आणविक स्वाद पारगमन अंतर्निहित तंत्र का ज्ञान हाल ही में उल्लेखनीय प्रगति का आनंद लिया है, काफी हद तक वजह से पशु मॉडल का उपयोग करने के लिए. हालांकि, स्वाद और स्तनधारियों मानव ऊतकों में वारंट अध्ययन के बीच संवेदनशीलता और विशिष्टता में व्यापक विविधता है. हम एक बायोप्सी तकनीक मानव जीभ पर papillae से रहने स्वाद कोशिकाओं को इकट्ठा वर्णन.
Abstract
स्वाद की भावना मानव जीवन के लिए महत्वपूर्ण है. यह खाना है कि संभावित किया जाता हो जाएगा की गुणवत्ता के बारे में शरीर को सूचित और चयापचय प्रक्रियाओं है कि पाचन के लिए भोजनप्रणाली तैयार उत्तेजित करता है. स्थिर प्रगति जल्दी जैव रासायनिक और आणविक स्वाद पारगमन (समीक्षा के लिए, Breslin और स्पेक्टर 1, 2008) अंतर्निहित घटनाओं को समझने की दिशा में किया जा रहा है. हालांकि, तिथि करने के लिए प्रगति पशु मॉडल से बड़े पैमाने पर हुई है. फिर भी, के बाद से रिसेप्टर विशिष्टता और रिसेप्टर घनत्व में चिह्नित मतभेद प्रजातियों के बीच भिन्न, मानव स्वाद पारगमन केवल मानव स्वाद के ऊतकों का उपयोग करके समझा जाएगा. यहाँ हम एक बायोप्सी तकनीक के बारे में 0.5 मिमी व्यास स्वाद वाले मानव fungiform papillae, गोल गुलाबी पूर्वकाल संरचनाओं के रूप में दिखाई एकत्र वर्णन. ये biopsied papillae व्यवहार्य स्वाद कली कोशिकाओं के अलगाव, और स्वस्थानी संकरण immunohistochemistry, में, आण्विक जीव विज्ञान की तकनीकों के माध्यम से, स्वाद विशिष्ट उपन्यास प्रोटीन की पहचान सहित कई प्रयोजनों के लिए उपयोग किया जाता है.
Protocol
1. परिचय और जनरल के लिए विचारणीय बातें सामान्य प्रक्रिया पूर्वकाल जीभ की पृष्ठीय सतह के एक छोटे से क्षेत्र (1 2 सेमी), (स्वाद) fungiform papillae की संख्या (6-8) है कि anesthetized क्षेत्र से हटाने का उपयोग एक घुमावद?…
Discussion
एक करने के लिए मानव कोशिकाओं का उपयोग करने के लिए उल्लेखनीय लाभ उनकी विशिष्टता है. विस्तार में यहाँ वर्णित की प्रक्रिया मनुष्यों से स्वाद रिसेप्टर कोशिकाओं के अलगाव के लिए जीभ ऊतक प्रदान करता है. ये स्…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
यह काम एनआईएच DC03969 01-R21 (JGB के लिए) द्वारा समर्थित किया गया. हम चित्रा 4B और श्री डी. Bayley और सुश्री एस Alarcon में दिखाया तकनीकी सहायता के लिए RT-पीसीआर के प्रदर्शन के लिए एक स्वाद कली कोशिकाओं, डा. Tauf Huque पर कब्जा करने के लिए डा. फ्रिट्ज Lischka धन्यवाद. एम. Yanina Pepino एक साथी NIDAT32 DA07313 चिकित्सा के वाशिंगटन विश्वविद्यालय के स्कूल, सेंट लुइस, MO (Cottler, पौंड पीआई) द्वारा समर्थित है.
Materials
Material Name
Type
Company
Catalogue Number
Comment
McPherson-Vannas. Curved, sharp cutting edge 5mm. Comb, tip width 0.2 mm overall length 3″
Roboz Surgical Instruments Co., Inc. Gaithersburg, MD 20898
MacDonald, J. F., Mody, I., Salter, M. W., Spielman, A. I., Spielman, A. I., Brand, J. G. Patch-clamping of taste cells in mouse.Experimental Cell Biology of Taste and Olfaction. , 329-332 (1995).
Spielman, A. I., Pepino, M. Y., Feldman, R., Brand, J. G. Technique to Collect Fungiform (Taste) Papillae from Human Tongue. J. Vis. Exp. (42), e2201, doi:10.3791/2201 (2010).