Summary
, ייצור כיול ושימוש פולשני בדיקות רוטט למדוד הנוכחית bioelectric במערכות ביולוגיות שונות מתואר.
Abstract
שדות חשמליים, שנוצר על ידי תחבורה פעילה של יונים, נמצאים במערכות ביולוגיות רבות ולעיתים קרובות משרתים פונקציות חשובות רקמות ואיברים. לדוגמה, הם ממלאים תפקיד חשוב בהכוונת נדידת תאים במהלך ריפוי הפצע. כאן אנו מתארים את ייצור ושימוש של בדיקות רוטט רגישה למדידת זרמים חשמליים תאיים. החללית היא חוט מבודד, מתכת עם קצה מחודד פלטינה שחור קטן (30-35 מיקרומטר), אשר יכול לזהות זרמים יוניים בטווח 2 μA / ס"מ מלח פיזיולוגיים. החללית היא רטט ב 200 הרץ על ידי בנדר פיזואלקטריים. בנוכחות הנוכחית יוניים, החללית מזהה הבדל מתח בין הקצוות של תנועתו. נעילה ב מסננים את הרעש מגבר חיצוני על ידי נעילת לתדר של בדיקה של רטט. הנתונים נרשמים על גבי המחשב. החללית הוא מכויל בתחילת וסיום של ניסויים מלוחים המתאים, באמצעות קאמרית החל זרם של בדיוק 1.5 μA / 2 ס"מ. אנו מתארים כיצד לבצע את הבדיקות, להגדיר את המערכת לכייל. אנחנו גם להדגים את הטכניקה של מדידת הקרנית, ולהראות כמה תוצאות נציג דגימות שונות (, קרנית עור, מוח).
Protocol
1. בדיקה ייצור
בדיקות בלנק נרכשים מכשירי דיוק העולם (elgiloy / parylene חלד מצופה microelectrodes) (ר 'טבלה של חומרים כימיים מסוימים וציוד' להלן). החללית היא לחתוך 25-30 מ"מ מאחור קצה וכ 5 מ"מ של בידוד parylene בסוף לחתוך התרחקה עם אזמל (# 11 להב) כדי להבטיח חיבור טוב. בדיקה הוא רכוב מחבר R30 זהב באמצעות מוליך חשמלי נטען כסוף אפוקסי (למשל Rite-Lok SL65) [* ראה הערה למטה]. בדיקה מאוחסן לילה בטמפרטורת החדר כדי לאפשר אפוקסי להקשיח. לאחר מכן, בדיקה קצה היא מצופה בזהב ואז פלטינה, באמצעות אספקת ננו אמפר חשמל. טיפ החללית היא ושטף אצטון ומחובר פלט השלילי של מקור ננו במגבר. טיפ החללית היא מתחת למיקרוסקופ לנתח (X40) והניח הראשון פתרון ציפוי זהב (dicyanoaurate אשלגן (0.2% w / v קאו (CN) 2 במים מזוקקים (DH 2 O)). תיל התייחסות מחובר החיובי פלט להציב פתרון משלים את המעגל. הנוכחי של 5 NA מוחל במשך 5 דקות, לאחר מכן עלה NA 20 עד קצה הוא כמחצית גודלו הסופי הרצוי (כ - 10-15 מיקרומטר). קצה החללית היא שטפה ב DH 2 O ואז להציב פתרון platinizing (מימה חומצה chloroplatinic; 1% w / v H2PtCl6 * 6 שעות 2 O) בתוספת להוביל (II) הידראט אצטט (0.1% w / v Pb (CH3CO 2) 2 * 3H 2 O 2 ב DH O). הנוכחי של 250 NA מוחל על 5 דקות, ולאחר מכן עלה ל NA 500 עד הקצה הוא כ 80% בגודל הסופי הרצוי. הנוכחי עלה ל 1 μA ויישומי 1 התפרצויות שניות עד קוטר קצה הסופי מתקבל (כ 30-35 מיקרומטר). לבסוף, היא שטפה את קצה ב DH 2 בדיקות O. ניתן לאחסן בטמפרטורת החדר ללא הגבלת זמן. אם בדיקות פגומים, הזהב R30 מחברים ניתן שימוש חוזר.
