转基因蠕虫常用<em> C。线虫</em>研究。描述的是一个简单而有效,协议引入蠕虫使用DNA包覆的金粒子枪法转基因。参与的努力和轰炸的结果相媲美注射代转基因动物。
使用自由生活线虫C.的实验室的数量线虫是迅速增长。这种生物模型的普及是由于快速的一代人的时间和寿命短,维护容易和便宜,完全测序的基因组,和RNAi的资源和突变的动物数组。此外,分析了C.线虫基因组中发现了蠕虫和高等脊椎动物之间极大的相似性,这表明蠕虫病毒的研究可能是一个重要的辅助手段,在整个小鼠培养细胞进行的研究。一个强大的蠕虫病毒的研究和重要组成部分,是利用转基因动物的研究,基因定位和功能的能力。可以创建可以通过蠕虫生殖显微注射,或通过利用基因枪法转基因动物。炮击是一个较新的技术并不太熟悉的实验室。在这里,我们描述了一个简单的协议生成的Bio – Rad公司PDS – 1000系统使用的金粒子枪法转基因蠕虫。到雌雄同体生殖与DNA显微注射法相比,该协议已经不需要特殊技能,从运营商方面识别蠕虫解剖或执行显微注射的优势。通常从一个单一的轰炸进一步多个转基因株系。此外,在对比,以显微注射法,基因枪法染色体外的阵列和集成的转基因与转基因动物。能够获得综合的转基因株系,可避免使用整合外源DNA诱变协议。总之,基因枪法可以代转基因动物的一个极具吸引力的一种方法,尤其是对不感兴趣的投资需要的时间和精力,成为显微注射技术熟练的调查。
基因枪法是一个简单的的方法,引入外源DNA的许多生物,包括 C。 线虫 1,5,6,7,16。依靠黄金颗粒,形成了一个复杂的DNA 与氯化钙存在。阳离子多胺,如亚精胺,保护核酸在体内降解的DNA。既然精胺是一种不稳定的分子,它是重要的存储在小分装于-20 ° C,并在执行轰击之前做出正确的解决方案。正如我们在轰炸协议描述,鱼精蛋白可以用来代替亚精胺提供外源DNA 1…
The authors have nothing to disclose.
这项工作是从美国匹兹堡大学和美国国立卫生研究院授予AG028977 ALF的种子资金支持