वर्तमान स्टेम सेल उपचार में एक बड़ी बाधा सबसे प्रभावी मेजबान के ऊतकों को इन कोशिकाओं को देने के लिए विधि का निर्धारण है. यहाँ, हम एक प्रसव chitosan आधारित पद्धति है कि कुशल और सरल दृष्टिकोण में है का वर्णन है, जबकि वसा व्युत्पन्न स्टेम सेल उनके multipotency के बनाए रखने के लिए अनुमति देता है.
Multipotent स्टेम कोशिकाओं पुनर्योजी दवा 1-3 के क्षेत्र में अत्यंत उपयोगी हो दिखाया गया है. हालांकि, इन कोशिकाओं ऊतक उत्थान के लिए प्रभावी ढंग से इस्तेमाल करने के लिए आदेश में, चर की संख्या को ध्यान में रखा जाना चाहिए. कुल मात्रा और आरोपण साइट की सतह क्षेत्र, ऊतक के यांत्रिक गुणों और ऊतक microenvironment, जो vascularization और बाह्य मैट्रिक्स के घटकों की राशि भी शामिल है: इन चर शामिल हैं. इसलिए, सामग्री के लिए इन कोशिकाओं को देने के लिए इस्तेमाल किया जा रहा एक परिभाषित रासायनिक संरचना के साथ biocompatible है जबकि एक यांत्रिक शक्ति है कि मेजबान ऊतक mimics बनाए रखने चाहिए. इन सामग्रियों को भी ऑक्सीजन और पोषक तत्वों की कोशिकाओं को देते हैं और पैदा के लिए एक अनुकूल microenvironment प्रदान करने के लिए प्रवेश के योग्य होना चाहिए. Chitosan, उत्कृष्ट biocompatibility के साथ एक cationic polysaccharide, आसानी से रासायनिक और संशोधित कर सकते हैं vivo में मैक के साथ बाँध के लिए एक उच्च संबंध है4-5 romolecules. Chitosan बाह्य मैट्रिक्स के ग्लाइकोसमिनोग्लाइकन भाग mimics, यह कोशिका आसंजन, प्रवास, और प्रसार के लिए एक सब्सट्रेट के रूप में कार्य करने के लिए सक्षम है. इस अध्ययन में हम microspheres के रूप में chitosan का उपयोग करने के लिए एक तीन आयामी पाड़ 6 आधारित कोलेजन में वसा व्युत्पन्न स्टेम सेल (ए एस सी) देने. एक आदर्श सेल करने के लिए microsphere अनुपात ऊष्मायन समय और सेल घनत्व कोशिकाओं है कि लोड किया जा सकता है की अधिकतम संख्या प्राप्त करने के लिए सम्मान के साथ निर्धारित किया गया था. एक बार ए एस सी chitosan के microspheres (CSM) पर वरीयता प्राप्त कर रहे हैं, वे एक कोलेजन पाड़ में एम्बेडेड रहे हैं और संस्कृति में विस्तारित अवधि के लिए बनाए रखा जा सकता है. सारांश में, इस अध्ययन के एक ठीक करने के लिए एक तीन आयामी biomaterial पाड़ के भीतर स्टेम सेल देने के लिए एक तरीका प्रदान करता है.
स्टेम सेल आधारित चिकित्सा में एक प्रमुख बाधा कोशिकाओं की मरम्मत के लिए निर्दिष्ट क्षेत्रों के लिए वितरण के लिए कुशल तरीके विकसित कर रहा है. रोगी परिवर्तनशीलता के लिए रोगी के कारण, प्रकार, ऊतक चोट आकार ?…
The authors have nothing to disclose.
DOZ जिनेवा फाउंडेशन से सम्मानित किया गया अनुदान द्वारा समर्थित है. एस.एन. पिट्सबर्ग ऊतक इंजीनियरिंग पहल से एक Postdoctoral फैलोशिप अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था.
Name of the reagent/equipment | Company | Catalogue number | Comments |
Hanks BalancedSalt Solution (HBSS) | Gibco | 14175 | Consumable |
Fetal Bovine Serum | Hyclone | SH30071.03 | Consumable |
Collagenase Type II | Sigma-Aldrich | C6685 | Consumable |
70-μm nylon mesh filter | BD Biosciences | 352350 | Consumable |
100-μm nylon mesh filter | BD Biosciences | 352360 | Consumable |
MesenPRO Growth Medium System | Invitrogen | 12746-012 | Consumable |
L-glutamine | Gibco | 25030 | Consumable |
T75 Tissue Culture Flask | BD Biosciences | 137787 | Consumable |
Chitosan | Sigma-Aldrich | 448869 | Consumable |
Acetic Acid | Sigma-Aldrich | 320099 | Consumable |
N-Octanol | Acros Organics | 150630025 | Consumable |
Sorbitan-Mono-oleate | Sigma-Aldrich | S6760 | Consumable |
Potassium Hydroxide | Sigma-Aldrich | P1767 | Consumable |
Acetone | Fisher Scientific | L-4859 | Consumable |
Ethanol | Sigma-Aldrich | 270741 | Consumable |
Trinitro Benzenesulfonic Acid | Sigma-Aldrich | P2297 | Consumable |
Hydrochloric Acid | Sigma-Aldrich | 320331 | Consumable |
Ethyl Ether | Sigma-Aldrich | 472-484 | Consumable |
8-μm Tissue Culture Plate Inserts | BD Biosciences | 353097 | Consumable |
1.5-ml Microcentrifuge Tubes | Fisher | 05-408-129 | Consumable |
MTT Reagent | Invitrogen | M6494 | Consumable |
Dimethyl Sulfoxide | Sigma-Aldrich | D8779 | Consumable |
Qtracker Cell Labeling Kit (Q tracker 655) | Molecular probes | Q2502PMP | Consumable |
Type 1 Collagen | Travigen | 3447-020-01 | Consumable |
Sodium Hydroxide | Sigma-Aldrich | S8045 | Consumable |
12-Well Tissue Culture Plates | BD Biosciences | 353043 | Consumable |
Centrifuge | Eppendorf | 5417R | Equipment |
Orbital Shaker | New Brunswick Scienctific | C24 | Equipment |
Humidified Incubator with Air-5% CO2 | Thermo Scientific | Model 370 | Equipment |
Overhead Stirrer | IKA | Visc6000 | Equipment |
Magnetic Stirrer | Corning | PC-210 | Equipment |
Vacuum Desiccator | – | – | Equipment |
Particle Size Analyzer | Malvern | STP2000 Spraytec | Equipment |
Water Bath | Fisher Scientific | Isotemp210 | Equipment |
Spectrophotometer | Beckman | Beckman Coulter DU800UV/Visible Spectrophotometer | Equipment |
Vortex | Diagger | 3030a | Equipment |
Microplate Reader | Molecular Devices | SpectraMax M2 | Equipment |
Light/Fluorescence Microscope | Olympus | IX71 | Equipment |
Confocal Microscope | Olympus | FV-500 Laser Scanning Confocal Microscope | Equipment |
Scanning Electron Microscope | Carl Zeiss MicroImaging | Leo 435 VP | Equipment |
Transmission Electron Microscope | JEOL | JEOL 1230 | Equipment |