Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Bioengineering

진동 프로브와 함께 생체 전류의 측정

Published: January 4, 2011 doi: 10.3791/2358

Summary

다양한 생물 학적 시스템에 생체 전류를 측정하는 비침습 진동 프로브의 제조, 교정 및 사용 설명합니다.

Abstract

이온의 적극적인 교통 수단에 의해 생성된 전기 분야는, 많은 생물 학적 시스템에 존재하고 종종 조직과 장기에 중요한 기능을 제공하고 있습니다. 예를 들면, 그들은 상처 치료하는 동안 셀 마이 그 레이션을 감독하는 데 중요한 역할을한다. 여기 세포외 전기 전류를 측정 ultrasensitive 진동 프로브의 제조 및 사용에 대해 설명합니다. 탐사선은 생리 식염수에 μA / cm 2 범위에서 이온 전류를 감지할 수있는 작은 플래티넘 - 블랙 팁 (30-35 μm의)와 절연, 날카롭게 금속 와이어입니다. 프로브는 압전 벤더에 의해 약 200 Hz에서에서 진동이다. 이온 전류의 존재에서, 프로브는 운동의 극단 사이의 전압 차이를 감지합니다. 잠금 기능을 진동의 프로브의 주파수에 잠금하여 외부 노이즈 앰프 아웃 필터. 데이터는 컴퓨터에 기록됩니다. 프로브가 정확히 1.5 μA / cm 2의 전류를 적용 챔버를 사용하여 적절한 생리 실험의 시작과 끝에 보정합니다. 우리는 프로브를 만들어 시스템을 설정하고 조정하는 방법에 대해 설명합니다. 우리는 또한 각막 측정의 기술을 설명하고, 다른 표본 (각막, 피부, 뇌)에서 몇 가지 대표적인 결과를 보여줍니다.

Protocol

1. 프로브 제조

빈 프로브는 (아래에있는 '특정 시약 및 장비의 표'참조) (elgiloy / 스테인레스 parylene - 코팅 microelectrodes) 세계 정밀 계측기에서 구입한 있습니다. 프로브 팁 뒤에 25-30mm 잘라 컷 끝에 parylene 절연 약 5mm 좋은 연결을 보장하기 위해 메스 (# 11 블레이드)와 함께 거리에 스크랩한 것입니다. 프로브 전기 - 전도성 실버로드 에폭시 (예 : 라이트 - 록 SL65) [* 아래 참고 참조]를 사용하여 골드 R30 커넥터에 장착합니다. 프로브 강화에 에폭시 수 있도록 실온에서 하룻밤 저장됩니다. 다음, 프로브 팁는 나노 암페어 전원 공급 장치를 사용하여, 금 그리고 백금 도금입니다. 프로브 팁은 ​​아세톤으로 씻어서 나노 암페어 전원의 부정적인 출력에 연결되어 있습니다. 프로브 팁은 해부 현미경 (x40)에서 조회 및 골드 도금 용액 (칼륨 dicyanoaurate (0.2 % 증류수에 W / V 카우 (CN) 2 (DH 2 O).) 긍정에 연결된 참조 선에 처음으로 배치됩니다 출력 및 솔루션의 배치는 회로를 완료합니다. 5 전류가 없음이 끝이 약 절반 원하는 최종 크기 (10-15에 대한 μm의)까지 다음 20 나 증가 5 분에 대한 적용됩니다. 프로브 팁는 DH에 씻어서입니다 다음 2 O와 platinizing 솔루션 (chloroplatinic 산성 하이드 레이트, 1퍼센트 W / V H2PtCl6 * 6H 2 O)에 배치 플러스 리드 (II) 아세테이트 trihydrate (0.1 % DH 2 W / V PB (CH3CO 2) 2 * 3H 2 O O). 250 전류가 나는 팁 원하는 최종 크기의 80 %까지 500 나 증가 후, 5 분 적용됩니다. 현재이 1 μA로 증가하고 최종 팁 직경 때까지 1 초 파열에 적용됩니다 (30-35 μm의 정도) 얻습니다. 마지막으로, 팁은 DH 2 O. 프로브에 씻어서 것은 무한정 상온에서 저장할 수 있습니다. 프로브가 손상된 경우, 금을 R30 커넥터를 다시 사용할 수 있습니다.

[*주의 : 일부 프로브 시스템은 신호를 운반하기 위해 앰프에 직접 연결 장착 프로브 있습니다. 다른 시스템은 별도의 마운트 지점 및 신호 커넥터가 있습니다. 후자의 경우에는 한쪽 끝에 R30 커넥터와 짧은 (2-3 ㎝) 와이어는 (그림 2A 참조) 프로브를 장착하기 전에 첫 번째 R30 커넥터에 납땜합니다.]

2. 프로브 시스템

프로브가 3 차원 마이크로 포지셔너 (그림 1)에 장착된 압전 벤더에 첨부되어 있습니다. 프로브 진동도 진동 진폭과 주파수의 조정을 허용하는 진동 프로브 전원 공급 장치에 의해 제어됩니다. 프로브 전원 공급 장치에 대한 참조 신호를 보내는 잠금 기능 또한 진동 주파수와 위상 각도를 표시 증폭기. 그것은 또한 하나 프로브 진동의 빠른 시각적 참조를 가지고 있으므로 오실로 스코프를 연결하는 데 유용합니다. 프로브의 신호는 잠금 기능을 앰프로 이동합니다. 측정하는 프로브와 샘플 광섬유 조명과 해부 현미경 (x40로 확대 X6)을 함께 볼 수 있습니다. 교정과 샘플 측정하는 동안, 참조 및 접지 (지구) 와이어 (그림 2B 참조) 솔루션에 있어야합니다. 증폭기는 아날로그 - 디지털 (I / O) 인터페이스를 통해 컴퓨터에 연결되어 있습니다. 데이터는 스트래스 클라이드 전기 생리학 소프트웨어의 전체 셀 프로그램 (WinWCP)를 사용하여 기록됩니다.

록 인 앰프 설정 : 감도 [200 μV], 동적 해상도 [정상], 오프셋 [켜기], 확장 [X1], 시정수 : 사전 [10 S], 포스트 [0.1 S]. 빠른 응답이 필요한 경우 일정한 사전에 시간은 3 s의 줄일 수 있습니다 오프셋 컨트롤은 화면의 중심을 가까이 탐사 추적을 가지고하는 데 사용됩니다. 큰 반응이 예상되는 경우, 추적은 최대 이동 또는 아래로 수 있습니다.

WCP 소프트웨어 설정 : 녹화 기간 [204.8 S], 채널당 샘플 [1024], 샘플링 간격 [0.2 S], 전압 범위 [+ / - 0.2 V]. 큰 전류가 예상하는 경우 전압 범위는 1 V 또는 5로 증가 수 있습니다 V.

3. 프로브 설정

새로운 프로브는 테스트를해야하고 독특한 주파수 및 위상 각도가 결정됩니다. 새로운 프로브는 생리 식염수 (그림 2B)이있는 보정 챔버에 배치됩니다. 전원 공급 장치가 켜져 있고 최대 진동이 관찰 때까지 주파수가 켜집니다. 이것은 프로브의 공진 주파수이다. 이 주파수에서 프로브를 사용하면 불안정의 원인과 녹음의 소음을 생산할 수, 프로브는 프로브의 작동 주파수 (일반적으로 150-200 Hz에서)을 제공하는 10 Hz에서을 빼서하여 '드 조정'하는 것입니다. 진동 진폭은 프로브 진동 거리 (그림 2B 참조) 프로브는 프로브 팁의 '이중 이미지'를 진동 때 볼 수있다 있도록 팁 직경과 동일하도록 조정됩니다. 위상 각도를 확인하려면 프로브 보정 챔버의 호수에 위치하고 μA / cm 2 반복 적용 1.5 현재입니다. 응답이 없을 때까지 단계 각도는 앰프 -에 자물쇠가 조정됩니다. 이것을 90 °를 추가하거나 빼는각도가 최대 응답을 제공,이 각도는 프로브의 작업 단계 각도입니다. 각 프로브에 대한 주파수 및 위상 각도는 나중에 사용하기 위해 설명되어 있습니다. 이 프로브의 응답을 변경하므로 실험을 진행하는 동안, 주파수, 진폭 및 위상 각도의 설정이 변경되지 않은 것이 중요합니다. 편의를 위해, 현재는 '사우스 - 투 - 노스'흐르는 경우,이 기록 추적에 상향 편향을 ( '최대'여기 칭했다) 생산해야하며, 현재 흐르는 '노스 - 투 - 사우스'는 (아래 편향을 표시해야 ) 그림 3a를 참조하십시오. 이것은 잘못된 방법이다면, 위상 각도 180 °를 추가하면 응답 내내 틀지하여 문제를 해결합니다. probe 함수 뒤에 이론, 교정 등에 대한 자세한 내용은 리드 외. 1을 참조

보정 : 정확히 1.5 교정 실의 프로브에 적용 μA / cm 2의 '표준'현재에 대한 프로브의 반응은, (그림 2B, 3A 참조) 시료의 전류를 계산하는 데 사용됩니다. 이전 샘플 측정하는 프로브가 적절한 솔루션, 예를 들어 BSS + 각막에 대한 인공 테어 솔루션에 교정됩니다. 남북 및 남북, 상향과 하향 편향을 제작, 각각 바깥쪽과 안쪽 전류에 상응, 샘플의 방향에 따라 : 현재는 두 방향으로 적용됩니다. 프로브 추적은 안정적인 기준과 낮은 소음을 (무화과를 비교할 수 있습니다. 3A 및 3B)이 있어야합니다. 프로브가 증발로 인해 osmolality 변경을 보정하는 데 사용되는 솔루션의 실험 끝에 보정합니다. 데이터를 분석하는 경우, 실험의 전반에서 측정이 최종 교정을 사용하여 계산 후반부터 시작 보정 값, 및 측정을 사용하여 계산하실 수 있습니다.

샘플 측정 : 챔버는 샘플을 잡고 고정하도록 설계해야 할 수 있습니다. 예를 들어, 그림 3C는 각막 측정 눈을 잡아 와이어 루프와 페트리 접시를 보여줍니다. 생리 식염수가 들어있는 음식은 해부 현미경과 전망 분야의 초점 위치 샘플에 대한 관심의 영역에서 배치됩니다. 그것이 측정되는 샘플에있는 지점으로 동일한 수준에 있도록 프로브 솔루션과 집중도 샘플 표면 및 지향 병렬로 배치됩니다. 떨어진 샘플에서 (예 : 1-2cm) 편리한로 탐사가 가능한 멀리 이동, 진동이 안정 (가로) 기준을합니다 (그림 4A 참조) 설립 (및 레코드로 설정된 컴퓨터 소프트웨어)을 설정. 프로브는 다음의 표면에서 약 50 μm의 정도 측정 위치로 이동합니다. 새로운 ( '최대') 값이 안정되면, 프로브는 참조 위치로 다시 이동하고 추적 기준으로 반환합니다. 이것은 timelapse 데이터를 생성하는 일반적인 시간 지점에서 반복하거나 예제 (그림 4B를 참조 5B) 이동 / 약간 회전 및 공간적 현재 매핑 데이터를 얻을 다른 위치에서 반복 수 있습니다.

데이터 분석 : 데이터가 WinWCP를 (그림 5A 참조)를 사용하여 분석하고 있습니다. 그 전에 측정 정상에 추적 기준에 평행하므로 수평 빨간색 '제로'라인은 최대 이동 또는 아래로이다. 수직 측정 녹색 라인은 추적 기준으로 전체 이동합니다. 녹색 라인의 하단에 녹색으로 읽기 출력은 가까운 제로 (예 : 0.00012)로해야합니다. 이 숫자는 빨간색과 초록색 라인이 교차 지점, 그리고 블루 트레이스 사이 differnce를 보여줍니다. 그것은 최고의 상단과 평행 때까지 빨간색 선은 그 다음까지 이동합니다. 녹색 출력 신호 뮤직 비디오에서 피크의 크기입니다. 모든 측정 봉우리, 그리고 교정 데이터에 대한 데이터는 Microsoft Excel 스프레드 시트 템플릿 (표 1 참조)에 넣어 수 있습니다. 같은 날짜, 프로브 번호, 전압 범위 (VR) 솔루션은 사용 위치를 측정, 시간 포인트 등의 관련 정보는 스프레드 시트에 넣어 수 있습니다. 현재 방향 (샘플의 내부 또는 외부로 : 'I / O가') 지적이며, 내면 해류도 '정상'항목에서 부정적인 가치를 부여하고 있습니다. 1.5 교정에서 μA / cm 2 적용의 현재입니다 현재 = 피크 * (1.5/calibration) : 오른쪽 열에 현재는 공식을 사용하여 계산됩니다. 따라서 'unw1'= 12.45 * (1.5/56.12) = 0.33276907 μA / cm 2.

4. 성공의 비밀

모든 전기 생리학에서와 마찬가지로, 핵심 장비의 적절한 접지 (접지)는 노이즈를 제거하는 데 도움이됩니다. 따라서, 적어도 마이크로 포지셔너 및 현미경의 섀시는 earthed해야하고, 어쩌면 또한 광원 (그림 1 참조). 사용자는 정전기의 원천이 될 수 있도록 손목 밴드를 통해 접지 어떤 경우에 프로브의 불안정을 예방할 수 있지만, 항상 필요는 없습니다. 잠금 기능을 분리 주파수에서 주파수 (예 : 60HZ 전원 그리드에서) 밖으로 증폭기 필터 탐사선이에 진동이므로 패러데이 케이지는 필요하지 않습니다. 진동 절연 테이블은 유용하지만 필수되지 않습니다. 고체, 안정 벤치 또는 테이블처럼 잘 작동합니다. 이외 기본에서Excel 스프레드 시트의 정보 (위 참조) 사진은 현미경을 촬영하는 경우에는 하나 실험실 - 책 같은 온도의 변화, 마약 추가 등 추가적인 유용한 정보를 기록하는 데 유용 그것은, 배율을 기록해 둡니다. 관련있다면, 그것은 (그림 6 참조) 위치 및 / 또는 프로브 측정의 방향을 보여주는 샘플 (S)의 몽타주를 그리는 것도 유용합니다.

도전 단계

  1. 프로브는 만들기 : 프로브와 R30 커넥터 사이 좋은 전기 연결이 있어야합니다. 아무것도 전기 도금 단계에서 발생하지 않으면, 다음이 아마도 원인입니다.
  2. 보정 : 당신이 측정됩니다 시료에 적절한 살린이나 배지를 사용합니다. 이상 또는이 응답을 변경할 수 있으므로 교정 챔버를 아래 - 기입하지 마십시오. 액체의 표면은 챔버의 상단에 평평해야합니다.
  3. 샘플 측정 : 계획 사전은, 예를 들어 당신은 (그림 3C 참조) 샘플 / 보유 마운트 특별한 챔버를해야하는 이유는 무엇입니까? 샘플에서 측정하면 탐침은 진동 탐침의 방향 (때문에 전류가 측정되는 방향)이 샘플 표면 (예를 들어 수직되도록, 샘플 표면에 긴 축 병렬로 지향되어야, 그림 4B를 참조하십시오 ). 샘플 및 / 또는 다른 위치에서 측정 회전 이동할 수 있습니다. 측정 때 프로브와 샘플 표면 사이의 일관성있는 거리를 유지하는 것이 중요합니다. 측정 전류는 샘플 표면의 거리에 비례하며 탐사선은 샘플 표면의 반전 광장 법률에 의해 현재 방울 떨어져 움직이면서. 샘플 표면에 생성되는 전류를 측정하면 그것은, 감지 전류는 표면에서 거리의 제곱에 반비례합니다. 접안 렌즈의 경위 선망는 프로브와 시료 표면 사이의 거리를 판단하는 데 사용할 수 있습니다.

문제 해결

  • 문제 : 교정에서 반응이 없어요. 해결 방법 : 체크 살린 두 전극을 접촉합니다. 정전류 캘리 브 레이터의 배터리를 확인하십시오.
  • 문제 : 작은 응답. 해결 방법 : DH 2 O 및 / 또는 아세톤에 깨끗한 프로브. 위상 각도를 확인합니다.
  • 문제 : 소음 또는 불안 정한 기준선 (그림 3B 참조). 솔루션 : 확인 접지 와이어.
  • 문제 : 추적 화면에서 뛰어내리는. 솔루션 : 프로브 팁이 샘플을 터치하는 것을 허용하지 않습니다.

5. 대표 결과

그림 3A는 교정 추적의 좋은 예를 보여줍니다. 안정 (가로) 기준, 낮은 소음과 큰 응답을합니다. 비교로서, 그림 3B는 불안 정한 기준과 시끄러운 흔적을 보여줍니다. 마우스 각막 상처에 다른 위치에서 전류 측정은 그림 4B에 표시됩니다. 상단 패널의 프로브 위치를 보여주는 가운데 패널은 컴퓨터에 기록된 프로브 흔적을 보여줍니다과 하단 패널은 현재 상처의 프로필을 보여주는 서로 다른 위치에있는 전류의 그래프입니다. 그림 5B 상처 현재 시간 코스에 대한 데이터를 생성하기 위해 정기적인 시간 간격으로 만든 마우스 피부 상처에 측정을 보여줍니다.

그림 1
그림 1. 프로브 시스템을 진동. 자세한 설명은 텍스트를 참조하십시오. 블루 텍스트는 연결 전선의 기능을 설명합니다. 그린 기호는 접지 지점을 보여줍니다.

그림 2
그림 2. A. 프로브가 장착. 프로브 전에 electroporating로 실버로드 에폭시와 황금 R30 커넥터에 붙어있다. 일부 시스템에서 신호를 운반하는 짧은 철사로 두 번째 커넥터에 납땜합니다. 스케일 바 3mm. 플래티넘 공을 확장할 수 없습니다. B. 프로브 교정. 정전류 캘리 브 레이터가 (왼쪽) 1.5 보정 챔버의 프로브에 μA / cm 2 (오른쪽)의 전류를 적용합니다. 왼쪽 하단 : 프로브의 클로즈업. 팁의 이중 이미지를 볼 수 있습니다 그래서 프로브가 진동하면 (오른쪽 아래), 진폭이 조정됩니다. 스케일 바 100 μm의.

그림 3
그림 3. A. 프로브 교정 추적. 안정 기준, 낮은 소음과 대형 응답 좋은 프로브 교정 추적의 예. 현재 흐르는 사우스 - 투 - 노스 상향 편향을 제공하고, 노스 - 투 - 사우스을 흐르는 전류는 아래로 편향을 생산하고 있습니다. 불안정, 시끄러운 프로브 추적 B.. C. 챔버 장착 마우스 (왼쪽) 또는 쥐 (오른쪽) 각막 측정 눈을했다. 5mm 스케일 바.

그림 4
그림 4. 측정 사례를 증명. A. 안정 기준은 예제 1-2 참조 위치에 프로브로 설정됩니다. 탐사선은 샘플 근처 측정 위치로 이동되면, 그것은을 감지현재 및 추적 (바깥쪽 현재) 이상 굴절. 마우스 각막에 걸쳐 서로 다른 위치에 B. 측정합니다. 프로브가 표면에 평행 지향이며, 진동이 직각되도록. 업워드 봉우리는 외부 전류를 보여줍니다. 최대 전류는 상처 가장자리에서 볼 (위치 ​​B & F).입니다 프로브의 개략도는 위치 F (오른쪽 상처 가장자리)를 측정에 표시됩니다. 스케일 바 300 μm의.

그림 5
그림 5. A. 프로브 흔적을 분석. 어퍼 패널 : 녹색으로 출력 읽기가 영 (0.00012)에 가까운 따라서는 추적 기준과 병행되도록 붉은 제로 라인 위로 이동 또는 아래는 다음 녹색 측정 라인이 기준을 통해 이동합니다. 하단 패널 : 빨간색 선은 그 다음은 추적 피크의 상단과 평행하게 될 때까지 최대 이동 및 출력 읽기가 뮤직 비디오에서 피크 (12.45)의 크기를 사용하실 수 있습니다. 현재는이 (표 1 참조) 보정 데이터를 사용하여 계산됩니다. B. 마우스 피부가 timelapse 데이터를 상처. 입힐 수있는 총알 이전에 현재 시간이 제로 (적색 기호)에 표시됩니다. 성능은 입힐 수있는 총알 후 정기적으로 timepoints에서 마우스 피부 상처에서 같은 위치에 있었다. 초기 과도 내향 전류 (아래 제로), 현재는 반대하고 바깥쪽으로 조류는 (긍정적인) 천천히 장미와 plateaued 후.

그림 6
그림 6. 위치를 측정 프로브를 보여주는 실험실 - 도서 스케치. A. 랫 두뇌, 붉은 점들은 위치와 프로브 기호를 측정 표시는 프로브 방향을 표시합니다. B. 랫 각막 상처, 붉은 점들은 측정 위치를 표시하고 화살표는 전류 측정 방향을 보여줍니다.

표 1
표 1. 프로브 데이터를 저장하고 quantifying을위한 Excel 스프레드 시트의 예. pN2_cal1 = 시작 교정, 칼 +와 칼 - = 뮤직 비디오의 교정 값, VR = 전압 범위, 최대 뮤직 비디오에서 = 샘플 측정, 현재의 I / O = 흐름 (샘플의 내부 또는 외부로).

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

우리는 저렴한 비용으로, 기초하지만, 생물 학적 시스템의 다양한 비 invasively 전류를 측정하는 매우 민감한 진동 프로브 시스템을 설명합니다.

가능한 수정

  1. 백금 / 이리듐 전극 (세계 정밀 계측기, 고양이 # PTM23B20)이 경우에는 대신 스테인리스 스틸을 사용 후, 골드 도금 무대 제거하실 수 있습니다.

애플 리케이션

우리의 전류를 측정하는 진동 프로브를 사용했습니다 : 쥐의 각막 2, 쥐 렌즈 3,4, 마우스 피부에 5; Xenopus 올챙이 6, 인간의 피부 7, 인간의 각막 8, Zebrafish 배아 1; Dictyostelium 1; 쥐의 뇌 1. 진동 탐사가 처음 자페와 Nuccitelli 9 설명했다. 2 차원 전류 측정 컴퓨터 제어 프로브는 10 설명하고 있습니다. 관련 재미있는 리뷰도 11-13 포함되어 있습니다.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

Acknowledgments

우리는 교수 리차드 Borgens, 진동 프로브 시스템을 조립에 대한 도움을 마비 연구, 퍼듀 대학을위한 센터에 감사하고 있습니다. 본 연구는 MZ와 BR에 네이 부여 NIH 1R01EY019101 지원하고, 재생 의료 RB1 - 01417의 캘리포니아 공과 대학, NSF MCB - 0951199에서 보조금으로하고 실명, UC 데이비스 안과를 방지하기 위해 연구에서 무제한 부여하여 일부 인치되었습니다

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Eligoy-Stainless Electrode World Precision Instruments, Inc. SSM33A70 76 mm, 7 MΩ, 1-2μm tip
Gold R30 connector www.vectorelect.com R30 Re-usable
Silver-loaded epoxy 3M SL65 Mix 1-part Resin with 1-part Hardener
Dissecting microscope Olympus Corporation SZ40 Magnification x6 to x40
Potassium dicyanoaurate (KAu(CN)2) Sigma-Aldrich 379867 CAUTION: Toxic
Chloroplatinic acid hydrate (H2PtCl6 x 6H2O) Sigma-Aldrich 520896 CAUTION: Toxic
Lead(II) acetate trihydrate (Pb(CH3CO2)2 x 3H2O) Sigma-Aldrich 185191 CAUTION: Toxic
Nano-Amp power source Home made - Powered by six 1.5 V (AAA) batteries
3-dimensional micro-positioner Line Tool Co. Model H
Lock-in amplifier Stanford Research Systems SR530
Digital I/O interface National Instruments PCI-6220
Shielded Connector Block with BNC connections National Instruments BNC-2110
Strathclyde Electrophysiology Software University of Strathclyde Institute of Pharmacy and Biomedical Sciences, UK WinWCP V4.1.5 Free download from: http://spider.science.strath.ac.uk/sipbs/software_ses.htm
Calibration Chamber Home made
Constant Current Calibrator Vibrating Probe Company Powered by one 9 V (PP3) battery

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Reid, B., Nuccitelli, R., Zhao, M. Non-invasive measurement of bioelectric currents with a vibrating probe. Nat. Protoc. 2, 661-9282 (2007).
  2. Reid, B., Song, B., McCaig, C. D., Zhao, M. Wound healing in rat cornea: the role of electric currents. FASEB J. 19, 379-386 (2005).
  3. Lois, N., Reid, B., Song, B., Zhao, M., Forrester, J. V., McCaig, C. D. Electric currents and lens regeneration in the rat. Exp. Eye Res. 90, 316-323 (2010).
  4. Wang, E., Reid, B., Lois, N., Forrester, J. V., McCaig, C. D., Zhao, M. Electrical inhibition of lens epithelial cell proliferation: an additional factor in secondary cataract. FASEB J. 19, 842-844 (2005).
  5. Guo, A., Song, B., Reid, B., Gu, Y., Forrester, J. V., Jahoda, C., Zhao, M. Effects of physiological electric fields on migration of human dermal fibroblasts. J. Invest. Derm. , (2010).
  6. Reid, B., Song, B., Zhao, M. Electric currents in Xenopus tadpole tail regeneration. Dev. Biol. 335, 198-207 (2009).
  7. Zhao, M., Song, B., Pu, J., Wada, T., Reid, B. Electrical signals control wound healing through phosphatidylinositol-3-OH kinase-γ. 442, 457-460 (2006).
  8. Reid, B., EO, G. raue-H. ernandez, Mannis, M. J., Zhao, M. Modulating endogenous electric currents in human corneal wounds - a novel approach of bioelectric stimulation without electrodes. Cornea. , Forthcoming (2010).
  9. Nuccitelli, R. An ultrasensitive vibrating probe for measuring steady extracellular currents. J. Cell Biol. 63, 614-628 (1974).
  10. Hotary, K. B., Nuccitelli, R., Robinson, K. R. A computerized 2-dimensional vibrating probe for mapping extracellular current patterns. J. Neurosci. Meth. 43, 55-67 (1992).
  11. Nuccitelli, R. Endogenous ion currents and DC electric fields in multicellular animal tissues. Bioelectromagnetics Supplement. 1, 147-157 (1992).
  12. Levin, M. Bioelectric mechanisms in regeneration: Unique aspects and future perspectives. Seminars in Cell Dev. Biol. 20, 543-556 (2009).
  13. Zhao, M. Electric fields in wound healing - An overriding signal that directs cell migration. Seminars in Cell Dev. Biol. 20, 674-682 (2009).

Tags

생체 공학 제 47 전기 현장 현재는 탐사 진동
진동 프로브와 함께 생체 전류의 측정
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Reid, B., Zhao, M. Measurement ofMore

Reid, B., Zhao, M. Measurement of Bioelectric Current with a Vibrating Probe. J. Vis. Exp. (47), e2358, doi:10.3791/2358 (2011).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter