Summary
इस प्रोटोकॉल का वर्णन कैसे सेल व्यवहार्यता और प्रतिदीप्ति अभिव्यक्ति assays ताली cytometer छवि के आधार का उपयोग कर प्रदर्शन करने के लिए.
Protocol
1. ताली व्यवहार्यता किट के साथ धुंधला कक्ष - मृत सेल लाल अभिकर्मक
- U2OS (अमेरिकी प्रकार संस्कृति संग्रह) कोशिकाओं है कि CellLight न्यूक्लियस GFP * BacMam 2.0 का उपयोग किया गया transduced है के साथ इस प्रक्रिया को शुरू *. (नोट: कोशिकाओं को भी नीचे काता जा सकता है और मध्यम या पीबीएस में resuspended).
- पीआई के साथ मृत कोशिकाओं दाग, एक नया microcentrifuge ट्यूब कोशिकाओं के 100 μL हस्तांतरण. ध्यान दें कि 1 x 10 5 1 x 10 7 कोशिकाओं / एमएल के एक एकाग्रता इस परख के लिए सिफारिश की है, हालांकि एकाग्रता के लिए सटीक होना नहीं है .
- अगला, मृत कोशिकाओं दाग PI आधारित ताली मृत सेल लाल अभिकर्मक के 1 μL जोड़ने. भंवर संक्षिप्त मिश्रण करने के लिए. ताली मृत सेल लाल और 1-5 मिनट के लिए अंधेरे में कमरे के तापमान पर सेल मिश्रण अभिकर्मक सेते हैं.
- ऊष्मायन के बाद, तुरंत ताली cytometer छवि के आधार पर नमूने का विश्लेषण करने के लिए आगे बढ़ना.
2. एक का उपयोग एक सेल व्यवहार्यता परख प्रदर्शनताली cytometer छवि आधार
- ताली कोशिकामापी डिस्पोजेबल प्लास्टिक ताली सेलुलर विश्लेषण स्लाइड है कि विशेष रूप से कोशिकामापी में फिट और अलग संलग्न कक्षों (एक और बी) में दो 25μL नमूने पकड़ कर सकते हैं का उपयोग करता है. जब स्लाइड हैंडलिंग, हमेशा यह पक्षों द्वारा पकड़ सुनिश्चित हो.
- आधा चाँद के आकार का नमूना लोड हो रहा है क्षेत्र में धीरे स्लाइड, पिपेट नमूना के 25 μL लोड देखभाल लेने के लिए बनाने बुलबुले या वापस छींटे से बचने. पर या भरण के तहत मत करो.
- यहाँ, नियंत्रण कक्ष (बेदाग, गैर transduced) कक्ष में लोड कर रहे हैं एक और दाग GFP-व्यक्त कोशिकाओं बी कक्ष में लोड कर रहे हैं नियंत्रण नमूना autofluorescence के स्तर को निर्धारित जब डेटा का विश्लेषण में मदद मिलेगी.
- एक व्यवहार्यता, स्पर्श GFP / आरएफपी कोशिकामापी के घर स्क्रीन पर परख प्रदर्शन. परख विकल्प तो सही पर दिखाई देगा. GFP + व्यवहार्यता का चयन करें.
- अगला, नमूना श्रृंखला नाम, नाम अब प्रेस प्रेस सहेजें . (नोट: नाम का चयन बाद में स्वचालित रूप से प्रत्येक नमूना श्रृंखला के लिए दिनांक और समय से एक नाम असाइन करें.)
- नमूना नामकरण के बाद, ताली कोशिकामापी स्वचालित रूप से उपाय स्क्रीन करने के लिए अग्रिम जाएगा. उपाय स्क्रीन के नीचे सही आधे पर पृष्ठभूमि टैब दबाएँ.
- अगला, नियंत्रण (एक) कोशिकामापी से दूर का सामना करना पड़ रहा नमूना के साथ, लोडिंग के बंदरगाह में स्लाइड सम्मिलित जब तक यह बंद हो जाता है. बल लागू नहीं करो.
- पृष्ठभूमि स्क्रीन पर, स्पर्श प्रेस नई बेदाग सेल नियंत्रण सम्मिलित करना . स्लाइड अपने आप कोशिकामापी में खींच लिया जाएगा और कक्षों की एक जीवित छवि को स्क्रीन पर प्रदर्शित किया जाएगा.
