebilir.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yok.

Acknowledgments

Bu çalışma, Araştırma ve Geliştirme Programı, Batı Çin Stomatoloji Hastanesi, Sichuan Üniversitesi (RD-02-202107), Sichuan Eyaleti Bilim ve Teknoloji Destek Programı (2022NSFSC0743) ve Sichuan Doktora Sonrası Bilim Vakfı (TB2022005) tarafından desteklenmiştir.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Germinator Electron Microscopy Sciences  66118-20 Heating and disinfection equipment
Latex gloves Allmed or similar
Lights Olympus A1813
Meloxicam MedChemExpress HY-B0261 crushed; 5 mg/kg
Microsurgical instruments (scissors and tweezers) Jiangsu Tonghui Medical Devices Co. M-Y-0087 Surgical instrument
Ophthalmologic cautery Suqian Wenchong Medical Equipment Co. 1.00234E+13 Surgical instrument
Sterile cotton, Yancheng Begu Technology Co. or similar
Sterile metal foil Biosharp or similar
Sterile sheets 3M XH003801129 or similar
Surgical drapes Yancheng Begu Technology Co. or similar
Syringes Yancheng Begu Technology Co. S-015301 or similar
Tape Bkmamlab or similar
Temperature maintenance device Harvard Apparatus  LE-13-2104
Zoletil50 Virbac 80 mg/kg