[* הערה: חלק ממערכות בדיקה יש בדיקה הרכבה מחובר ישירות למגבר לשאת את האות. מערכות אחרות יש נקודת הרכבה נפרד מחבר האות. במקרה האחרון, חוט קצר (2-3 ס"מ) עם מחבר R30 בקצה אחד הוא מולחמים למחבר R30 הראשון, טרם הרכבה בדיקה (ראה איור 2 א).]
2. בדיקה מערכת
החללית מחוברת בנדר piezo חשמלי רכוב על positioner מיקרו 3 מימדי (איור 1). רטט Probe נשלטת על ידי אספקת כוח רוטט בדיקה אשר מאפשרת גם התאמה של משרעת ותדירות רעידות. אספקת החשמל בדיקה שולח אות התייחסות נעילה ב מגבר, אשר מציג גם את תדירות הרטט זווית פאזה. זה גם שימושי להתחבר אוסצילוסקופ כך יש התייחסות ויזואלית מהירה של רטט בדיקה. האות מ החללית הולך נעילה של מגבר. החללית מדגם כדי להימדד ניתן לצפות באמצעות מיקרוסקופ לנתח (הגדלה X6 ל X40) עם תאורה של סיבים אופטיים. במהלך מדידות הכיול מדגם, התייחסות קרקע (אדמה) חוט חייב להיות פתרון (ראה איור 2 ב). המגבר מחובר למחשב באמצעות ממשק (I / O) אנלוגי דיגיטלי. הנתונים נרשם באמצעות תוכנית Cell שלמים Strathclyde Electrophysiology של תוכנה (WinWCP).
Lock-in הגדרות מגבר: רגישות [200 μV], החלטה דינמי [רגיל], קיזוז [ב], הרחב [x1], זמן קבועים: קדם [10 s], לכתוב [0.1 s]. אם נדרשת תגובה מהירה, זמן קבועים מראש, ניתן להפחית עד 3 s. השליטה לקזז משמש כדי להביא את עקבות בדיקה סמוך למרכז המסך. אם התגובות גדולים צפויים, להתחקות אחר יכול לנוע למעלה או למטה.
WCP הגדרות התוכנה: משך הקלטת [204.8 s], דוגמאות לכל ערוץ [1024], מרווח דגימה [0.2 s], טווח מתחים [+ / - 0.2 V]. אם זרמים גדולים צפויים, טווח מתח ניתן להגדיל עד 1 V או 5 V.
3. בדיקה הגדרות
בדיקות חדש צריך להיבדק בתדירות הייחודיים שלהם זווית שלב נקבע. החללית החדשה ממוקמת בחדר כיול המכילה תמיסת מלח פיזיולוגית (תרשים 2B). אספקת הכוח מופעל בתדירות הופיע עד רטט המרבי הוא ציין. זהו תדר התהודה של החללית. באמצעות בדיקה בתדר זה יכול לגרום לחוסר יציבות לייצר רעש בהקלטה, ולכן החללית היא "דה מכוון" על ידי הפחתת 10 הרץ לתת תדר העבודה של בדיקה (בדרך כלל 150-200 הרץ). משרעת התנודה הוא מותאם כך את המרחק רטט בדיקה זהה קוטר קצה, כך שכאשר הוא בדיקה רטט "תמונה כפול" של בדיקה קצה נתפסת (ראה איור 2 ב). כדי לקבוע את זווית שלב, החללית ממוקם מלוחים בחדר כיול זרם של 1.5 μA / 2 ס"מ להחיל שוב ושוב. זווית השלב על נעילה ב מגבר מותאם עד אין תשובה. הוספה או הפחתה של 90 ° זההזווית נותנת מענה לכל היותר, וזווית זו העבודה של בדיקה זווית פאזה. זווית תדירות שלב בדיקה עבור כל מצוינים לשימוש עתידי. במהלך הניסוי, חשוב כי הגדרות אלה של זווית, תדירות אמפליטודה ופאזה אינן משתנות, כמו זה יהיה לשנות את התגובה של בדיקה. לנוחיותך, כאשר זרם זורם 'דרום אל צפון ", זה אמור לייצר הטיה כלפי מעלה (שמכונה כאן" שיא ") שבחצר הקלטה, זרם" אל צפון דרום "צריך להראות הטיה כלפי מטה ( ראה איור 3A). אם זה בצורה לא נכונה, ולאחר מכן הוספת 180 מעלות לזווית שלב נתקן את זה על ידי הטלת סבב התגובות. ראה ריד et al. 1 לקבלת מידע מפורט על התיאוריה מאחורי פונקציה בדיקה, כיול, וכו '
כיול: התגובה של החללית כדי "סטנדרטית" הנוכחי של בדיוק 1.5 μA / 2 ס"מ, להחיל את החללית בתא כיול, משמשת לחישוב הנוכחי במדגם (ראה תרשים 2B, 3A). לפני המדידה המדגם, החללית הוא מכויל פתרון מתאים, למשל BSS + פתרון דמעה מלאכותית של הקרנית. נוכחי מוחל בשני כיוונים: דרום צפון צפון דרום, ייצור מעלה הטיה כלפי מטה, בהתאמה, שווה ערך ל זרמים החוצה ופנימה, תלוי בכיוון של המדגם. עקבות בדיקה צריכה להיות הבסיס היציב רעש נמוך (השוו תאנים. 3A ו 3B). החללית הוא מכויל בסוף הניסוי בפתרון השתמשו כדי לפצות על שינוי osmolality בשל התאדות. בניתוח נתונים, מדידות מהמחצית הראשונה של הניסוי ניתן לחשב באמצעות הערכים כיול ההתחלה, מדידות מהמחצית השנייה מחושב באמצעות כיול הקצה.
מדידה לדוגמה: תא יכול להיות מתוכנן להחזיק לשתק את המדגם. לדוגמה, איור 3C מראה צלחות פטרי עם לולאות חוט כדי להחזיק את העיניים למדידות הקרנית. המנה המכילה תמיסת מלח פיזיולוגית ממוקם מתחת למיקרוסקופ לנתח ואזור הריבית על המדגם להציב להתמקד בתחום התצוגה. בדיקה ממוקם אז הפתרון ובמקביל מכוון אל פני השטח מדגם וגם להתמקד ולכן הוא באותה רמה כנקודת על המדגם כדי להימדד. החללית מועבר ככל נוח (למשל 1-2 ס"מ) הרחק המדגם, הרטט מופעלת (ואת תוכנת המחשב מוגדר להקליט) להקים בסיס יציב (אופקי) (ראה תרשים 4 א). בדיקה לאחר מכן מועבר למצב מדידה, כ -50 מיקרומטר מפני השטח. כאשר הערך ("שיא") החדש הוא יציב, בדיקה מועבר בחזרה למצב התייחסות עקבות חוזר הבסיס. זה יכול להיות חזר בנקודות זמן קבוע כדי לייצר נתונים timelapse, או המדגם עברו / לסובב מעט וחזר על עמדות שונות להניב נתונים מרחביים מיפוי הנוכחית (ראה איור 4B, 5B).
ניתוח נתונים: נתונים מנותחים באמצעות WinWCP (ראה איור 5 א). קו 'אפס' אדום אופקי מועברת כלפי מעלה או מטה ולכן הוא מקביל לקו הבסיס עקבות לפני השיא מדידה. קו אנכי מדידה ירוק הוא עבר על פני לקו הבסיס עקבות. פלט קריאה בירוק בתחתית הקו הירוק צריך להיות קרוב לאפס (לדוגמה 0.00012). מספר זה מראה את differnce בין הנקודה שבה קווים אדומים וירוקים לחצות, ואת זכר כחול. הקו האדום הוא עבר אז עד שזה במקביל העליון של הפסגה. קריאת פלט ירוק הוא בגודל של השיא ב mV. הנתונים עבור כל הפסגות מדידה, והנתונים כיול, הם הכניסו לתוך תבנית גיליון אלקטרוני של Excel של מיקרוסופט (ראו טבלה 1). מידע רלוונטיים כגון תאריך, מספר בדיקה, טווח מתח (VR), פתרון בשימוש, למדידת עמדות, נקודות זמן, וכו 'יכול להיות גם לשים בגיליון האלקטרוני. הכיוון הנוכחי (פנימה או החוצה של המדגם: "I / O ') הוא ציין, וזרמים פנימה מקבלים גם ערך שלילי בעמודה" שיא ". הנוכחי בעמודה הימנית מחושבת באמצעות הנוסחה: השיא הנוכחי = * (1.5/calibration) שבו היא 1.5 הנוכחי μA / 2 ס"מ להחיל על כיול. למשל: "unw1 '= 12,45 * (1.5/56.12) = 0,33276907 μA / 2 ס"מ.
4. סודות להצלחה
כמו כל electrophysiology, הארקה נאותה (הארקה) של ציוד חיוני שמסייע למנוע רעש. כך, לפחות positioner מיקרו לבין מארז של המיקרוסקופ צריך להיות מוארק, ואולי גם את מקור האור (ראה איור 1). המשתמש יכול גם להיות מקור של חשמל סטטי, כך הארקה באמצעות פס היד יכול למנוע את חוסר היציבות של החללית במקרים מסוימים, אבל לא תמיד הכרחי. כלוב פאראדיי אינו הכרחי, כפי נעילה ב מגבר מסננים את כל התדרים (למשל, 60Hz מרשת החשמל) מלבד תדירות הבדיקה הוא רוטט. שולחן בידוד רעידות שימושי אבל לא הכרחי. ספסל מוצק, יציב, או שולחן עובד באותה מידה. מלבד בסיסיהמידע בגיליון האלקטרוני Excel (ראה לעיל) כדאי להקליט אחד של מעבדה בספר מידע שימושי נוסף, כגון שינויי טמפרטורה, תוספות סמים, וכו 'אם הצילומים לקוחים את המיקרוסקופ, לציין את ההגדלה. אם רלוונטי, הוא גם שימושי לצייר סקיצה של המדגם (ים) מראה ואת המיקום / או הכיוון של מדידות בדיקה (ראה איור 6).
שלבים מאתגרים
- ביצוע בדיקה: חייב להיות חיבור חשמלי טוב בין החללית לבין מחבר R30. אם שום דבר לא קורה בשלב electroplating, אז זה כנראה הגורם.
- כיול: השימוש מלוחים המתאים או בינוני תרבות למדגם תהיה מדידה. אל מעל או מתחת למלא את התא כיול כמו זה יכול לשנות את התגובה. פני השטח של הנוזל צריך להיות שטוח לרוחב החלק העליון של החדר.
- מדידות לדוגמא: תוכנית מראש, למשל אתה צריך לעשות תא מיוחד כדי להחזיק / הר המדגם (ראה איור 3 ג)? כאשר מודדים ממדגם, החללית צריכה להיות חוקיים עם מקביל לציר הארוך מדגם השטח, כך בכיוון של בדיקה של רטט (ובכך כיוון הזרם הנמדד) הוא בניצב לפני השטח מדגם (לדוגמה, ראה תרשים 4B ). המדגם ניתן להעביר ו / או לסובב עבור מדידות בנקודות שונות. חשוב לשמור על מרחק עקבי בין החללית לבין השטח מדגם כאשר מודדים. הזרם הנמדד הוא יחסי המרחק מפני השטח מדגם, כמו החללית מתרחקת מדגם השטח, את טיפות הנוכחית בחוק היפוך הריבוע. כלומר, כאשר מודדים זרם שנוצר על פני השטח מדגם, הנוכחי זוהה עומדת ביחס הפוך לריבוע המרחק מן השטח. Graticule העינית ניתן להשתמש כדי לאמוד את המרחק בין החללית ופני השטח מדגם.
פתרון בעיות
- בעיה: אין תגובה על כיול. פתרון: מלוחים הסימון קשר הן אלקטרודות. בדוק את הסוללה כיל זרם קבוע.
- בעיה: תשובה קטנה. הפתרון: בדיקה נקי DH 2 O ו / או אצטון. בדוק זווית שלב.
- בעיה: רעש או בסיס יציב (ראה איור 3B). פתרון: בדוק חוטי הארקה.
- בעיה: זכר קופץ מחוץ למסך. הפתרון: לא מאפשרים טיפ בדיקה לגעת המדגם.
5. נציג תוצאות
איור 3 א מציג דוגמה טובה שמץ כיול. הערה הבסיס יציב (אופקי), רעש נמוך ותגובת גדול. לשם השוואה, 3B איור מראה שמץ רועש עם בסיס יציב. מדידות נוכחי בנקודות שונות על פצע הקרנית עכבר מוצגים באיור 4 ב. הפאנל העליון מציג את עמדות בדיקה, הלוח באמצע מראה את עקבות בדיקה כפי שנרשם במחשב הפאנל התחתון גרף של הזרמים על עמדות שונות, מראה פרופיל של הפצע הנוכחי. 5B איור מראה מדידות בפצע עכבר העור נעשה במרווחי זמן קבועים כדי להפיק נתונים על הקורס בזמן הנוכחי הפצע.
באיור 1. רטט מערכת בדיקה. ראה טקסט עבור תיאור מפורט. הטקסט הכחול מתאר את הפונקציה של חיבור חוטי. סמלים גרין להראות נקודות הארקה.
איור 2 א. בדיקה גובר. החללית מודבק למחבר R30 זהב עם אפוקסי כסף טעון, לפני electroporating. במערכות מסוימות, מחבר שנייה עם חוט קצר לשאת את האות על מולחמים. סולם 3 בר מ"מ. הכדור פלטינה הוא לא קנה מידה. ב כיול בדיקה. כיל זרם קבוע (משמאל) חל הנוכחית של 1.5 μA / 2 ס"מ לחקור את בתא כיול (מימין). התחתון משמאל: תמונת תקריב של בדיקה. כאשר החללית היא רטט (למטה מימין), משרעת מותאם כך תמונה כפולה של קצה נתפסת. סולם בר 100 מיקרומטר.
איור 3 א. בדיקה עקבות כיול. דוגמה של עקבות כיול טוב בדיקה, עם בסיס יציב, רעש נמוך ותגובת גדול. זרם דרום אל צפון נותן הטיה כלפי מעלה, זרם צפון אל דרום מייצר הטיה כלפי מטה. ב עקבות יציב, בדיקה רועש. ג צ'יימברס עשה עבור העכבר הרכבה (משמאל) או עכברוש (מימין) העיניים למדידות הקרנית. סולם 5mm בר.
איור 4. תוכיח דוגמאות המדידה. א בסיס יציב הוא הקים עם החללית במצב התייחסות 1-2 מן המדגם. לאחר בדיקה מועבר למצב מדידה ליד המדגם, שהוא מזהההנוכחי ואת עקבות מסיט כלפי מעלה (זרם החוצה). מדידות ב בנקודות שונות על פני הקרנית עכבר היה. בדיקה מקבילה חוקיים על פני השטח, כך הרטט הוא ניצב. פסגות מעלה זרמים להראות כלפי חוץ. זרם מרבי נתפסת בקצוות הפצע (עמדות B & F). סכמטי של בדיקה מוצג על מדידת F עמדה (קצה הפצע מימין). סולם בר 300 מיקרומטר.
איור 5 א. ניתוח עקבות בדיקה. הפאנל העליון: קו אדום אפס מועברת כלפי מעלה או מטה ולכן היא במקביל לקו הבסיס זכר, אזי קו מדידה ירוק הוא עבר על פני לקו הבסיס כדי הקריאה פלט בירוק הוא קרוב לאפס (0.00012). הפאנל התחתון: הקו האדום לאחר מכן מועבר עד שזה במקביל העליון של שיא עקבות, ואת קריאת פלט נותן את הגודל של השיא ב mV (12.45). שוטפים מחושב זה באמצעות נתונים כיול (ראה לוח 1). עור ב עכבר פצע נתונים timelapse. נוכחי לפני ופצע מוצג בזמן אפס (סמל אדום). המדידות נעשו במיקום באותו פצע בעור עכבר timepoints קבוע לאחר פציעה. לאחר הראשוני זרמים פנימה חולף (מתחת לאפס), הזרם הפוך הזרמים החוצה (חיובי) עלה לאט plateaued.
איור 6. מעבדה ספר סקיצות מראה בדיקה למדידת עמדות. מוח החולדה א: נקודות אדומות להראות למדידת עמדות וסמלים בדיקה להראות נטייה לחקור. קרנית ב עכברוש הפצע; נקודות אדומות להראות עמדות מדידה וחצים להראות כיוון הזרם הנמדד.
טבלה 1. דוגמה של גיליון אלקטרוני של Excel לאחסון נתונים בדיקה לכימות. pN2_cal1 = כיול המוצא: cal + ו-cal = ערכי כיול של mV; VR = טווח מתחים, שיא = מדידות מדגם mV, I / O = זרימת הנוכחי (פנימה או החוצה לדוגמה).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
אנו מתארים עלות נמוכה, בסיסי, אך רגישה מערכת בדיקה רוטט למדידת הלא פולשני זרם חשמלי במגוון רחב של מערכות ביולוגיות.
שינויים אפשריים
- אם פלטינה / אירידיום אלקטרודות (Precision מכשירים העולמי; חתול # PTM23B20) משמשים במקום נירוסטה, ולאחר מכן לשלב ציפוי זהב אפשר לחסל.
יישומים
השתמשנו רוטט בדיקה למדידת זרם חשמלי: קרנית עכברוש 2; העדשה עכברוש 3,4; עור העכבר 5; Xenopus הראשן 6; העור האנושי 7; קרנית אנושית 8; העובר דג הזברה 1; Dictyostelium 1; מוח החולדה 1. החללית רוטט תוארה לראשונה על ידי ג'אפה Nuccitelli 9. בדיקה מבוקרת מחשב אשר מודד הנוכחי בשני ממדים אף תוארה 10. ביקורות מעניינות רלוונטיים כלולים גם 11-13.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
אין ניגודי אינטרסים הכריז.
Acknowledgments
אנו מודים לפרופ 'ריצ'רד Borgens, המרכז למחקר שיתוק, אוניברסיטת Purdue, עזרה בהרכבת מערכת בדיקה רוטט. מחקר זה מומן על ידי מענק ניי NIH 1R01EY019101 אל MZ ו BR, ובחלקו על ידי מענקים מהמכון לרפואה של קליפורניה הרגנרציה RB1-01417, NSF MCB-0951199, ועל ידי מענק בלתי מוגבל של מחקר כדי למנוע עיוורון, UC Davis עיניים.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Eligoy-Stainless Electrode | World Precision Instruments, Inc. | SSM33A70 | 76 mm, 7 MΩ, 1-2μm tip |
| Gold R30 connector | www.vectorelect.com | R30 | Re-usable |
| Silver-loaded epoxy | 3M | SL65 | Mix 1-part Resin with 1-part Hardener |
| Dissecting microscope | Olympus Corporation | SZ40 | Magnification x6 to x40 |
| Potassium dicyanoaurate (KAu(CN)2) | Sigma-Aldrich | 379867 | CAUTION: Toxic |
| Chloroplatinic acid hydrate (H2PtCl6 x 6H2O) | Sigma-Aldrich | 520896 | CAUTION: Toxic |
| Lead(II) acetate trihydrate (Pb(CH3CO2)2 x 3H2O) | Sigma-Aldrich | 185191 | CAUTION: Toxic |
| Nano-Amp power source | Home made | - | Powered by six 1.5 V (AAA) batteries |
| 3-dimensional micro-positioner | Line Tool Co. | Model H | |
| Lock-in amplifier | Stanford Research Systems | SR530 | |
| Digital I/O interface | National Instruments | PCI-6220 | |
| Shielded Connector Block with BNC connections | National Instruments | BNC-2110 | |
| Strathclyde Electrophysiology Software | University of Strathclyde Institute of Pharmacy and Biomedical Sciences, UK | WinWCP V4.1.5 | Free download from: http://spider.science.strath.ac.uk/sipbs/software_ses.htm |
| Calibration Chamber | Home made | ||
| Constant Current Calibrator | Vibrating Probe Company | Powered by one 9 V (PP3) battery |
References
- Reid, B., Nuccitelli, R., Zhao, M. Non-invasive measurement of bioelectric currents with a vibrating probe. Nat. Protoc. 2, 661-9282 (2007).
- Reid, B., Song, B., McCaig, C. D., Zhao, M. Wound healing in rat cornea: the role of electric currents. FASEB J. 19, 379-386 (2005).
- Lois, N., Reid, B., Song, B., Zhao, M., Forrester, J. V., McCaig, C. D. Electric currents and lens regeneration in the rat. Exp. Eye Res. 90, 316-323 (2010).
- Wang, E., Reid, B., Lois, N., Forrester, J. V., McCaig, C. D., Zhao, M. Electrical inhibition of lens epithelial cell proliferation: an additional factor in secondary cataract. FASEB J. 19, 842-844 (2005).
- Guo, A., Song, B., Reid, B., Gu, Y., Forrester, J. V., Jahoda, C., Zhao, M. Effects of physiological electric fields on migration of human dermal fibroblasts. J. Invest. Derm. , (2010).
- Reid, B., Song, B., Zhao, M. Electric currents in Xenopus tadpole tail regeneration. Dev. Biol. 335, 198-207 (2009).
- Zhao, M., Song, B., Pu, J., Wada, T., Reid, B. Electrical signals control wound healing through phosphatidylinositol-3-OH kinase-γ. 442, 457-460 (2006).
- Reid, B., EO, G. raue-H. ernandez, Mannis, M. J., Zhao, M. Modulating endogenous electric currents in human corneal wounds - a novel approach of bioelectric stimulation without electrodes. Cornea. , Forthcoming (2010).
- Nuccitelli, R. An ultrasensitive vibrating probe for measuring steady extracellular currents. J. Cell Biol. 63, 614-628 (1974).
- Hotary, K. B., Nuccitelli, R., Robinson, K. R. A computerized 2-dimensional vibrating probe for mapping extracellular current patterns. J. Neurosci. Meth. 43, 55-67 (1992).
- Nuccitelli, R. Endogenous ion currents and DC electric fields in multicellular animal tissues. Bioelectromagnetics Supplement. 1, 147-157 (1992).
- Levin, M. Bioelectric mechanisms in regeneration: Unique aspects and future perspectives. Seminars in Cell Dev. Biol. 20, 543-556 (2009).
- Zhao, M. Electric fields in wound healing - An overriding signal that directs cell migration. Seminars in Cell Dev. Biol. 20, 674-682 (2009).