- ध्यान केंद्रित घुंडी का प्रयोग, देखने के उचित विमान में कोशिकाओं को लाने. कोशिकाओं को समान रूप से प्रत्येक कोशिका के चारों ओर एक उज्ज्वल प्रभामंडल (चित्रा 1, बाएं) के साथ अंधेरे होना चाहिए.
- सेलएस जब पृष्ठभूमि और कोशिकाओं के किनारों के बीच संक्रमण फजी undercounted हो सकता है, इतना है कि सेल की सीमाओं को अच्छी तरह से (चित्रा 1, केंद्र) परिभाषित नहीं कर रहे हैं. कोशिकाओं जब वे उज्ज्वल केन्द्रों और अंधेरे perimeters (चित्रा 1, राइट) overcounted हो सकता है.
- बेहतर सेल की आबादी को देखने, जबकि ध्यान केंद्रित करने के लिए, 4X या 16X के लिए लाल ज़ूम सूचक बटन स्लाइड.
- एक बार कोशिकाओं को ध्यान में लाया गया है, प्रेस को छूने के लिए बेदाग सेल नियंत्रण भागो पृष्ठभूमि प्रतिदीप्ति उपाय.
- कोशिकामापी स्वचालित रूप से कब्जा है और नमूने की छवियों का विश्लेषण करेगा. यह के बारे में 1 मिनट लेता है पर कब्जा करने के लिए और डिफ़ॉल्ट मोड (9 छवि) में छवियों का विश्लेषण.
- देखने के प्रत्येक क्षेत्र के थंबनेल के रूप में वे कब्जा कर रहे हैं प्रदर्शित कर रहे हैं और प्रगति पट्टी चल रहे एक अद्यतन प्रदान करता है. छवि पर कब्जा करने के बाद पूरा हो गया है, कोशिकामापी स्वचालित रूप से स्लाइड ejects और कब्जा कर लिया छवियों के विश्लेषण से डेटा प्रदान करता है है.
- संग्रहीत डेटा कोशिकामापी पर मेनू पृष्ठभूमि टैब के ड्रॉप डाउन में प्रदर्शित किया जाएगा. पृष्ठभूमि नियंत्रण नमूना एक ही नाम आवंटित किया जाएगा के रूप में है कि प्रयोग करने के लिए दिया और ड्रॉप डाउन मेनू में आयात किया जा जाएगा. नोट: यदि एक पृष्ठभूमि नियंत्रण नहीं चलाया जाता है, कोशिकामापी स्वचालित रूप से एक प्रतिदीप्ति सीमा असाइन. यह मैन्युअल रूप से परख प्रदर्शन के बाद बदला जा सकता है.
- PI-दाग transduced नमूना चलाने के लिए, कोशिकामापी से स्लाइड निकालने के लिए, यह फ्लिप के आसपास और यह transduced नमूना साधन से दूर का सामना करना पड़ के साथ फिर से शामिल करना.
- नमूना टैब दबाएँ, और फिर प्रेस छूने के लिए नया नमूना सम्मिलित. जब छवि स्क्रीन पर दिखाई देता है, छवि समायोजन घुंडी का उपयोग करें ध्यान में कोशिकाओं के रूप में लाने से पहले. तो प्रेस को छूने के लिए नमूना चलाएँ.
- छवि पर कब्जा करने के बाद पूरा हो गया है, विश्लेषण से डेटा नमूना टैब और कोशिकामापी स्वचालित के तहत प्रकट होता हैसहयोगी स्लाइड ejects.
- Biohazardous बर्बादी के रूप में ताली सेलुलर विश्लेषण स्लाइड के उचित निपटान. ताली सेलुलर विश्लेषण स्लाइड reused किया नहीं जा सकता.
3. स्थापना सीमारेखा और गेट्स
- एक बार नमूना चला गया है, थ्रेसहोल्ड अब एक विशेष सेल की आबादी पर घर नमूना लागू किया जा. यहाँ, हम थ्रेसहोल्ड को समायोजित करने के लिए में रहते हैं और मृत कोशिकाओं का प्रतिशत कोशिकाओं GFP-transduced का निर्धारण करेगा.
- नमूना टैब के अंतर्गत, और GFP व्यक्त कोशिकाओं, जीवित और मृत कोशिकाओं व्यक्त GFP, कुल व्यवहार्यता औसत सेल आकार, गिना कोशिकाओं की संख्या, और सेल एकाग्रता की संख्या प्रतिशत प्रदर्शित कर रहे हैं.