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Alonso, V., et al. Three-layered repair with a collagen membrane and a mucosal rotational flap reinforced with fibrine for palatal fistula closure in children. International Journal of Pediatric Otorhinolaryngology. 127, 109679 (2019).
  2. Garg, R., Shah, S., Uppal, S., Mittal, R. K. A statistical analysis of incidence, etiology, and management of palatal fistula. National Journal of Maxillofacial Surgery. 10 (1), 43-46 (2019).
  3. Mahajan, R. K., Kaur, A., Singh, S. M., Kumar, P. A retrospective analysis of incidence and management of palatal fistula. Indian Journal of Plastic Surgery. 51 (3), 298-305 (2018).
  4. Huang, H., et al. Validation of the Chinese Velopharyngeal Insufficiency Effects on Life Outcomes Instrument. Laryngoscope. 129 (11), E395-E401 (2019).
  5. Sakran, K. A., et al. Evaluation of Postoperative Outcomes in Two Cleft Palate Repair Techniques without Relaxing Incisions. Plastic and Reconstructive Surgery. , (2023).
  6. Sakran, K. A., et al. Evaluation of late cleft palate repair by a modified technique without relaxing incisions. Journal of Stomatology, Oral and Maxillofacial Surgery. 124 (4), 101403 (2023).
  7. Sakran, K. A., et al. The Sommerlad-Furlow modified palatoplasty technique: postoperative complications and implicating factors. Laryngoscope. 133 (4), 822-829 (2023).
  8. Sakran, K. A., et al. Early cleft palate repair by a modified technique without relaxing incisions. The Cleft Palate-Craniofacial Journal. , (2022).
  9. Chen, J., Yang, R., Shi, B., Xu, Y., Huang, H. Obturator manufacturing for oronasal fistula after cleft palate repair: a review from handicraft to the application of digital techniques. Journal of Functional Biomaterials. 13 (4), 251 (2022).
  10. Yussif, N., Wagih, R., Selim, K. Propylene mesh versus acrylic resin stent for palatal wound protection following free gingival graft harvesting: a short-term pilot randomized clinical trial. BMC Oral Health. 21 (1), 208 (2021).
  11. Miron, R. J., et al. Platelet-rich fibrin and soft tissue wound healing: a systematic review. Tissue Engineering Part B: Reviews. 23 (1), 83-99 (2017).
  12. Ballestas, S. A., et al. Improving hard palate wound healing using immune modulatory autotherapies. Acta Biomaterialia. 91, 209-219 (2019).
  13. Ferreira, C. L., et al. Electrical stimulation enhances early palatal wound healing in mice. Archives of Oral Biology. 122, 105028 (2021).
  14. Lindley, L. E., Stojadinovic, O., Pastar, I., Tomic-Canic, M. Biology and Biomarkers for Wound Healing. Plastic and Reconstructive Surgery. 138 (3 Suppl), 18s-28s (2016).
  15. Xu, Y., et al. Rapid Additive Manufacturing of a Superlight Obturator for Large Oronasal Fistula in Pediatric Patient. Laryngoscope. 133 (6), 1507-1512 (2022).
  16. Leenstra, T. S., Kuijpers-Jagtman, A. M., Maltha, J. C. The healing process of palatal tissues after palatal surgery with and without implantation of membranes: an experimental study in dogs. Journal of Materials Science: Materials in Medicine. 9 (5), 249-255 (1998).
  17. In de Braekt, M. M., van Alphen, F. A., Kuijpers-Jagtman, A. M., Maltha, J. C. Wound healing and wound contraction after palatal surgery and implantation of poly-(L-lactic) acid membranes in beagle dogs. Journal of Oral and Maxillofacial Surgery. 50 (4), 359-365 (1992).
  18. Suragimath, G., Krishnaprasad, K. R., Moogla, S., Sridhara, S. U., Raju, S. Effect of carbonated drink on excisional palatal wound healing: A study on Wistar rats. Indian Journal of Dental Research. 21 (3), 330-333 (2010).
  19. Zhu, T., Park, H. C., Son, K. M., Yang, H. -C. Effects of dimethyloxalylglycine on wound healing of palatal mucosa in a rat model. BMC Oral Health. 15 (1), 60 (2015).
  20. Kirschner, R. E., et al. Repair of oronasal fistulae with acellular dermal matrices. Plastic and Reconstructive Surgery. 118 (6), 1431-1440 (2006).
  21. Rohleder, N. H., et al. Repair of oronasal fistulae by interposition of multilayered amniotic membrane allograft. Plastic and Reconstructive Surgery. 132 (1), 172-181 (2013).
  22. Kesting, M. R., et al. Repair of oronasal fistulas with human amniotic membrane in minipigs. British Journal of Oral and Maxillofacial Surgery. 48 (2), 131-135 (2010).
  23. Ayvazyan, A., et al. Collagen-gelatin scaffold impregnated with bFGF accelerates palatal wound healing of palatal mucosa in dogs. Journal of Surgical Research. 171 (2), e247-e257 (2011).
  24. Takao, K., Miyakawa, T. Genomic responses in mouse models greatly mimic human inflammatory diseases. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 112 (4), 1167-1172 (2015).
  25. Rongvaux, A., et al. Development and function of human innate immune cells in a humanized mouse model. Nature Biotechnology. 32 (4), 364-372 (2014).
  26. Shan, L., Flavell, R. A., Herndler-Brandstetter, D. Development of humanized mouse models for studying human NK cells in health and disease. Methods in Molecular Biology. 2463, 53-66 (2022).
  27. Keswani, S. G., et al. Role of salivary vascular endothelial growth factor (VEGF) in palatal mucosal wound healing. Wound Repair and Regeneration. 21 (4), 554-562 (2013).
  28. Amanso, A. M., et al. Local delivery of FTY720 induces neutrophil activation through chemokine signaling in an oronasal fistula model. Regenerative Engineering and Translational Medicine. 7 (2), 160-174 (2021).
  29. Antiorio, A. T. F. B., et al. Administration of meloxicam to improve the welfare of mice in research: a systematic review (2000 - 2020). Veterinary Research Communications. 46 (1), 1-8 (2022).

Tags

Oronazal Fistül Fare Modeli Isıtmalı Oftalmolojik Koter Sert Damak Mukozal Yaralanma Cerrahi İşlem Anatomik Değerlendirme Fonksiyonel Değerlendirme Nazal Septum Steril Su Çıkışı ONF Boyut Değişimi Damak Yara İyileşmesi Yeni Tedaviler
Oronazal Fistül Fare Modelinin Oluşturulması
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Chen, J., Yin, J., Zhang, S.,More

Chen, J., Yin, J., Zhang, S., Zhuang, S., Yang, R., Xu, Y., Zheng, Q., Shi, B., Huang, H. Establishment of an Oronasal Fistula Mice Model. J. Vis. Exp. (199), e65578, doi:10.3791/65578 (2023).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter