Techniek om Fungiform (smaak) papillen verzamelen van Human Tongue
Summary
Kennis van de moleculaire mechanismen die ten grondslag liggen smaak transductie heeft onlangs genoten van belangrijke vooruitgang, vooral door het gebruik van dierlijke modellen. Echter, de grote verscheidenheid in smaak sensitiviteit en specificiteit bij zoogdieren garandeert studies in menselijk weefsel. Beschrijven we een biopsie techniek om levende cellen te verzamelen smaak van de papillen op de menselijke tong.
Abstract
Het gevoel van smaak is van cruciaal belang voor het menselijk leven. Het informeert de instelling over de kwaliteit van voedsel dat mogelijk zal worden ingenomen en stimuleert de metabolische processen die het spijsverteringskanaal te bereiden voor de spijsvertering. Gestage vooruitgang wordt geboekt bij het begrijpen van de vroege biochemische en moleculaire gebeurtenissen die ten grondslag liggen smaak transductie (voor een overzicht, Breslin en Spector, 2008 1). Er is echter tot dusver geboekte vooruitgang vooral te danken aan diermodellen. Toch, omdat grote verschillen in de receptor specificiteit en receptor dichtheid varieert van soort tot soort, zullen de menselijke smaak transductie alleen begrepen worden door gebruik te maken menselijke smaak weefsel. Hier beschrijven we een biopsie techniek om menselijke fungiform papillen, zichtbaar als ronde roze voorste structuren, het verzamelen van ongeveer 0,5 mm in diameter die smaakpapillen bevatten. Deze biopsie papillen worden gebruikt voor diverse doeleinden, waaronder het isoleren van levensvatbare smaakknop cellen, in situ hybridisatie, immunohistochemie en, door middel van technieken van de moleculaire biologie, de identificatie van de smaak-specifieke nieuwe eiwitten.
Protocol
Discussion
Een opmerkelijke voordeel van het gebruik van menselijke cellen is hun specificiteit. De hier beschreven procedure in detail biedt tong weefsel voor het isoleren van smaak receptor cellen van de mens. Deze smaak cellen kunnen worden gebruikt voor moleculaire studies, die om moleculen te belangrijk voor de transductie van smaak informatie te ontdekken, en voor calcium imaging studies die smaak cel activiteit monitor aan stimuli. Bovendien kan de tong weefsel door deze procedure worden geanalyseerd met verschillende techn…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Dit werk werd ondersteund door NIH R21 DC03969-01 (tot JGB). Wij danken dr. Fritz Lischka voor het vastleggen van enkele smaakpapil cellen, Dr Tauf Huque voor het uitvoeren van de RT-PCR zie figuur 4B en de heer D. Bayley en mevrouw S. Alarcon voor technische ondersteuning. M. Yanina Pepino is een mede-ondersteund door een NIDAT32 DA07313 Washington University School of Medicine, St. Louis, MO (Cottler, LB PI).
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| McPherson-Vannas. Curved, sharp cutting edge 5mm. Comb, tip width 0.2 mm overall length 3″ | Roboz Surgical Instruments Co., Inc. Gaithersburg, MD 20898 | RS-5603, Roboz | ||
| Small Dumont forceps | Roboz Surgical Instruments Co. | RS-4915, Roboz |
References
- Breslin, P. A., Spector, A. C. Mammalian taste perception. Curr Biol. 26 (4), R148-R155 (2008).
- Miller, I., Doty, R. I., Dekker, M. Anatomy of the peripheral taste system. Handbook of Olfaction and Gustation. , 521-547 (1995).
- . Figure 12.67. Gray’s Anatomy: The Anatomical Basis of Medicine and Surgery. , (1995).
- Huque, T., Cowart, B. J., Dankulich-Nagrudny, L., Pribitkin, E. A., Bayley, D. L., Spielman, A., Feldman, I., S, R., Mackler, . Sour ageusia in two individuals implicates ion channels of the ASIC and PKD families in human sour taste perception at the anterior tongue. PLoS One. 4 (10), e7347-e7347 (2009).
- MacDonald, J. F., Mody, I., Salter, M. W., Spielman, A. I., Spielman, A. I., Brand, J. G. Patch-clamping of taste cells in mouse. Experimental Cell Biology of Taste and Olfaction. , 329-332 (1995).