- इसके अलावा, हिस्टोग्राम सेल आकार, हरी प्रतिदीप्ति, और लाल प्रतिदीप्ति (PI) प्रदर्शित भूखंडों स्क्रीन के निचले भाग में प्रदर्शित कर रहे हैं.
- सेल आकार गेट सेट, सेल आकार थंबनेल को छूने के लिए सेल आकार हिस्टोग्राम खुला. जबकि संवर्धित कोशिकाओं को शायद ही कभी घebris, अन्य नमूने मलबे कि कोशिकाओं की तुलना में बड़े या छोटे होते हैं हो सकता है.
- इस मलबे को बाहर करने के लिए, स्लाइडर पट्टी पर नीले बटन स्लाइड करने के लिए दोनों बड़े और छोटे घटनाओं को बाहर. फिर, फिर - डेटा विश्लेषण के लिए लागू स्पर्श और परिणाम अद्यतन .
- अगला, विश्लेषण GFP प्रतिदीप्ति जोड़ने, GFP हिस्टोग्राम थंबनेल को छूने के लिए इसे खोलने. नीली पट्टी स्लाइड सिर्फ dimmest चोटी के सही करने के लिए सीमा निर्धारित करने के लिए, एक गाइड के रूप में नियंत्रण नमूना का उपयोग.
- यह विश्लेषण GFP सकारात्मक कोशिकाओं को शामिल करने के लिए है, लेकिन autofluorescent कोशिकाओं को बाहर की अनुमति देता है. Autofluorescence अक्सर जब कोशिकाओं के भीतर जैविक अणुओं उत्साहित कर रहे हैं मनाया जाता है.
- लागू टच पुष्टि करने के लिए और पिछले स्क्रीन करने के लिए लौटने. नमूना टैब के अंतर्गत प्रदर्शित डेटा अब फाटकों और थ्रेसहोल्ड प्रतिदीप्ति दोनों चैनलों के लिए सेट को प्रतिबिंबित करना चाहिए.
- अगला, autofluorescence, प्रेस टी से PI दाग कोशिकाओं को अलग करने के लिएवह PI हिस्टोग्राम थंबनेल PI हिस्टोग्राम खोलने के लिए.
- फिर, नियंत्रण नमूना शिखर हिस्टोग्राम पर एक ग्रे चोटी के रूप में प्रदर्शित किया जाएगा. लाल शिखर नमूना प्रतिदीप्ति है. पृष्ठभूमि प्रतिदीप्ति इस कोशिकामापी पर 0 RFU मूल्य को निकटतम चोटी के रूप में प्रदर्शित होता है.
- PI चैनल में पृष्ठभूमि प्रतिदीप्ति को समाप्त करने के लिए, स्लाइडर पट्टी पर नीले बटन को स्थानांतरित करने के लिए दहलीज को समायोजित करने के लिए चोटी का प्रतिनिधित्व पृष्ठभूमि प्रतिदीप्ति बाहर, एक संदर्भ के रूप में नियंत्रण नमूना से ग्रे चोटी का उपयोग. लागू टच पुष्टि करने के लिए और पिछले स्क्रीन करने के लिए लौटने.
- अगले, नेत्रहीन पुष्टि करने के लिए कि प्रत्येक कोशिका ठीक सौंपा है, ज़ूम टैब में छवि का थंबनेल का उपयोग करके समीक्षा के लिए देखने के कब्जा कर लिया क्षेत्र का चयन करें, तो परतें टैब दबाने.
- अगला, GFP या PI बटन दबाएँ, उस विशेष चैनल के माध्यम से कब्जा कर लिया छवि प्रदर्शित करने के लिए. एक ही बटन को फिर से प्रदर्शित करने से परत को हटाने प्रेस, या परतों मिलाना, एकाधिक परत बटन के स्पर्श.
- पहचान कैसे कोशिकाओं को एक विशेष चैनल, स्पर्श सर्किलों के माध्यम से गिना जाता है. कोशिकाओं है कि केवल उज्ज्वल क्षेत्र चैनल, जो व्यक्त नहीं करते प्रतिदीप्ति नीले रंग में परिक्रमा किया जाएगा के माध्यम से गिना गया. यह इंगित करता है कि है कि विशेष रूप से सेल (यानी PI नकारात्मक) रहते है.
- कक्ष व्यक्त GFP GFP चैनल में देखा जाएगा, और हरे रंग में परिक्रमा किया जाएगा. मृत कोशिकाओं को मृत सेल लाल के साथ दाग PI चैनल में देखा जाएगा, और लाल रंग में परिक्रमा किया जाएगा.
- के दोनों लाल और हरे रंग चैनल में गिना कक्ष पीले रंग में परिक्रमा किया जाएगा, यह इंगित करता है कि सेल GFP व्यक्त, लेकिन यह भी पीआई के साथ दाग और इसलिए मर चुका है.
- कभी कभी, काले हलकों स्क्रीन पर दिखाई देगा, इन वस्तुओं है कि पहचान की गई है, लेकिन सेल के आकार के आधार पर विश्लेषण से बाहर रखा गया है.
- इंटरनेट के लिए बढ़ेंपूर्वोत्तर प्रतिदीप्ति बस में वर्णित है जब तक प्रत्येक कोशिका है कि प्रतिदीप्ति व्यक्त है उपयुक्त रंग के साथ परिक्रमा कदम का उपयोग कर हिस्टोग्राम पर दहलीज धुन.
- सभी विश्लेषण मानकों को स्वचालित रूप से डेटा टैब के अंतर्गत बच रहे हैं. ताली कोशिकामापी लगभग 500 नमूना रन से डेटा फ़ाइलों को स्टोर कर सकते हैं.
- प्रत्येक डेटा टैब में संग्रहीत फ़ाइल पुनर्विश्लेषण के लिए उपलब्ध है. डेटा टैब से फ़ाइल का चयन करके इसे और खोला जाएगा सभी histograms और परतों सक्रिय हो जाते हैं.
- संग्रह डेटा और रिपोर्ट उत्पन्न करने के लिए, कोशिकामापी में संग्रहीत डेटा एक कंप्यूटर एक यूएसबी ड्राइव का उपयोग करने के लिए हस्तांतरित किया जा सकता है.
4. प्रतिनिधि परिणाम:
ताली - छवि के आधार cytometer फ्लोरोसेंट प्रोटीन कोशिकाओं में अभिव्यक्ति के स्तर कि एक परमाणु लक्षित GFP BacMam 2.0 अभिव्यक्ति का निर्माण के साथ transduced थे मापने के लिए इस्तेमाल किया गया था. चार प्रतिनिधि प्रकार की कोशिकाओं (U2OS, 293MSR, HEKn, और चो - एस) transduced थे.इन सेल लाइनों के लिए, कि GFP व्यक्त कर रहे थे कोशिकाओं की संख्या ताली कोशिकामापी द्वारा सूचना मिली थी और एक प्रवाह कोशिकामापी पर ही विश्लेषण नमूनों से डेटा के साथ तुलना में. इसके अतिरिक्त, कोशिकाओं को मृत सेल लाल ताली व्यवहार्यता किट का उपयोग कर ताली कोशिकामापी पर दोनों और एक प्रवाह कोशिकामापी पर मृत सेल की आबादी की पहचान अभिकर्मक के साथ दाग रहे थे.
चित्रा 2 में ग्राफिकल प्रतिनिधित्व प्रत्येक कोशिका प्रकार है कि GFP व्यक्त कर रहे थे के लिए कुल जनसंख्या का प्रतिशत दिखाते हैं. ये डेटा दिखाना है कि ताली कोशिकामापी एक प्रवाह cytometer द्वारा डेटा उत्पन्न करने के लिए तुलनीय आंकड़ों का उत्पादन.
चित्रा 1. कोशिकाओं को ठीक से विश्लेषण किया जाना चाहिए पहले विश्लेषण के लिए उचित (1 x 10 5 करने के लिए 1 x 10 7 कोशिकाओं की सिफारिश कर रहे हैं) सेल सांद्रता के साथ. केंद्रित ताली सेलुलर विश्लेषण स्लाइड्स (बाएं) में ध्यान कोशिकाओं को समान रूप से घसेल भर में प्रत्येक कोशिका (बीच में) कोशिकाओं के चारों ओर एक उज्ज्वल प्रभामंडल के साथ सन्दूक, जब पृष्ठभूमि और कोशिकाओं के किनारों के बीच संक्रमण फजी हैं और कोशिकाओं अपरिभाषित (अधिकार) सीमाओं कक्ष शायद overcounted जब वे उज्ज्वल है undercounted हो सकता है केन्द्रों और अंधेरे perimeters.
चित्रा 2. छवि आधारित ताली cytometer से प्रतिदीप्त प्रोटीन अभिव्यक्ति डेटा प्रवाह cytometry का उपयोग कर प्राप्त करने के लिए तुलनीय गणना 4 व्यवहार्य कोशिकाओं में विभिन्न सेल लाइनों में GFP अभिव्यक्ति के परिणाम के एक पक्ष द्वारा साइड तुलना है..
Discussion
हम सिर्फ व्यवहार्यता का प्रदर्शन मायने रखता है और GFP अभिव्यक्ति का आकलन ताली - छवि के आधार cytometer का उपयोग करने के लिए एक प्रक्रिया को विस्तृत किया है. उसी प्रक्रिया का उपयोग करना, इस कोशिकामापी सहित अन्य assays के एक नंबर प्रदर्शन करने में सक्षम है: apoptosis आरएफपी, और सेल व्यवहार्यता गैर transduced कोशिकाओं का उपयोग विश्लेषण.
सेल व्यवहार्यता, जीन अभिव्यक्ति और apoptosis के Fluorometric assays में जैव चिकित्सा अनुसंधान 7-12 कुंजी तरीके बन गए हैं. अतीत, अलग इंस्ट्रूमेंटेशन में कोशिकाओं के बारे में मात्रात्मक और दृश्य सूचना प्राप्त इस्तेमाल किया गया है. जबकि एक विषम आबादी के भीतर कोशिकाओं के बारे में मात्रात्मक जानकारी प्रवाह cytometry के उपयोग के माध्यम से हुई, दृश्य या गुणात्मक जानकारी प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी 1-4 के उपयोग के माध्यम से इकट्ठा किया गया. यहाँ, हम एक तकनीक है कि जनसंख्या और व्यक्तिगत सेल के अध्ययन के बीच की खाई को पुल उपस्थित थे. ताली छवि के आधार cytometer, मात्रात्मक दा का उपयोगटा और व्यक्तिगत कोशिकाओं या सेल आबादियों के बारे में दृश्य कक्ष डेटा एक साथ एकत्र किया जा सकता है. ताली साधन जीन की अभिव्यक्ति का आकलन, apoptosis assays, दवा की प्रभावकारिता का अध्ययन, और रोग प्रगति का आकलन सहित आवेदनों की एक श्रृंखला के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.
ताली छवि के आधार cytometer captures और उज्ज्वल क्षेत्र है, लाल प्रतिदीप्ति और हरे रंग प्रतिदीप्ति छवियों का विश्लेषण करती है, कक्षों की subpopulations के बारे में जानकारी प्राप्त की जा करने के लिए अनुमति है. उदाहरण के लिए, इस परख में, हम GFP-व्यक्त सेल मृत सेल लाल डाई का उपयोग करते हुए जनसंख्या के भीतर जीवित कोशिकाओं से मृत कोशिकाओं भेद करने में सक्षम थे. यह व्यवहार्य कोशिकाओं व्यक्त GFP की माप सटीकता देता है, और बहाव के प्रसंस्करण के लिए useable कोशिकाओं की आबादी को पहचानती है. यह नोट करना महत्वपूर्ण है कि जनसंख्या में मृत कोशिकाओं संस्कृति में सामान्य कोशिका मृत्यु या कोशिका मृत्यु की वजह से पर्यावरण की स्थिति (जैसे trypsinization, या सहित विभिन्न स्रोतों से उत्पन्न हो सकता हैअभिकर्मक / पारगमन चुना विधि द्वारा प्रेरित ATH).
यहाँ हम U2OS कोशिकाओं के साथ ताली कोशिकामापी का उपयोग प्रदर्शित करता है. इसी तरह के तरीकों सबसे स्तनधारी और कीट कोशिकाओं का उपयोग किया जा सकता है है. प्रत्येक कोशिका लाइन के लिए, ताली कोशिकामापी मात्रात्मक GFP अभिव्यक्ति डेटा, जो एक मानक प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी का उपयोग कोशिकाओं के एक दृश्य निरीक्षण के साथ संभव नहीं है का उत्पादन किया. हालांकि इन परिणामों प्रवाह cytometry करने के लिए तुलना कर रहे हैं, वे समय का एक अंश में एकत्र कर रहे हैं. कोशिकामापी सही व्यास में गिनती 60 सुक्ष्ममापी से 5 सुक्ष्ममापी के बीच कोशिकाओं के लिए सक्षम है, 1 x 10 5 1 x 10 7 कोशिकाओं / एमएल के एक एकाग्रता में आदर्श है.
यह महत्वपूर्ण है कि सबसे मानक मृत सेल लाल धुंधला प्रोटोकॉल यहाँ वर्णित सहित धुंधला प्रोटोकॉल, बिंदु, propidium आयोडाइड का उपयोग करने के लिए रहते हैं और मृत कोशिकाओं को भेद. यह एक चुनौती प्रस्तुत करता है जब कोशिकाओं है कि सेंट के लिए किया गया permeabilized में व्यवहार्यता का आकलनमार्करों के intracellular aining, के बाद से PI एक समझौता झिल्ली के साथ किसी भी सेल दाग होगा. चूंकि किसी भी फ्लोरोसेंट रंजक या प्रोटीन है कि हरे या लाल प्रतिदीप्ति चैनल के साथ पता लगाया जा सकता है ताली cytometer छवि के आधार पर विश्लेषण किया जा सकता है, भविष्य के अध्ययन जैसे amine प्रतिक्रियाशील व्यवहार्यता रंजक चार वैकल्पिक रंगों के इस्तेमाल का पता लगाने सकता है. Perfetto एट अल द्वारा एक 2006 के अध्ययन 12. रहते हैं और मृत सेल आबादी भेदभाव में इन रंगों का उपयोग करने के लिए आसान और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य हो पाया .
ध्यान दें कि ताली assays के प्रदर्शन कर सकते हैं के प्रकार के संबंध के साथ सीमाएं हैं. उदाहरण के लिए, के बाद से साधन के द्वारा प्रयोग किया जाता उद्देश्य 4X है, गिनती ऑपरेशन बड़ा प्रकार की कोशिकाओं के लिए सीमित कर रहे हैं: जैसे mitochondria या vesicles के उप सेलुलर संरचनाओं, और बैक्टीरियल कोशिकाओं की मात्रा निर्धारित नहीं किया जा सकता है. यह भी ध्यान रखें कि ताली में चैनलों का पता लगाने fluorophores कि उत्तेजित और चैनल के अंदर फेंकना करने के लिए सीमित कर रहे हैं. जबकि YFP और उज्ज्वल mCherry संकेतों गएक पता लगाया जा, dimmer mCherry संकेत नहीं कर सकते हैं. अंत में, ताली केवल निलंबन में कोशिकाओं का विश्लेषण करती है. यह सही किसी स्लाइड का पालन कोशिकाओं गिनती नहीं होगा. इसके अलावा, जबकि वहाँ कोशिकाओं है कि अनियमित आकार के हैं, कुछ खमीर और प्राथमिक कोशिकाओं सहित गिनती के लिए केवल सीमित क्षमता है.
इसके अलावा, भविष्य के अध्ययन की संभावना मार्करों के intracellular अभिव्यक्ति का आकलन करने में इस प्रणाली के उपयोग को संबोधित करेंगे. व्यक्तिगत रंजक आसन्न चैनलों के साथ वर्णक्रमीय ओवरलैप, Invitrogen ऑनलाइन SpectraViewer उपकरण (का उपयोग करने के लिए जाँच की जा सकती है / www.invitrogen.com spectraviewer). इस प्रौद्योगिकी के नयापन देखते हुए आवेदनों की पूरी रेंज अभी तक की खोज की जा.
सारांश में, यहाँ ताली cytometer छवि के आधार प्रदर्शन एक नई तकनीक है कि एक साथ और सेल आबादी के दृश्य विश्लेषण के लिए अनुमति देता है प्रस्तुत करता है, व्यक्ति की कोशिकाओं के मूल्यांकन के रूप में अच्छी तरह के रूप में सेल सक्षमएक सरल कार्यप्रवाह के साथ एक कॉम्पैक्ट प्रारूप में एल आबादी.
Disclosures
Krissy Remple और लॉरेल स्टोन जीवन टेक्नोलॉजीज, जो इस लेख में इस्तेमाल साधन उत्पादित कर्मचारी हैं. जीवन टेक्नोलॉजीज इस वीडियो के उत्पादन के लेख प्रायोजित किया है.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Tali Image-Based Cytometer | Invitrogen | T10796 | |
| Tali Cellular Analysis Slides, 50 Slides | Invitrogen | T10794 | |
| Tali Cellular Analysis Slides, 500 slides | Invitrogen | T10795 | |
| Tali Viability Kit - Dead Cell Red | Invitrogen | A10786 | |
| Tali Viability Kit - Dead Cell Green | Invitrogen | A10787 | |
| Tali Apoptosis Kit | Invitrogen | A10788 | |
| U2OS cells |
References
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