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Biology

使用Qiagen公司的小量制备试剂盒的细菌菌落纯化质粒DNA

doi: 10.3791/247 Published: July 29, 2007

Summary

Abstract

大肠杆菌质粒DNA纯化是分子克隆的核心技术。小规模小于5毫升细菌培养纯化(小量)为进一步酶促反应(聚合酶链反应和限制性内切酶消化),克隆验证或DNA分离的快捷方式。在这里,我们录像通过QIAGEN的QIAprep 8小量制备试剂盒小量的一般程序,旨在引进这种高效的技术,分子生物学技术的一般初学者。整个过程是基于碱裂解大肠杆菌细胞,在高盐存在的DNA吸附到硅。它包括三个步骤:)1,编制和结算的一种细菌裂解液,2)的DNA吸附到QIAprep膜,3)洗涤和质粒DNA洗脱。所有步骤都没有使用苯酚,氯仿,氯化铯,溴化乙锭,无酒精沉淀。它通常需要不到2个小时,以完成整个过程。

使用Qiagen公司的小量制备试剂盒的细菌菌落纯化质粒DNA
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Zhang, S., Cahalan, M. D. Purifying Plasmid DNA from Bacterial Colonies Using the Qiagen Miniprep Kit. J. Vis. Exp. (6), e247, doi:10.3791/247 (2007).More

Zhang, S., Cahalan, M. D. Purifying Plasmid DNA from Bacterial Colonies Using the Qiagen Miniprep Kit. J. Vis. Exp. (6), e247, doi:10.3791/247 (2007).

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